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抗金轮霉素D的秀丽隐杆线虫突变基因的定位

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 综述第10-19页
    1. 金轮霉素Aurovertins化合物第11-13页
        1.1 金轮霉素化合物的理化性质第11页
        1.2 金轮霉素类化合物的发现与应用第11-12页
        1.3 金轮霉素化合物的毒性第12-13页
    2. 秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)第13-14页
    3. 单核苷酸多态性法定位突变基因第14-18页
        3.1 诱变方法第14-16页
        3.2 单核苷酸多态性法定位基因第16-17页
        3.3 全基因组重测序第17页
        3.4 线虫回复突变第17-18页
    4. 本研究的目的和意义第18-19页
第二章 RNA干扰法测试金轮霉素对秀丽隐杆线虫的ATP合成酶的作用第19-26页
    一 实验材料与方法第19-23页
        1. 实验材料第19-20页
        2. 实验方法第20-23页
            2.1 化合物金轮霉素D活性测试第20-21页
            2.2 线虫的培养第21页
            2.3 线虫的同步化第21-22页
            2.4 线虫的冻存与解冻第22页
            2.5 线虫RNA干扰第22-23页
    二 实验结果与分析第23-25页
        1. 金轮霉素D对线虫毒性实验第23-24页
        2. 线虫ATP合成酶基因的RNA干扰结果第24-25页
    三 讨论第25页
    四 小结第25-26页
第三章 突变线虫抗性基因的显隐性及单基因筛选第26-31页
    一 实验材料与方法第26-28页
        1. 实验材料第26页
        2. 实验方法第26-28页
    二 实验结果与分析第28-29页
        1. 抗性基因的显隐性筛选第28页
        2. 抗性基因的单基因筛选第28-29页
    三 讨论第29页
    四 小结第29-31页
第四章 应用突变线虫MT464与MT465对抗性基因的染色体定位研究第31-35页
    一 实验材料与方法第31-33页
        1. 实验材料第31-32页
        2. 实验方法第32-33页
    二 实验结果与分析第33-34页
    三 讨论第34页
    四 小结第34-35页
第五章 利用单核昔酸多态性方法定位突变线虫的抗性基因第35-69页
    一 实验材料与方法第35-50页
        1. 实验材料第35-36页
        2. 实验方法第36-50页
            2.1 筛选重组子第36页
            2.2 用单核苷酸多态性方法定位基因第36-41页
            2.3 抗性突变线虫全基因组重测序第41-45页
            2.4 In-fusion方法构建表达载体第45-48页
            2.5 线虫显微注射表达载体第48-49页
            2.6 图像采集和表型统计第49页
            2.7 prmt-5突变体线虫的抗性实验第49-50页
    二 实验结果与分析第50-65页
        1. 突变体线虫与CB4856杂交筛选到纯合的F2代重组子第50页
        2. 染色体定位第50-51页
        3. 染色体内精确定位第51-52页
        4. 抗性突变线虫全基因组重测序结果分析及验证第52-54页
        5. 野生型线虫N2与抗性线虫的atp-2基因表达载体构建第54-57页
        6. 抗性突变线虫拯救实验第57-60页
        7. prmt-5突变线虫第60-65页
    三 讨论第65-67页
    四 小结第67-69页
第六章 厚垣孢普克尼亚菌表达谱信息采集样品准备第69-77页
    一 实验材料与方法第69-71页
        1. 实验材料第69-70页
        2. 实验方法第70-71页
            2.1 选择合适的培养基发酵厚垣孢普克尼亚菌YMF1.00613第70-71页
            2.2 表达谱样品准备(菌丝体的收集)第71页
    二 实验结果与分析第71-75页
        1. TLC检测厚垣孢普克尼亚菌发酵液中的金轮霉素D第71-73页
        2. HPLC检测厚垣孢普克尼亚菌发酵液中金轮霉素D的含量第73-74页
        3. 表达谱样品准备第74-75页
    三 讨论第75-76页
    四 小结第76-77页
第七章 厚垣孢普克尼亚菌发酵液对植物病原真菌的毒性研究第77-81页
    一 实验材料与方法第77-78页
        1. 实验材料第77-78页
        2. 实验方法第78页
            2.1 菌株活化及发酵第78页
            2.2 厚垣孢普克尼亚菌发酵液的处理第78页
            2.3 厚垣孢普克尼亚菌发酵液对植物病原真菌生长的影响第78页
    二 实验结果与分析第78-80页
        1. 厚垣孢普克尼亚菌BEP发酵液对植物病原真菌菌丝生长的影响第78-80页
    三 讨论第80页
    四 小结第80-81页
参考文献第81-85页
致谢第85-86页

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