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三种小儿常见病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
第一章 前言第13-30页
    1.1 呼吸道合胞病毒第13-16页
        1.1.1 生物学性状第13-14页
        1.1.2 流行病学第14-15页
        1.1.3 临床表现第15-16页
        1.1.4 临床诊断第16页
    1.2 腺病毒第16-21页
        1.2.1 生物学性状第16-18页
        1.2.2 流行病学第18-19页
        1.2.3 临床表现第19-20页
        1.2.4 临床诊断第20-21页
    1.3 轮状病毒第21-24页
        1.3.1 生物学性状第21-22页
        1.3.2 流行病学第22页
        1.3.3 临床表现第22-23页
        1.3.4 临床诊断第23-24页
    1.4 实时荧光定量PCR第24-28页
        1.4.1 实时荧光定量PCR第24-25页
        1.4.2 TaqMan探针荧光定量PCR第25-26页
        1.4.3 复合探针荧光定量PCR第26-28页
    1.5 本试验的立题依据和基本思路第28-30页
        1.5.1 立题依据第28页
        1.5.2 基本思路第28-30页
第二章 呼吸道合胞病毒荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用第30-45页
    2.1 引言第30页
    2.2 实验材料、试剂与实验仪器第30-31页
    2.3 实验方法与步骤第31-33页
        2.3.1 引物探针第31页
        2.3.2 RSV病毒RNA的提取第31-32页
        2.3.3 TaqMan探针与复合探针检测结果比较第32页
        2.3.4 实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立第32页
        2.3.5 线性关系检测第32页
        2.3.6 灵敏度实验第32-33页
        2.3.7 特异性实验第33页
        2.3.8 精密性实验第33页
        2.3.9 临床标本检测第33页
    2.4 结果第33-44页
        2.4.1 引物与探针第33-36页
        2.4.2 TaqMan探针与复合探针检测结果比较第36-37页
        2.4.3 实时荧光定量RT-PCR检测第37-38页
        2.4.4 线性关系分析第38页
        2.4.5 灵敏度分析第38-40页
        2.4.6 特异性分析第40-41页
        2.4.7 精密性分析第41-43页
        2.4.8 临床标本的检测分析第43-44页
    2.5 讨论第44-45页
第三章 腺病毒荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用第45-61页
    3.1 引言第45页
    3.2 实验材料、试剂与实验仪器第45-46页
    3.3 实验方法与步骤第46-49页
        3.3.1 引物探针第46-47页
        3.3.2 ADV病毒DNA的提取第47页
        3.3.3 TaqMan探针与复合探针检测结果比较第47页
        3.3.4 实时荧光定量PCR检测方法的建立第47-48页
        3.3.5 线性关系检测第48页
        3.3.6 灵敏度实验第48页
        3.3.7 特异性实验第48-49页
        3.3.8 精密性实验第49页
        3.3.9 临床标本检测第49页
    3.4 结果第49-60页
        3.4.1 引物与探针第49-52页
        3.4.2 TaqMan探针与复合探针检测结果比较第52-53页
        3.4.3 实时荧光定量PCR检测第53-54页
        3.4.4 线性关系分析第54页
        3.4.5 灵敏度分析第54-56页
        3.4.6 特异性分析第56-57页
        3.4.7 精密性分析第57-59页
        3.4.8 临床标本的检测分析第59-60页
    3.5 讨论第60-61页
第四章 轮状病毒荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用第61-78页
    4.1 引言第61页
    4.2 实验材料、试剂与实验仪器第61-62页
    4.3 实验方法与步骤第62-65页
        4.3.1 引物探针第62-63页
        4.3.2 RV病毒RNA的提取第63页
        4.3.3 TaqMan探针与复合探针检测结果比较第63页
        4.3.4 实时荧光定量RT-PCR检测第63-64页
        4.3.5 线性关系检测第64页
        4.3.6 灵敏度实验第64页
        4.3.7 特异性实验第64页
        4.3.8 精密性实验第64-65页
        4.3.9 临床标本检测第65页
    4.4 结果第65-77页
        4.4.1 引物与探针第65-70页
        4.4.2 TaqMan探针与复合探针检测结果比较第70-71页
        4.4.3 实时荧光定量PCR检测第71页
        4.4.4 线性关系分析第71-72页
        4.4.5 灵敏度分析第72-73页
        4.4.6 特异性分析第73页
        4.4.7 精密性分析第73-75页
        4.4.8 临床标本的检测分析第75-77页
    4.5 讨论第77-78页
第五章 总结与展望第78-79页
附录1 本文所使用的仪器第79-80页
附录2:TIANamp Virus RNA Kit病毒RNA提取试剂盒说明书第80-81页
附录3:PCR扩增产物测序图第81-82页
附录4:RSV引物探针同源性分析第82-86页
附录5:ADV引物探针同源性分析第86-92页
附录6:RV-1引物探针同源性分析第92-99页
附录7:RV-2引物探针同源性分析第99-106页
参考文献第106-116页
致谢第116-117页
学位论文评阅及答辩情况表第117页

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