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鱼类蛋白激酶Z(PKZ)诱导细胞凋亡分析

摘要第3-4页
ABSTRACT第4页
目录第5-7页
第一章 文献综述第7-16页
    1.1 Z-DNA和Z-RNA的结构与功能第7-9页
        1.1.1 Z-DNA的结构和功能第7-8页
        1.1.2 Z-RNA的结构和功能第8-9页
    1.2 Zα结构域以及其研究方法第9-11页
        1.2.1 Zα结构域第9-10页
        1.2.2 Zα与Z-DNA的相互作用研究方法第10-11页
    1.3 PKR和PKZ第11-12页
    1.4 RNA干扰和细胞凋诱导亡第12-14页
        1.4.1 RNA干扰第12-13页
        1.4.2 细胞凋亡第13-14页
    1.5 本研究的目的和意义第14-16页
第二章 材料和方法第16-27页
    2.1 仪器与试剂第16-18页
        2.1.1 主要仪器第16页
        2.1.2 主要试剂、试剂盒第16-17页
        2.1.3 实验材料第17页
        2.1.4 引物第17-18页
    2.2 相关软件第18页
    2.3 实验方法第18-27页
        2.3.1 Zα蛋白的表达和定量第18-20页
        2.3.2 Zα蛋白与核酸结合分析第20-22页
        2.3.3 PKZ与细胞凋亡分析第22-27页
第三章 实验结果第27-38页
    3.1 蛋白纯化结果第27页
    3.2 蛋白定量结果第27-28页
    3.3 表达多肽能够将Hairpin6 DNA翻转为Z型构象第28-31页
        3.3.1 Hairpin 6核酸在高盐能够形成Z构象第28-29页
        3.3.2 Zα对Hairpin 6 RNA构象的影响第29-31页
        3.3.3 磷酸化酶对Zα翻转DNA功能的影响第31页
    3.4 Zα蛋白与核酸的相互作用第31-33页
        3.4.1 Zα蛋白与CG序列、Primer序列、TA序列的凝胶阻滞结合第31-32页
        3.4.2 发卡序列与多肽的亲和性分析第32-33页
    3.5 草鱼肾细胞内PKZ的沉默检测第33-35页
        3.5.1 SiRNA的提取与定量第33-34页
        3.5.2 细胞内PKZ的表达与沉默第34-35页
    3.6 PKZ的激活能诱导细胞凋亡第35-38页
        3.6.1 MTT法测定PKZ对细胞活性影响第35-37页
        3.6.2 DAPI染色法测定PKZ对细胞活性影响第37-38页
第四章 分析与讨论第38-42页
    4.1 Zα功能第38-39页
        4.1.1 Zα与RNA分子结合第38-39页
        4.1.2 凝胶阻滞进一步证明Zα与核酸结合第39页
        4.1.3 Zα结构域无磷酸化效应第39页
    4.2 PKZ与细胞凋亡结果分析与讨论第39-41页
        4.2.1 PKZ在外源刺激下的高表达第39-40页
        4.2.2 PKZ诱导细胞凋亡第40页
        4.2.3 PKZ信号通路的进一步确认第40-41页
    4.3 关于PKZ的展望第41-42页
参考文献第42-47页
致谢第47-48页
附录:研究成果第48页

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