摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 综述 | 第10-19页 |
1. 金轮霉素Aurovertins化合物 | 第11-13页 |
1.1 金轮霉素化合物的理化性质 | 第11页 |
1.2 金轮霉素类化合物的发现与应用 | 第11-12页 |
1.3 金轮霉素化合物的毒性 | 第12-13页 |
2. 秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans) | 第13-14页 |
3. 单核苷酸多态性法定位突变基因 | 第14-18页 |
3.1 诱变方法 | 第14-16页 |
3.2 单核苷酸多态性法定位基因 | 第16-17页 |
3.3 全基因组重测序 | 第17页 |
3.4 线虫回复突变 | 第17-18页 |
4. 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
第二章 RNA干扰法测试金轮霉素对秀丽隐杆线虫的ATP合成酶的作用 | 第19-26页 |
一 实验材料与方法 | 第19-23页 |
1. 实验材料 | 第19-20页 |
2. 实验方法 | 第20-23页 |
2.1 化合物金轮霉素D活性测试 | 第20-21页 |
2.2 线虫的培养 | 第21页 |
2.3 线虫的同步化 | 第21-22页 |
2.4 线虫的冻存与解冻 | 第22页 |
2.5 线虫RNA干扰 | 第22-23页 |
二 实验结果与分析 | 第23-25页 |
1. 金轮霉素D对线虫毒性实验 | 第23-24页 |
2. 线虫ATP合成酶基因的RNA干扰结果 | 第24-25页 |
三 讨论 | 第25页 |
四 小结 | 第25-26页 |
第三章 突变线虫抗性基因的显隐性及单基因筛选 | 第26-31页 |
一 实验材料与方法 | 第26-28页 |
1. 实验材料 | 第26页 |
2. 实验方法 | 第26-28页 |
二 实验结果与分析 | 第28-29页 |
1. 抗性基因的显隐性筛选 | 第28页 |
2. 抗性基因的单基因筛选 | 第28-29页 |
三 讨论 | 第29页 |
四 小结 | 第29-31页 |
第四章 应用突变线虫MT464与MT465对抗性基因的染色体定位研究 | 第31-35页 |
一 实验材料与方法 | 第31-33页 |
1. 实验材料 | 第31-32页 |
2. 实验方法 | 第32-33页 |
二 实验结果与分析 | 第33-34页 |
三 讨论 | 第34页 |
四 小结 | 第34-35页 |
第五章 利用单核昔酸多态性方法定位突变线虫的抗性基因 | 第35-69页 |
一 实验材料与方法 | 第35-50页 |
1. 实验材料 | 第35-36页 |
2. 实验方法 | 第36-50页 |
2.1 筛选重组子 | 第36页 |
2.2 用单核苷酸多态性方法定位基因 | 第36-41页 |
2.3 抗性突变线虫全基因组重测序 | 第41-45页 |
2.4 In-fusion方法构建表达载体 | 第45-48页 |
2.5 线虫显微注射表达载体 | 第48-49页 |
2.6 图像采集和表型统计 | 第49页 |
2.7 prmt-5突变体线虫的抗性实验 | 第49-50页 |
二 实验结果与分析 | 第50-65页 |
1. 突变体线虫与CB4856杂交筛选到纯合的F2代重组子 | 第50页 |
2. 染色体定位 | 第50-51页 |
3. 染色体内精确定位 | 第51-52页 |
4. 抗性突变线虫全基因组重测序结果分析及验证 | 第52-54页 |
5. 野生型线虫N2与抗性线虫的atp-2基因表达载体构建 | 第54-57页 |
6. 抗性突变线虫拯救实验 | 第57-60页 |
7. prmt-5突变线虫 | 第60-65页 |
三 讨论 | 第65-67页 |
四 小结 | 第67-69页 |
第六章 厚垣孢普克尼亚菌表达谱信息采集样品准备 | 第69-77页 |
一 实验材料与方法 | 第69-71页 |
1. 实验材料 | 第69-70页 |
2. 实验方法 | 第70-71页 |
2.1 选择合适的培养基发酵厚垣孢普克尼亚菌YMF1.00613 | 第70-71页 |
2.2 表达谱样品准备(菌丝体的收集) | 第71页 |
二 实验结果与分析 | 第71-75页 |
1. TLC检测厚垣孢普克尼亚菌发酵液中的金轮霉素D | 第71-73页 |
2. HPLC检测厚垣孢普克尼亚菌发酵液中金轮霉素D的含量 | 第73-74页 |
3. 表达谱样品准备 | 第74-75页 |
三 讨论 | 第75-76页 |
四 小结 | 第76-77页 |
第七章 厚垣孢普克尼亚菌发酵液对植物病原真菌的毒性研究 | 第77-81页 |
一 实验材料与方法 | 第77-78页 |
1. 实验材料 | 第77-78页 |
2. 实验方法 | 第78页 |
2.1 菌株活化及发酵 | 第78页 |
2.2 厚垣孢普克尼亚菌发酵液的处理 | 第78页 |
2.3 厚垣孢普克尼亚菌发酵液对植物病原真菌生长的影响 | 第78页 |
二 实验结果与分析 | 第78-80页 |
1. 厚垣孢普克尼亚菌BEP发酵液对植物病原真菌菌丝生长的影响 | 第78-80页 |
三 讨论 | 第80页 |
四 小结 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-85页 |
致谢 | 第85-86页 |