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丙戊酸促进小鼠成纤维细胞重编程机制的研究

中文摘要第6-9页
Abstract第9-12页
中英文缩略词对照表第16-19页
第1 章文献综述第19-31页
    1.1 诱导多能干细胞的定义与意义第19-21页
        1.1.1 诱导多能干细胞的定义第19-20页
        1.1.2 诱导多能干细胞的意义第20-21页
    1.2 诱导多能干细胞的进展第21-28页
        1.2.1 诱导多能干细胞的方法进展第21-23页
        1.2.2 诱导多能干细胞过程中机制的研究进展第23-28页
    1.3 丙戊酸第28页
    1.4 硫酸铜第28页
    1.5 小结及本研究选题依据第28-31页
第2章 实验研究 1:丙戊酸促进小鼠成纤维细胞重编程第31-47页
    2.1 前言第31-32页
    2.2 实验材料第32-34页
        2.2.1 主要仪器第32-33页
        2.2.2 主要材料第33-34页
    2.3 实验方法第34-40页
        2.3.1 OSKM质粒的扩增第34-35页
        2.3.2 OSKM质粒的小量提取第35页
        2.3.3 绿色荧光蛋白质粒(p Green质粒)扩增与小量提取第35页
        2.3.4 293T细胞的培养、传代、冻存与复苏第35-36页
        2.3.5 慢病毒包装第36页
        2.3.6 MBW-2 细胞的复苏、培养、传代与冻存第36-37页
        2.3.7 滋养层细胞制备第37-38页
        2.3.8 重编程第38-39页
        2.3.9 碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, AP)染色第39页
        2.3.10 衰老相关 β-gal染色第39-40页
        2.3.11 统计学分析第40页
    2.4 实验结果第40-43页
        2.4.1 小鼠胚胎原代成纤维细胞的培养第40-41页
        2.4.2 AP染色第41-42页
        2.4.3 衰老相关 β-gal染色第42-43页
    2.5 讨论第43-46页
    2.6 小结第46-47页
第3章 实验研究 2:丙戊酸对小鼠成纤维细胞衰老的影响第47-63页
    3.1 前言第47页
    3.2 实验材料第47页
        3.2.1 主要仪器第47页
        3.2.2 主要材料第47页
    3.3 实验方法第47-51页
    3.4 实验结果第51-59页
        3.4.1 不同浓度Cu SO4处理 24 h后细胞的存活率不同第51-53页
        3.4.2 MBW-2 细胞的形态第53-54页
        3.4.3 MDFs的形态第54-55页
        3.4.4 MBW-2 细胞衰老相关 β-gal染色第55-56页
        3.4.5 MDFs衰老相关 β-gal染色第56-57页
        3.4.6 BDFs衰老相关 β-gal染色第57页
        3.4.7 SRB法检测MBW-2 细胞和MDFs的增殖第57-59页
    3.5 讨论第59-61页
    3.6 小结第61-63页
第4章 实验研究 3:丙戊酸抑制衰老的机制探究第63-83页
    4.1 前言第63页
    4.2 实验材料第63-65页
        4.2.1 主要仪器第63-64页
        4.2.2 主要材料第64-65页
    4.3 实验方法第65-73页
        4.3.1 细胞周期第65-66页
        4.3.2 全RNA提取第66-67页
        4.3.3 c DNA合成第67页
        4.3.4 PCR第67-68页
        4.3.5 q PCR第68页
        4.3.6 Western blot第68-73页
        4.3.7 统计学分析第73页
    4.4 实验结果第73-77页
        4.4.1 VPA解除Cu SO4导致的细胞周期阻滞第73-75页
        4.4.2 VPA抑制Cu SO4导致的衰老相关基因上调第75-77页
        4.4.3 Western blot第77页
    4.5 讨论第77-81页
    4.6 小结第81-83页
第5章 结论第83-85页
课题创新性总结第85-87页
参考文献第87-101页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第101-103页
致谢第103页

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