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新型隐球酵母LAC1基因正相关反义链的克隆与转录研究

摘要第1-6页
Abstract第6-7页
目录第7-9页
第一章 前言第9-32页
 第一节 新型隐球酵母的研究进展第9-23页
     ·新型隐球酵母简介第9-12页
     ·新型隐球酵母的致病因子第12-21页
     ·新型隐球酵母作为条件致病真菌研究模式第21-23页
 第二节 反义RNA简介与研究进展第23-32页
     ·反义链转录产物基本概念第23-25页
     ·NAT现象是广泛存在的第25-26页
     ·调节反义链活性的机制第26-27页
     ·NAT的作用机制第27-32页
第二章 实验材料与方法第32-64页
 第一节 实验材料第32-41页
     ·菌种第32页
     ·质粒第32-33页
     ·培养基第33-34页
     ·试剂第34-36页
     ·自配溶液第36-37页
     ·引物和测序第37-39页
     ·仪器第39-41页
 第二节 实验方法第41-64页
     ·5’RACE和3’RACE第41-51页
     ·实时定量PCR(qPCR)第51-53页
     ·表达ALAC载体的构建第53-64页
第三章 实验结果与分析第64-82页
 第一节 克隆LAC1反义链(Antisense LAC1,ALAC1)第64-68页
     ·H99中存在ALAC1的转录第64-65页
     ·ALAC15’-末端序列第65-66页
     ·ALAC13’-末端可能存在修饰第66-67页
     ·目前所获得的ALAC1长度第67-68页
 第二节 实时定量PCR检测SLAC1和ALAC1之关系第68-78页
     ·实时定量PCR(qPCR)引物设计和条件摸索第68-70页
     ·H99不同突变株的SLAC1和ALAC1的转录情况第70-75页
     ·H99在不同条件下SLAC1和ALAC1的转录情况第75-78页
 第三节 反义链过表达对漆酶表达的影响第78-82页
     ·构建过表达载体pCIP3 plus+ALAC第78-80页
     ·pCIP3 plus+ALAC在H99中的表达第80-82页
第四章 讨论第82-85页
 第一节 ALAC1的序列特征第82页
     ·SLAC1-ALAC1对的类型第82页
     ·ALAC13’-末端特征第82页
 第二节 SLAC1和ALAC1的"正相关表达"关系第82-83页
 第三节 ALAC1的转录量总是远小于SLAC第83页
 第四节 trans-ALAC1的调控作用第83-84页
 第五节 反义链的来源问题第84-85页
小结第85-86页
参考文献第86-92页
致谢第92-93页
个人简介第93-94页

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