| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 符号和缩略语 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-35页 |
| 1.1 大观霉素概述 | 第14-16页 |
| 1.1.1 大观霉素的理化性质 | 第14-15页 |
| 1.1.2 大观霉素的抗菌作用及作用机制 | 第15-16页 |
| 1.1.3 大观霉素的应用 | 第16页 |
| 1.2 大观霉素的生产 | 第16-17页 |
| 1.2.1 大观霉素的生产菌种 | 第16页 |
| 1.2.2 大观霉素生产水平 | 第16-17页 |
| 1.2.3 大观霉素生产厂家 | 第17页 |
| 1.3 壮观链霉菌的菌种选育及生物合成 | 第17-20页 |
| 1.3.1 诱变育种 | 第17-18页 |
| 1.3.2 原生质体育种 | 第18页 |
| 1.3.3 基因工程育种 | 第18-19页 |
| 1.3.4 优良菌株的高效筛选 | 第19-20页 |
| 1.3.5 大观霉素的生物合成 | 第20页 |
| 1.4 全基因组重排技术 | 第20-30页 |
| 1.4.1 原生质体融合与基因组重排 | 第20-22页 |
| 1.4.1.1 原生质体融合 | 第20-21页 |
| 1.4.1.2 基因组重排技术 | 第21-22页 |
| 1.4.2 基因组重排的过程 | 第22-26页 |
| 1.4.2.1 突变体库的建立 | 第23-24页 |
| 1.4.2.2 递推式原生质体融合 | 第24-25页 |
| 1.4.2.3 目标表型的筛选 | 第25-26页 |
| 1.4.3 基因组重排技术的应用 | 第26-30页 |
| 1.4.3.1 增加产品的产量 | 第26-28页 |
| 1.4.3.2 增强菌株的耐受性 | 第28-29页 |
| 1.4.3.3 增强对底物的吸收利用 | 第29-30页 |
| 1.4.3.4 其它应用 | 第30页 |
| 参考文献 | 第30-35页 |
| 第二章 基因组重排与传统育种相结合选育大观霉素高产菌株 | 第35-49页 |
| 2.1 前言 | 第35页 |
| 2.2 材料与方法 | 第35-41页 |
| 2.2.1 菌种 | 第35-36页 |
| 2.2.2 培养基 | 第36页 |
| 2.2.3 试剂 | 第36-37页 |
| 2.2.3.1 主要试剂 | 第36-37页 |
| 2.2.3.2 主要溶液 | 第37页 |
| 2.2.4 实验仪器 | 第37-38页 |
| 2.2.5 标准曲线的绘制及样品测定方法 | 第38-39页 |
| 2.2.5.1 大观霉素样品的预处理方法 | 第38页 |
| 2.2.5.2 生物效价的测定 | 第38-39页 |
| 2.2.6 原生质体的紫外诱变 | 第39页 |
| 2.2.7 壮观链霉菌的基因组重排 | 第39页 |
| 2.2.8 壮观链霉菌的NTG诱变 | 第39页 |
| 2.2.8.1 链霉素、新霉素最小抑制浓度测定 | 第39页 |
| 2.2.8.2 NTG诱变筛选抗性菌株 | 第39页 |
| 2.2.9 高产菌株的筛选 | 第39-40页 |
| 2.2.10 重排子全蛋白电泳的鉴定 | 第40-41页 |
| 2.2.10.1 菌丝体的培养 | 第40页 |
| 2.2.10.2 融合突变菌株的蛋白提取 | 第40页 |
| 2.2.10.3 凝胶的制备 | 第40页 |
| 2.2.10.4 电泳 | 第40-41页 |
| 2.2.10.5 染色 | 第41页 |
| 2.2.11 壮观链霉菌的育种改良实验技术路线 | 第41页 |
| 2.3 结果 | 第41-46页 |
| 2.3.1 标准曲线的建立 | 第41-42页 |
| 2.3.2 原生质体的紫外诱变 | 第42-43页 |
| 2.3.3 基因组重排选育高产菌株 | 第43-44页 |
| 2.3.4 融合子的鉴定 | 第44页 |
| 2.3.5 NTG诱变改良壮观链霉菌 | 第44-45页 |
| 2.3.6 基因组重排筛选双抗突变体 | 第45-46页 |
| 2.3.7 本章小结 | 第46页 |
| 2.4 讨论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 第三章 响应面法优化大观霉素发酵培养基 | 第49-70页 |
| 3.1 前言 | 第49-50页 |
| 3.2 实验材料 | 第50-51页 |
