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HCV多CTL表位树突状细胞疫苗的构建及体外刺激T细胞反应

缩略语表第6-8页
中文摘要第8-11页
Abstract第11-14页
前言第15-16页
文献回顾第16-28页
实验一 树突状细胞体外诱导及鉴定第28-35页
    1 材料第28-30页
        1.1 外周血来源第28页
        1.2 主要试剂第28-29页
        1.3 主要仪器与耗材第29-30页
    2 方法第30-32页
        2.1 密度梯度离心法分离人外周血 PBMC第30-31页
        2.2 免疫磁珠法分选人 CD14+细胞第31页
        2.3 人 CD14+细胞诱导分化为树突状细胞第31页
        2.4 流式细胞仪检测树突状细胞表型第31-32页
    3 结果第32-33页
        3.1 细胞形态观察第32-33页
        3.2 细胞表型分析第33页
    4 讨论第33-35页
实验二 负载 HCV 多表位的腺病毒刺激 DC第35-47页
    1 材料第35-38页
        1.1 外周血来源第35页
        1.2 腺病毒第35页
        1.3 引物第35页
        1.4 主要试剂第35-38页
        1.5 主要仪器与耗材第38页
    2 方法第38-42页
        2.1 重组腺病毒感染树突状细胞第38-39页
        2.2 流式细胞仪分析 DC 表型变化第39页
        2.3 RT-PCR 检测 DC 细胞转染的重组 HCV 多表位抗原基因序列第39-41页
        2.4 Western blot 检测 HCV 多表位抗原在 DC 内的表达第41-42页
        2.5 统计学处理第42页
    3 结果第42-45页
        3.1 感染效率及最佳 MOI 的确定第42-43页
        3.2 腺病毒感染 DC 表型分析第43页
        3.3 重组 HCV 多 CTL 表位抗原的 PCR 鉴定第43-44页
        3.4 重组 HCV 多 CTL 表位抗原的表达第44-45页
    4 讨论第45-47页
实验三 感染后 DC 刺激 T 细胞应答第47-55页
    1 材料第47-48页
        1.1 DC 和腺病毒第47页
        1.2 T 细胞和 Huh7.5 细胞和质粒第47页
        1.3 主要试剂和仪器第47-48页
    2 方法第48-51页
        2.1 混合淋巴细胞培养第48页
        2.2 ELISA 检测 DC 上清 IL-12p70 和混合淋巴细胞培养上清 IFN-γ第48-49页
        2.3 用 LDH 释放法检测 CTL 活性第49-51页
        2.4 统计学处理第51页
    3 结果第51-53页
        3.1 混合淋巴细胞反应第51页
        3.2 DC 上清 IL-12p70 含量和混合淋巴细胞培养上清 IFN-γ含量第51-53页
        3.3 CTL 杀伤效应第53页
    4 讨论第53-55页
小结第55-56页
参考文献第56-65页
个人简历和研究成果第65-67页
致谢第67-68页

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