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白桦杂交子代中外源基因表达及与甲基化关系研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 绪论第11-16页
    1.1 转基因白桦的研究背景第11页
    1.2 表观遗传学第11页
    1.3 植物DNA甲基化的遗传与变异第11-12页
        1.3.1 植物DNA甲基化的遗传第11-12页
        1.3.2 植物DNA甲基化的变异第12页
    1.4 植物DNA甲基化与转基因沉默第12-13页
    1.5 外源基因的遗传和表达稳定性第13页
    1.6 植物DNA甲基转移酶与甲基化有关的蛋白第13-14页
        1.6.1 MET1家族第13页
        1.6.2 CMT家族第13页
        1.6.3 DRM家族第13-14页
    1.7 DNA甲基化的研究方法第14-15页
        1.7.1 高效液相色谱法第14页
        1.7.2 亚硫酸盐测序法第14页
        1.7.3 甲基化敏感的限制性内切酶法第14页
        1.7.4 MSAP法第14页
        1.7.5 染色质免疫共沉淀第14-15页
    1.8 本研究的目的意义第15-16页
2 外源基因在转基因白桦杂交子代中的遗传稳定性第16-27页
    2.1 材料与方法第16-21页
        2.1.1 实验材料第16-17页
        2.1.2 试验方法第17-21页
    2.2 结果与分析第21-24页
        2.2.1 GUS检测结果第21页
        2.2.2 DNA提取第21-22页
        2.2.3 多重PCR第22页
        2.2.4 转基因白桦F_1外源基因整合稳定性分析第22-23页
        2.2.5 bgt外源基因的表达第23-24页
    2.3 讨论第24-26页
        2.3.1 gus报告基因的优缺点第24-25页
        2.3.2 白桦总RNA和DNA的提取第25页
        2.3.3 杂交子代外源基因遗传稳定性第25-26页
        2.3.4 白桦的自交不亲和性第26页
    2.4 本章小结第26-27页
3 外源基因启动子区及编码区DNA甲基化分析第27-39页
    3.1 材料与方法第27-29页
        3.1.1 实验材料第27页
        3.1.2 试验方法第27-29页
    3.2 结果与分析第29-37页
        3.2.1 gus基因启动子区甲基化分析第29-33页
        3.2.2 bgt基因启动子区和编码区甲基化分析第33-37页
    3.3 讨论第37-38页
        3.3.1 亚硫酸盐测序的优缺点第37页
        3.3.2 白桦外源基因胞嘧啶甲基化模式与稳定性第37-38页
        3.3.3 启动子区与编码区甲基化与植物转基因沉默的关系第38页
    3.4 本章小结第38-39页
4 白桦BpCMT、BpMET、BpDRM基因的克隆及在亲子代中表达分析第39-58页
    4.1 材料与方法第39-43页
        4.1.1 实验材料第39页
        4.1.2 实验方法第39-43页
    4.2 结果与分析第43-55页
        4.2.1 白桦BpMET、BpCMT、BpDRM基因保守区的克隆第43-44页
        4.2.2 白桦BpMET基因全序列的获得第44-45页
        4.2.3 白桦BpMET基因cDNA全长的获得第45页
        4.2.4 白桦BpMET基因全序列分析第45-48页
        4.2.5 白桦BpCMT和BpDRM基因cDNA全长的获得第48页
        4.2.6 白桦BpCMT和BpDRM基因序列分析第48-53页
        4.2.7 甲基化相关基因BpCMT、BpMET和BpDRM在转基因白桦亲子代中的表达第53-55页
    4.3 讨论第55-56页
        4.3.1 CODEHOP设计简并引物第55页
        4.3.2 DNA甲基转移酶基因的分离第55-56页
        4.3.3 染色体步移与Sidefinding方法的比较第56页
    4.4 本章小结第56-58页
结论第58-60页
参考文献第60-65页
攻读学位期间发表的学术论文第65-66页
致谢第66-67页

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