| 3.2.1 实验菌株 | 第50页 |
| 3.2.2 主要药品、试剂 | 第50页 |
| 3.2.3 主要仪器设备 | 第50-51页 |
| 3.2.4 培养基 | 第51页 |
| 3.2.4.1 斜面培养基 | 第51页 |
| 3.2.4.2 种子培养基 | 第51页 |
| 3.2.4.3 初始发酵培养基 | 第51页 |
| 3.2.4.4 培养基Ⅱ | 第51页 |
| 3.3 实验方法 | 第51-52页 |
| 3.3.1 菌种的培养 | 第51页 |
| 3.3.1.1 斜面培养条件 | 第51页 |
| 3.3.1.2 种子培养条件 | 第51页 |
| 3.3.1.3 发酵培养条件 | 第51页 |
| 3.3.2 发酵液的预处理 | 第51页 |
| 3.3.3 生物效价的测定方法 | 第51-52页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第52-57页 |
| 3.4.1 最适碳源的筛选 | 第52-53页 |
| 3.4.2 最适氮源的筛选 | 第53-55页 |
| 3.4.3 微量元素对大观霉素的影响 | 第55页 |
| 3.4.4 氨基酸对大观霉素产量的影响 | 第55-56页 |
| 3.4.5 维生素对大观霉素产量的影响 | 第56-57页 |
| 3.4.6 CaCl_2对大观霉素产量的影响 | 第57页 |
| 3.5 碳、氮源的复合试验 | 第57-62页 |
| 3.5.1 碳源的复合 | 第58-60页 |
| 3.5.2 氮源的复合 | 第60-62页 |
| 3.6 单因素的爬坡实验 | 第62-64页 |
| 3.6.1 碳源的爬坡试验 | 第62页 |
| 3.6.2 氮源的爬坡试验 | 第62-63页 |
| 3.6.3 C0~(2+)的爬坡试验 | 第63-64页 |
| 3.7 响应面法优化大观霉素发酵培养基 | 第64-68页 |
| 3.7.1 二次回归拟合及方差分析 | 第64-66页 |
| 3.7.2 响应面分析及最优培养基成分的确定 | 第66-68页 |
| 3.8 本章小结 | 第68页 |
| 参考文献 | 第68-70页 |
| 第四章 5L发酵罐大观霉素发酵生产初探 | 第70-84页 |
| 4.1 前言 | 第70-71页 |
| 4.2 材料与方法 | 第71-73页 |
| 4.2.1 材料 | 第71-72页 |
| 4.2.1.1 菌种 | 第71页 |
| 4.2.1.2 培养基 | 第71页 |
| 4.2.1.3 试剂 | 第71页 |
| 4.2.1.4 溶液 | 第71-72页 |
| 4.2.1.5 仪器 | 第72页 |
| 4.2.2 方法 | 第72-73页 |
| 4.2.2.1 菌种培养 | 第72页 |
| 4.2.2.2 发酵罐实验方法 | 第72页 |
| 4.2.2.3 分析方法 | 第72页 |
| 4.2.2.4 菌体生物量的测定 | 第72页 |
| 4.2.2.5 残糖的测定 | 第72-73页 |
| 4.2.2.6 残余甘油的测定 | 第73页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第73-82页 |
| 4.3.1 种子液对大观霉素发酵的影响 | 第73-76页 |
| 4.3.1.1 种龄对大观霉素发酵的影响 | 第73-75页 |
| 4.3.1.2 种子培养基对发酵的影响 | 第75-76页 |
| 4.3.1.3 不同处理的种子对发酵的影响 | 第76页 |
| 4.3.2 甘油测定标准曲线的建立 | 第76-77页 |
| 4.3.3 5 L发酵罐小试 | 第77-82页 |
| 4.3.3.1 发酵过程的菌丝体形态 | 第77-79页 |
| 4.3.3.2 发酵过程中pH变化 | 第79页 |
| 4.3.3.3 发酵过程中的生物量 | 第79-80页 |
| 4.3.3.4 残余甘油的测定 | 第80-81页 |
| 4.3.3.5 发酵过程中溶氧 | 第81页 |
| 4.3.3.6 发酵过程中生物效价 | 第81-82页 |
| 4.4 本章小结 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-84页 |
| 第五章 结论与展望 | 第84-86页 |
| 5.1 结论 | 第84-85页 |
| 5.2 展望 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第87页 |