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DNA双链断裂末端的Ku70/80结合对同源重组修复通路的影响

致谢第1-8页
中文摘要第8-11页
Abstract第11-14页
缩略词第14-17页
目次第17-19页
1. 引言第19-24页
2. 材料和方法第24-55页
     ·质粒第24页
     ·细胞培养及转染第24-25页
     ·质粒电穿孔转染和化学转染方法第25-27页
     ·质粒扩增、抽提、纯化及酶切第27-30页
     ·基因组DNA提取及目的片段PCR扩增第30-33页
     ·活细胞成像及激光微辐射第33-37页
     ·ssDNA,RPA以及Rad51的荧光免疫染色测定第37-42页
     ·Xrs5细胞中HR实验报告基因稳定转染细胞株的建立及HR实验第42-44页
     ·全细胞蛋白提取和Western免疫印迹法第44-50页
     ·DNA寡核苷酸底物制备和3’末端的放射性标记第50-51页
     ·人类Ku70/80蛋白和Mt-Ku蛋白的纯化第51-52页
     ·DNA末端剪切实验第52-53页
     ·IR敏感性试验第53-54页
     ·抑制剂浓度及处理时间第54-55页
3. 结果与讨论第55-98页
     ·人类的Ku80和Mt-Ku在S期和非S期都聚集到损伤位点第55-67页
     ·DNA末端阻滞削弱了末端剪切和HR相关蛋白在DSB末端的聚集第67-77页
     ·HR介导的DNA修复必需末端剪切因子可结合的DSB末端第77-84页
     ·Ku在DSB末端的解聚与DNA-PKcs介导的Ku的磷酸化相关第84-98页
4. 结论第98-100页
参考文献第100-105页
综述第105-151页
 参考文献第132-151页
作者简历第151页

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