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绵羊类胚胎干细胞的分离与克隆

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-13页
前言第13-14页
第一章 胚胎干细胞的研究进展第14-29页
   ·干细胞的概念、分类、来源和研究的意义第14-15页
   ·胚胎干细胞主要研究进展第15-21页
     ·ES 细胞的主要研究进展第15-16页
     ·EG 细胞主要研究进展第16-17页
     ·小鼠胚胎干细胞的研究进展第17-18页
     ·人胚胎干细胞的研究进展第18-20页
     ·绵羊胚胎干细胞的研究进展第20-21页
     ·山羊ESCs 的研究历程第21页
   ·胚胎干细胞的生物学特性第21-22页
     ·哺乳动物胚胎干细胞的生物学特性第21-22页
     ·维持ES 细胞生物学特性的因子和分子机制第22页
   ·影响胚胎干细胞分离、培养的因素分析第22-25页
     ·遗传因素和个体差异第22页
     ·饲养层、血清成分、培养基和细胞因子第22-24页
     ·分离培养方式第24-25页
     ·胎龄、胚胎质量及胚胎冷冻第25页
   ·胚胎干细胞的鉴定方法第25-27页
     ·形态学鉴定第25-26页
     ·碱性磷酸酶活性检测第26页
     ·阶段特异性胚胎细胞表面抗原检测和全能性基因表达的检测第26页
     ·端粒酶活性和核型分析第26-27页
     ·体内和体外分化实验第27页
     ·嵌合体动物的制备和核移植实验第27页
   ·ES 细胞的问题与展望第27-29页
     ·问题第27-28页
     ·展望第28-29页
第二章 绵羊冷冻精液的制作和超数排卵的研究第29-37页
   ·材料第29-30页
     ·试验动物第29页
     ·试验仪器和试剂第29-30页
   ·试验方法第30-32页
     ·绵羊冷冻精液的制作第30-31页
     ·人工授精第31页
     ·绵羊胚胎的收集第31-32页
     ·胚胎冷冻与解冻第32页
   ·结果第32-35页
     ·绵羊冷冻精液解冻第32-33页
     ·绵羊胚胎的获取第33-34页
     ·超排效果第34-35页
   ·讨论第35-36页
   ·小结第36-37页
第三章 绵羊类胚胎干细胞的分离与克隆第37-54页
   ·材料第37-38页
     ·实验材料第37页
     ·实验仪器第37页
     ·主要试剂和培养液第37-38页
   ·试验方法第38-42页
     ·饲养层MEF 的制备第38-39页
     ·饲养层SEF 的制备第39-40页
     ·小鼠条件培养基的制备第40页
     ·绵羊类ES 细胞的分离与培养第40-41页
     ·绵羊类ESCS 的鉴定第41-42页
   ·结果第42-50页
     ·绵羊内细胞团的分离与培养第42-43页
     ·不同饲养层对绵羊类ES 细胞分离传代的影响第43-44页
     ·不同分离方法对绵羊类ES 细胞的分离培养的影响第44-45页
     ·不同培养基对绵羊类ES 细胞的分离培养的影响第45-46页
     ·不同胎龄对ES 细胞的分离传代的影响第46-47页
     ·冷冻胚胎对ES 细胞继续发育的影响第47-48页
     ·胚胎质量对分离培养绵羊类ES 细胞的影响第48页
     ·AKP 染色第48-49页
     ·核型检查第49页
     ·体外分化能力测定第49页
     ·绵羊类 ESCS 特定基因的 RT-PCR 鉴定结果第49-50页
   ·讨论第50-52页
     ·血清成分、培养基和细胞因子对绵羊ES 的分离克隆的影响第50-51页
     ·冷冻胚胎对绵羊ES 细胞分离克隆的影响第51页
     ·饲养层对绵羊类ES 细胞分离、克隆的影响第51-52页
     ·传代对ES 细胞的影响第52页
     ·不同胚龄对ES 细胞的影响第52页
   ·小结第52-54页
结论第54-55页
参考文献第55-61页
缩略词第61-62页
致谢第62-63页
作者简介第63页

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