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柽柳ThTIP基因抗逆功能研究及上游调控因子的鉴定

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 绪论第10-17页
    1.1 引言第10页
    1.2 水通道蛋白在植物抗逆胁迫中的研究进展第10-11页
    1.3 启动子在植物中的研究第11-15页
        1.3.1 启动子结构特点及分类第12页
        1.3.2 启动子的研究方法第12-15页
    1.4 研究技术路线第15-16页
    1.5 本研究的目的与意义第16-17页
2 ThTIP的抗逆功能研究第17-48页
    2.1 实验材料第17-18页
        2.1.1 植物材料及生长条件第17页
        2.1.2 供试菌种与供试载体第17页
        2.1.3 主要试剂第17页
        2.1.4 主要培养基及溶液配制第17-18页
    2.2 实验方法第18-33页
        2.2.1 柽柳RNA的提取以及cDNA的合成第18-19页
        2.2.2 ThTIP基因序列的引物设计及其生物信息学分析第19-20页
        2.2.3 植物过表达载体pROKⅡ-ThTIP以及抑制表达载体pFGC5941-ThTIP的构建第20-28页
        2.2.4 转基因拟南芥的抗逆功能研究第28-29页
        2.2.5 瞬时转化柽柳的抗逆功能研究第29-33页
    2.3 结果与分析第33-47页
        2.3.1 ThTIP全长基因的克隆及分析第33-38页
        2.3.2 转基因拟南芥的抗逆功能研究结果第38-40页
        2.3.3 瞬时侵染刚毛柽柳的抗逆功能研究结果第40-47页
    2.4 本章小结第47-48页
3 ThTIP基因启动子表达活性研究第48-64页
    3.1 实验材料第48-49页
        3.1.1 植物材料及生长条件第48页
        3.1.2 供试菌种与供试载体第48页
        3.1.3 主要试剂第48页
        3.1.4 主要培养基及溶液配制第48-49页
    3.2 实验方法第49-57页
        3.2.1 ThTIP基因启动子片段植物表达载体构建第49-52页
        3.2.2 ThTIP基因启动子表达载体的活性检测第52-57页
    3.3 结果与分析第57-62页
        3.3.1 ThTIP基因启动子片段植物表达载体构建第57-58页
        3.3.2 ThTIP基因启动子表达载体的活性检测第58-62页
    3.4 本章小结第62-64页
4 ABRE元件与上游调控转录因子ABF家族互作研究第64-82页
    4.1 实验材料第64-66页
        4.1.1 植物材料及生长条件第64页
        4.1.2 菌种与载体第64页
        4.1.3 主要试剂第64页
        4.1.4 主要培养基及溶液配制第64-66页
    4.2 实验方法第66-75页
        4.2.1 ABF蛋白家族基因全长基因的克隆及pMD18-T-ThABFs的构建第66-67页
        4.2.2 效应载体pGADT7-Rec2-ThABFs载体的构建第67-69页
        4.2.3 报告载体pHIS2-ABRE的构建第69-70页
        4.2.4 pGADT7-Rec2-ThABFs与pHIS2-ABRE的酵母单杂交第70-71页
        4.2.5 ThABF1,2,7,8 与顺式作用元件ABRE的互作验证第71-75页
    4.3 结果与分析第75-81页
        4.3.1 pMD18-T-ThABFs载体构建第75-76页
        4.3.2 pGADT7-Rec2-ThABFs载体的构建第76-77页
        4.3.3 报告载体pHIS2-ABRE的构建第77页
        4.3.4 pGADT7-Rec2-ThABFs与pHIS2-ABRE的酵母单杂交第77-78页
        4.3.5 ThABF1,2,7,8 与顺式作用元件ABRE的互作验证第78-81页
    4.4 本章小结第81-82页
讨论第82-84页
结论第84-85页
参考文献第85-90页
附录第90-92页
攻读学位期间发表的学术论文第92-93页
致谢第93-94页

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