重组人白介素-2纯化工艺的改进及放大研究
摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第1章 绪论 | 第17-35页 |
1.1 IL-2的相关研究 | 第17-23页 |
1.1.1 IL-2的介绍 | 第17-18页 |
1.1.2 IL-2的性质 | 第18页 |
1.1.3 IL-2的生物学作用 | 第18-19页 |
1.1.4 IL-2的研究进展 | 第19-21页 |
1.1.4.1 重组人白介素-2药物上市 | 第19-20页 |
1.1.4.2 白介素-2的融合蛋白 | 第20页 |
1.1.4.3 白介素-2的化学修饰 | 第20-21页 |
1.1.5 IL-2的临床应用 | 第21-23页 |
1.1.5.1 抗肿瘤治疗 | 第21页 |
1.1.5.2 抗病毒感染 | 第21-22页 |
1.1.5.3 治疗细菌性感染 | 第22页 |
1.1.5.4 治疗自身免疫性疾病 | 第22-23页 |
1.1.5.5 对其它疾病的治疗 | 第23页 |
1.2 重组人白介素-2的生产 | 第23-27页 |
1.2.1 人IL-2(rIL-2)的生产途径 | 第23页 |
1.2.2 重组人白介素-2的生产工艺流程 | 第23页 |
1.2.3 菌体培养及IL-2蛋白表达 | 第23-24页 |
1.2.4 IL-2蛋白的提取 | 第24-25页 |
1.2.5 IL-2包涵体获取 | 第25-26页 |
1.2.6 凝胶层析技术 | 第26-27页 |
1.2.7 蛋白质的复性 | 第27页 |
1.3 IL-2的发展现状及市场前景 | 第27-28页 |
1.4 选题的意义和研究方向 | 第28-35页 |
1.4.1 选题的意义 | 第28-29页 |
1.4.2 设备选型 | 第29-30页 |
1.4.2.1 结构参数 | 第29-30页 |
1.4.2.2 技术参数 | 第30页 |
1.4.3 细胞破碎方法调研 | 第30-32页 |
1.4.3.1 超声破碎法 | 第30页 |
1.4.3.2 高压均浆法 | 第30-32页 |
1.4.4 研究方向 | 第32-35页 |
第2章 细胞破碎技术的改进及放大 | 第35-51页 |
2.1 前言 | 第35-36页 |
2.2 材料与仪器 | 第36页 |
2.2.1 实验材料 | 第36页 |
2.2.2 仪器设备 | 第36页 |
2.2.3 溶液配制 | 第36页 |
2.3 菌体的准备 | 第36-37页 |
2.3.1 菌种复苏 | 第36页 |
2.3.2 一级种子制备 | 第36页 |
2.3.3 二级种子制备 | 第36-37页 |
2.3.4 发酵 | 第37页 |
2.4 超声破碎法提取包涵体 | 第37-38页 |
2.4.1 提取 | 第37-38页 |
2.4.2 洗涤 | 第38页 |
2.5 高压匀浆法提取包涵体 | 第38-39页 |
2.5.1 提取 | 第38页 |
2.5.2 洗涤 | 第38-39页 |
2.6 结果与讨论 | 第39-49页 |
2.6.1 超声波破碎 | 第39-42页 |
2.6.1.1 超声波破碎条件的考察 | 第39-40页 |
2.6.1.2 超声波破碎效果考察 | 第40-41页 |
2.6.1.3 洗涤后的电泳纯度 | 第41-42页 |
2.6.1.4 超声波破碎经济效益分析 | 第42页 |
2.6.2 高压匀浆破碎 | 第42-48页 |
2.6.2.1 高压匀浆破碎条件的考察 | 第43-46页 |
2.6.2.2 高压匀浆破碎效果考察 | 第46-47页 |
2.6.2.3 洗涤后的电泳纯度 | 第47-48页 |
2.6.2.4 高压匀浆破碎经济效益考察 | 第48页 |
2.6.3 高压匀浆破碎与超声波破碎对比 | 第48-49页 |
2.7 小结 | 第49-51页 |
第3章 凝胶层析工艺放大 | 第51-61页 |
3.1 前言 | 第51页 |
3.2 放大的理论基础 | 第51-53页 |
3.2.1 理论基础 | 第51-52页 |
3.2.2 纯化规模的核算 | 第52-53页 |
3.3 材料与仪器 | 第53-54页 |
3.3.1 实验材料 | 第53页 |
3.3.2 仪器设备 | 第53页 |
3.3.3 溶液配制 | 第53-54页 |
3.4 实验方法 | 第54-55页 |
3.4.1 层析柱的装填 | 第54页 |
3.4.2 层析柱的再生处理 | 第54页 |
3.4.3 层析柱上样 | 第54页 |
3.4.4 洗脱收峰 | 第54-55页 |
3.4.5 测蛋白浓度 | 第55页 |
3.4.6 层析效果评价 | 第55页 |
3.5 结果与讨论 | 第55-59页 |
3.5.1 原有工艺 | 第55-57页 |
3.5.1.1 层析参数 | 第55页 |
3.5.1.2 收率 | 第55-56页 |
3.5.1.3 电泳纯度 | 第56-57页 |
3.5.1.4 单位时间产率 | 第57页 |
3.5.2 放大后工艺 | 第57-59页 |
3.5.2.1 层析参数 | 第57页 |
3.5.2.2 收率 | 第57-58页 |
3.5.2.3 电泳纯度 | 第58-59页 |
3.5.2.4 单位时间产率 | 第59页 |
3.6 小结 | 第59-61页 |
第4章 复性过程放大研究 | 第61-77页 |
4.1 前言 | 第61页 |
4.2 放大的理论基础 | 第61-64页 |
4.2.1 理论基础 | 第61-62页 |
4.2.2 参数核算 | 第62-64页 |
4.3 材料与仪器 | 第64页 |
4.3.1 实验材料 | 第64页 |
4.3.2 仪器设备 | 第64页 |
4.3.3 溶液配制 | 第64页 |
4.4 实验方法 | 第64页 |
4.4.1 脱盐 | 第64页 |
4.4.2 复性 | 第64页 |
4.5 结果与讨论 | 第64-75页 |
4.5.1 原工艺 | 第64-68页 |
4.5.1.1 工艺参数 | 第65页 |
4.5.1.2 收率 | 第65页 |
4.5.1.3 蛋白质的复性 | 第65-66页 |
4.5.1.4 电泳纯度 | 第66-67页 |
4.5.1.5 生物学活性 | 第67-68页 |
4.5.1.6 单位时间产率 | 第68页 |
4.5.2 放大后工艺 | 第68-75页 |
4.5.2.1 工艺参数 | 第69页 |
4.5.2.2 收率 | 第69页 |
4.5.2.3 蛋白质的复性 | 第69-72页 |
4.5.2.4 电泳纯度 | 第72-73页 |
4.5.2.5 生物学活性 | 第73-74页 |
4.5.2.6 单位时间产率(效率) | 第74-75页 |
4.6 小结 | 第75-77页 |
第5章 结论及展望 | 第77-79页 |
5.1 结论 | 第77-78页 |
5.2 展望 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-83页 |
附录 | 第83-91页 |
致谢 | 第91-93页 |
作者及导师简介 | 第93-96页 |
附件 | 第96-97页 |