| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-20页 |
| 1.1 芥子酸酯代谢途径 | 第12-15页 |
| 1.1.1 芥子酸代谢 | 第12-14页 |
| 1.1.2 芥子酸酯代谢途径中主要的催化酶 | 第14-15页 |
| 1.2 胆碱在种子萌发中的作用 | 第15页 |
| 1.3 UV-B与芥子酸代谢 | 第15-18页 |
| 1.4 立题依据 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-36页 |
| 2.1 实验仪器 | 第20-21页 |
| 2.2 实验材料 | 第21页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.2.2 质粒载体和菌株 | 第21页 |
| 2.3 实验试剂 | 第21页 |
| 2.4 常用的溶液及培养基的配制 | 第21-24页 |
| 2.4.1 常用溶液的配制 | 第21-22页 |
| 2.4.2 常用培养基的配制 | 第22-23页 |
| 2.4.3 抗生素溶液的配制 | 第23页 |
| 2.4.4 DAB染液配制 | 第23页 |
| 2.4.5 提取拟南芥种子中总RNA所用溶液 | 第23页 |
| 2.4.6 提取拟南芥种子内源ABA-GE所需的溶液 | 第23-24页 |
| 2.4.7 UGT84A2体外糖基化反应所需溶液 | 第24页 |
| 2.5 实验所用的引物 | 第24-25页 |
| 2.5.1 构建载体所用的引物 | 第24页 |
| 2.5.2 qRT-PCR鉴定基因表达所用引物 | 第24-25页 |
| 2.6 实验方法 | 第25-36页 |
| 2.6.1 拟南芥的种植方法 | 第25页 |
| 2.6.2 拟南芥种子预处理 | 第25页 |
| 2.6.3 拟南芥种子总RNA提取 | 第25-26页 |
| 2.6.4 反转录PCR制备拟南芥cDNA | 第26-27页 |
| 2.6.5 目的基因的PCR扩增 | 第27页 |
| 2.6.6 拟南芥DNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.6.7 琼脂糖凝胶电泳 | 第28页 |
| 2.6.8 目的基因的纯化 | 第28页 |
| 2.6.9 双酶切和酶切产物的连接 | 第28-29页 |
| 2.6.10 大肠杆菌感受态的制备 | 第29页 |
| 2.6.11 大肠杆菌的转化 | 第29页 |
| 2.6.12 质粒DNA的提取 | 第29-30页 |
| 2.6.13 重组质粒的鉴定 | 第30页 |
| 2.6.14 实时定量PCR | 第30-31页 |
| 2.6.15 种子中ABA-GE的提取 | 第31页 |
| 2.6.16 DAB染色 | 第31页 |
| 2.6.17 蛋白的诱导 | 第31-32页 |
| 2.6.18 带GST或His标签的蛋白质的纯化 | 第32-33页 |
| 2.6.19 蛋白的浓缩 | 第33页 |
| 2.6.20 Western blot | 第33-34页 |
| 2.6.21 蛋白SDS-PAGE电泳 | 第34页 |
| 2.6.22 考马斯亮蓝R250染色 | 第34页 |
| 2.6.23 高效液相色谱仪操作流程 | 第34-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-50页 |
| 3.1 芥子酸对种子萌发的影响 | 第36-45页 |
| 3.1.1 低浓度芥子酸促进种子萌发 | 第36-37页 |
| 3.1.2 芥子酸影响ABA合成和反应相关基因的表达 | 第37-38页 |
| 3.1.3 芥子酸促进ABA糖基化为ABA-GE | 第38-41页 |
| 3.1.4 芥子酸葡萄糖转移酶特异性的催化芥子酸葡萄糖的形成 | 第41-43页 |
| 3.1.5 芥子酸对ABA糖基化基因表达的影响 | 第43-45页 |
| 3.2 芥子酸酯苹果酸可能参与了UV-B诱导的气孔运动 | 第45-50页 |
| 3.2.1 UV-B对WT气孔开度的影响 | 第45-46页 |
| 3.2.2 芥子酰苹果酸对UV-B诱导气孔关闭的影响 | 第46页 |
| 3.2.3 紫外胁迫下芥子酰苹果酸代谢对苹果酸相对含量的影响 | 第46-47页 |
| 3.2.4 芥子酰苹果酸突变体影响了UV-B诱导的H_2O_2产生 | 第47-50页 |
| 4 讨论 | 第50-54页 |
| 4.1 种子萌发过程中芥子酸酯可能影响了ABA代谢的平衡 | 第50-51页 |
| 4.2 芥子酰苹果酸可能是影响UV-B诱导气孔关闭的主要原因 | 第51-54页 |
| 5 结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及申请专利 | 第60-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
