摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 绪论 | 第10-17页 |
1.1 引言 | 第10页 |
1.2 水通道蛋白在植物抗逆胁迫中的研究进展 | 第10-11页 |
1.3 启动子在植物中的研究 | 第11-15页 |
1.3.1 启动子结构特点及分类 | 第12页 |
1.3.2 启动子的研究方法 | 第12-15页 |
1.4 研究技术路线 | 第15-16页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第16-17页 |
2 ThTIP的抗逆功能研究 | 第17-48页 |
2.1 实验材料 | 第17-18页 |
2.1.1 植物材料及生长条件 | 第17页 |
2.1.2 供试菌种与供试载体 | 第17页 |
2.1.3 主要试剂 | 第17页 |
2.1.4 主要培养基及溶液配制 | 第17-18页 |
2.2 实验方法 | 第18-33页 |
2.2.1 柽柳RNA的提取以及cDNA的合成 | 第18-19页 |
2.2.2 ThTIP基因序列的引物设计及其生物信息学分析 | 第19-20页 |
2.2.3 植物过表达载体pROKⅡ-ThTIP以及抑制表达载体pFGC5941-ThTIP的构建 | 第20-28页 |
2.2.4 转基因拟南芥的抗逆功能研究 | 第28-29页 |
2.2.5 瞬时转化柽柳的抗逆功能研究 | 第29-33页 |
2.3 结果与分析 | 第33-47页 |
2.3.1 ThTIP全长基因的克隆及分析 | 第33-38页 |
2.3.2 转基因拟南芥的抗逆功能研究结果 | 第38-40页 |
2.3.3 瞬时侵染刚毛柽柳的抗逆功能研究结果 | 第40-47页 |
2.4 本章小结 | 第47-48页 |
3 ThTIP基因启动子表达活性研究 | 第48-64页 |
3.1 实验材料 | 第48-49页 |
3.1.1 植物材料及生长条件 | 第48页 |
3.1.2 供试菌种与供试载体 | 第48页 |
3.1.3 主要试剂 | 第48页 |
3.1.4 主要培养基及溶液配制 | 第48-49页 |
3.2 实验方法 | 第49-57页 |
3.2.1 ThTIP基因启动子片段植物表达载体构建 | 第49-52页 |
3.2.2 ThTIP基因启动子表达载体的活性检测 | 第52-57页 |
3.3 结果与分析 | 第57-62页 |
3.3.1 ThTIP基因启动子片段植物表达载体构建 | 第57-58页 |
3.3.2 ThTIP基因启动子表达载体的活性检测 | 第58-62页 |
3.4 本章小结 | 第62-64页 |
4 ABRE元件与上游调控转录因子ABF家族互作研究 | 第64-82页 |
4.1 实验材料 | 第64-66页 |
4.1.1 植物材料及生长条件 | 第64页 |
4.1.2 菌种与载体 | 第64页 |
4.1.3 主要试剂 | 第64页 |
4.1.4 主要培养基及溶液配制 | 第64-66页 |
4.2 实验方法 | 第66-75页 |
4.2.1 ABF蛋白家族基因全长基因的克隆及pMD18-T-ThABFs的构建 | 第66-67页 |
4.2.2 效应载体pGADT7-Rec2-ThABFs载体的构建 | 第67-69页 |
4.2.3 报告载体pHIS2-ABRE的构建 | 第69-70页 |
4.2.4 pGADT7-Rec2-ThABFs与pHIS2-ABRE的酵母单杂交 | 第70-71页 |
4.2.5 ThABF1,2,7,8 与顺式作用元件ABRE的互作验证 | 第71-75页 |
4.3 结果与分析 | 第75-81页 |
4.3.1 pMD18-T-ThABFs载体构建 | 第75-76页 |
4.3.2 pGADT7-Rec2-ThABFs载体的构建 | 第76-77页 |
4.3.3 报告载体pHIS2-ABRE的构建 | 第77页 |
4.3.4 pGADT7-Rec2-ThABFs与pHIS2-ABRE的酵母单杂交 | 第77-78页 |
4.3.5 ThABF1,2,7,8 与顺式作用元件ABRE的互作验证 | 第78-81页 |
4.4 本章小结 | 第81-82页 |
讨论 | 第82-84页 |
结论 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-90页 |
附录 | 第90-92页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第92-93页 |
致谢 | 第93-94页 |