摘要 | 第7-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
第一章 研究背景 | 第14-27页 |
1 肌肉的起源和分类 | 第14-18页 |
1.1 动物的肌肉发育 | 第14页 |
1.2 鱼类的肌肉发育 | 第14-17页 |
1.3 鱼类骨骼肌的分类 | 第17-18页 |
2 肌卫星细胞的起源、分布及调控 | 第18-20页 |
2.1 肌卫星细胞的起源 | 第18页 |
2.2 肌卫星细胞的分布 | 第18-19页 |
2.3 肌卫星细胞增殖和分化的调控 | 第19-20页 |
3 肌源性调节因子(MRFs)家族的研究进展 | 第20-24页 |
3.1 MRFs的结构 | 第20页 |
3.2 MRFs在肌肉发育中的功能 | 第20-22页 |
3.3 MRFs的表达模式 | 第22页 |
3.4 MRFs家族的进化研究 | 第22-24页 |
4 肌肉发育的调控 | 第24-25页 |
4.1 肌肉发育的正调控 | 第24页 |
4.2 肌肉发育的负调控 | 第24-25页 |
5 本研究的目的及意义 | 第25-27页 |
第二章 团头鲂肌纤维不同生长发育阶段变化规律的研究 | 第27-59页 |
1 前言 | 第27页 |
2 材料与方法 | 第27-35页 |
2.1 实验材料 | 第27页 |
2.2 主要药品及试剂 | 第27页 |
2.3 仪器设备 | 第27-28页 |
2.4 实验方法 | 第28-35页 |
3 结果与分析 | 第35-53页 |
3.1 团头鲂出膜后不同日龄红肌纤维的变化规律 | 第39-41页 |
3.2 团头鲂出膜后不同日龄白肌纤维的变化规律 | 第41-43页 |
3.3 团头鲂出膜后不同日龄肌纤维超微结构的变化规律 | 第43-46页 |
3.4 1-龄和2-龄团头鲂肌纤维及相关肌肉发育基因的变化规律 | 第46-53页 |
4 讨论 | 第53-59页 |
第三章 团头鲂肌源性调节因子MRFs的克隆及表达 | 第59-79页 |
1 前言 | 第59页 |
2 材料与方法 | 第59-64页 |
2.1 实验材料 | 第59页 |
2.2 主要药品及试剂 | 第59-60页 |
2.3 目的基因中间片段的获得 | 第60页 |
2.4 5/3'-RACE扩增 | 第60-63页 |
2.5 序列分析 | 第63-64页 |
3 结果与分析 | 第64-77页 |
3.1 团头鲂总RNA的提取 | 第64页 |
3.2 团头鲂MRFs基因家族序列的获得 | 第64-69页 |
3.3 氨基酸的序列和结构分析 | 第69-73页 |
3.4 目的基因在不同组织中的表达 | 第73页 |
3.5 目的基因在不同发育时期中的表达 | 第73-77页 |
4 讨论 | 第77-79页 |
第四章 团头鲂MRFs家族基因的进化分析 | 第79-91页 |
1 前言 | 第79页 |
2 材料与方法 | 第79-81页 |
2.1 序列检索和基因预测 | 第79-80页 |
2.2 聚类和进化分析 | 第80页 |
2.3 基因线性分析 | 第80页 |
2.4 MRFs结构域的进化分析 | 第80-81页 |
3 结果与分析 | 第81-87页 |
3.1 两侧对称动物MRFs同源序列的聚类分析 | 第81页 |
3.2 两侧对称动物MRFs同源序列的进化分析 | 第81-82页 |
3.3 有颚类脊椎动物MRFs家族基因的复制和缺失分析 | 第82-85页 |
3.4 串联复制形成鱼类两个MyoD复制基因 | 第85-86页 |
3.5 MRFs结构域的进化分析 | 第86-87页 |
4 讨论 | 第87-91页 |
第五章 不同因子对团头鲂肌肉发育调控的影响 | 第91-110页 |
1 前言 | 第91-92页 |
2 材料与方法 | 第92-96页 |
2.1 实验材料 | 第92页 |
2.2 主要药品和试剂 | 第92页 |
2.3 团头鲂pET28a-HSP70原核表达载体构建 | 第92-93页 |
2.4 目的蛋白的诱导表达及优化 | 第93-94页 |
2.5 重组蛋白的ATP酶活性检测 | 第94页 |
2.6 团头鲂HSP70蛋白腹腔注射 | 第94页 |
2.7 团头鲂LPS腹腔注射 | 第94页 |
2.8 肌肉相关基因表达分析 | 第94-95页 |
2.9 肌卫星细胞分布规律的分析 | 第95页 |
2.10 蛋白质的提取和Western blot | 第95-96页 |
3 结果与分析 | 第96-107页 |
3.1 团头鲂pET28a-HSP70原核表达载体构建 | 第96-97页 |
3.2 目的蛋白的诱导表达和纯化 | 第97-98页 |
3.3 HSP70重组蛋白的ATP酶活性检测 | 第98页 |
3.4 HSP70重组蛋白对团头鲂肌肉中相关基因和蛋白表达量的影响 | 第98-99页 |
3.5 HSP70重组蛋白对团头鲂肌卫星细胞分布规律及频率的影响 | 第99-103页 |
3.6 LPS对团头鲂红肌中相关基因表达量的影响 | 第103页 |
3.7 LPS对团头鲂白肌中相关基因表达量的影响 | 第103页 |
3.8 LPS对团头鲂肌卫星细胞分布规律及频率的影响 | 第103-107页 |
4 讨论 | 第107-110页 |
参考文献 | 第110-130页 |
补充数据 | 第130-134页 |
附录 | 第134-136页 |
致谢 | 第136页 |