| 第一章 文献综述：转基因动物研究进展 | 第10-27页 |
| 1 概述 | 第10页 |
| 2 制作转基因动物的基本原理、技术路线 | 第10-17页 |
| 2．1 目的基因的构建 | 第11-13页 |
| 2．1．1 目的基因的选择 | 第11页 |
| 2．1．2 目的基因调控元件的设计 | 第11-13页 |
| 2．2 染色体基因定位整合设计 | 第13-14页 |
| 2．3 基因导入技术 | 第14-17页 |
| 2．3．1 显微注射法 | 第14页 |
| 2．3．2 逆转录病毒转染法 | 第14-15页 |
| 2．3．3 胚胎干细胞介导法 | 第15-16页 |
| 2．3．4 精子载体法 | 第16页 |
| 2．3．5 电转移法 | 第16页 |
| 2．3．6 染色体片段显微注射法 | 第16-17页 |
| 2．3．7 微弹轰入法 | 第17页 |
| 2．3．8 其它方法 | 第17页 |
| 3 转基因整合表达及其影响因素 | 第17-20页 |
| 3．1 转基因的整合与表达 | 第17-18页 |
| 3．2 转基因整合表达的影响因素 | 第18-20页 |
| 3．2．1 基因构件 | 第19页 |
| 3．2．2 调控序列 | 第19页 |
| 3．2．3 共注射与同源重组 | 第19-20页 |
| 3．2．4 转基因拷贝数及载体序列 | 第20页 |
| 4 转基因动物的应用及存在问题 | 第20-25页 |
| 4．1 转基因动物的应用 | 第20-24页 |
| 4．1．1 转基因动物研究基因的表达调控 | 第20-21页 |
| 4．1．2 家畜生产性能的改良及抗病育种 | 第21页 |
| 4．1．3 医用动物模型 | 第21-22页 |
| 4．1．4 动物生物反应器 | 第22-23页 |
| 4．1．5 应用于器官移植 | 第23-24页 |
| 4．2 转基因动物存在问题 | 第24-25页 |
| 5 关于人血清白蛋白 | 第25-26页 |
| 6 结语 | 第26-27页 |
| 第二章 试验研究 | 第27-50页 |
| 前言 | 第27页 |
| 1 材料与方法 | 第27-37页 |
| 1．1 材料 | 第27-28页 |
| 1．1．1 实验动物 | 第27页 |
| 1．1．2 主要试剂盒 | 第27-28页 |
| 1．1．3 工具酶 | 第28页 |
| 1．1．4 分子克隆用的菌种及质粒载体 | 第28页 |
| 1．1．5 试剂 | 第28页 |
| 1．1．6 PCR引物合成 | 第28页 |
| 1．1．7 主要仪器设备 | 第28页 |
| 1．2 主要试剂和溶液的配制 | 第28-30页 |
| 1．2．1 培养基的配制 | 第28-29页 |
| 1．2．2 主要试剂及缓冲液的配制 | 第29-30页 |
| 1．3 实验方法 | 第30-37页 |
| 1．3．1 DNA的提取 | 第30-31页 |
| 1．3．2 DNA浓度及纯度的测定 | 第31页 |
| 1．3．3 琼脂糖电泳 | 第31-32页 |
| 1．3．4 DNA酶切反应 | 第32页 |
| 1．3．5 琼脂糖凝胶中DNA片段的回收 | 第32页 |
| 1．3．6 DNA探针的制备 | 第32-33页 |
| 1．3．6．1 PCR过程 | 第32-33页 |
| 1．3．6．2 扩增产物的回收与克隆 | 第33页 |
| 1．3．7 感受态细菌的制备与转化 | 第33-34页 |
| 1．3．8 DNA探针标记 | 第34页 |
| 1．3．9 人基因组文库滴度的测定 | 第34-35页 |
| 1．3．10 基因组文库的筛选 | 第35-36页 |
| 1．3．11 转基因小鼠的制作方法 | 第36页 |
| 1．3．12 转基因小鼠的整合检测 | 第36-37页 |
| 1．3．12．1 PCR法 | 第36-37页 |
| 1．3．12．2 Southern印迹杂交法 | 第37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-45页 |
| 2．1 DNA探针的制备 | 第37-38页 |
| 2．1．1 PCR扩增 | 第37-38页 |
| 2．1．2 PCR产物的克隆 | 第38页 |
| 2．2 人基因组文库的筛选 | 第38-40页 |
| 2．3 转基因小鼠的制备 | 第40页 |
| 2．4 转基因小鼠的整合检测 | 第40-45页 |
| 2．4．1 PCR引物设计与扩增检测结果 | 第40-42页 |
| 2．4．2 Southern blotting检测 | 第42-45页 |
| 3 讨论 | 第45-49页 |
| 3．1 关于PCR技术 | 第45页 |
| 3．2 PCR反应的特异性、效率和忠实性 | 第45-47页 |
| 3．2．1 引物设计 | 第45页 |
| 3．2．2 模板 | 第45-46页 |
| 3．2．3 反应混合物 | 第46页 |
| 3．2．4 TaqDNA聚合酶 | 第46页 |
| 3．2．5 PCR循环 | 第46-47页 |
| 3．3 关于PCR产物的克隆策略 | 第47页 |
| 3．4 关于基因文库的筛选 | 第47-48页 |
| 3．5 转基因小鼠的建立和共注射 | 第48-49页 |
| 4 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |