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我国梨黑斑病病原菌种类及一种dsRNA病毒的鉴定

摘要第7-8页
Abstract第8-9页
缩略词表第10-11页
第一章 文献综述第11-20页
    1.1 链格孢真菌的经济重要性及其分类研究进展第11-13页
        1.1.1 链格孢的经济重要性第11页
        1.1.2 链格孢真菌的分类研究第11-13页
            1.1.2.1 形态学分类研究第11-12页
            1.1.2.2 分子鉴定分类的研究第12-13页
    1.2 梨黑斑病的发生与病原鉴定第13-14页
        1.2.1 发生与危害第13-14页
        1.2.2 梨黑斑病病原鉴定第14页
    1.3 真菌病毒的分类与研究进展第14-18页
        1.3.1 分类第14-17页
        1.3.2 病毒对真菌的影响第17页
        1.3.3 真菌病毒的传播第17-18页
        1.3.4 侵染链格孢属的真菌病毒的研究第18页
    1.4 本研究的目的与意义第18-20页
第二章 梨黑斑病病原菌的分离与鉴定第20-38页
    2.1 实验材料第20页
    2.2 实验方法第20-23页
        2.2.1 样品的采集与病原菌的分离第20-21页
        2.2.2 形态学观察第21页
        2.2.3 分子鉴定第21-23页
            2.2.3.1 病原菌基因组DNA提取第21-22页
            2.2.3.2 PCR序列的扩增及产物纯化第22-23页
            2.2.3.3 PCR扩增序列的系统进化分析第23页
        2.2.4 病原菌致病性测定第23页
            2.2.4.1 病原菌离体叶片刺伤接种第23页
            2.2.4.2 病原菌活体叶片接种第23页
        2.2.5 数据处理第23页
    2.3 结果与分析第23-36页
        2.3.1 田间症状的观察第23-24页
        2.3.2 病原菌分离纯化及其形态学观察结果第24-28页
        2.3.3 分子鉴定结果第28-34页
        2.3.4 病原菌的致病力分析第34-36页
    2.4 讨论第36-38页
第三章 SCFS-3 菌株的弱毒特性与携带dsRNA关系第38-48页
    3.1 实验材料第38页
    3.2 试验方法第38-41页
        3.2.1 生物学特性观察第38页
        3.2.2 垂直传毒第38-40页
        3.2.3 水平传毒第40页
        3.2.4 数据分析第40-41页
    3.3 结果与分析第41-46页
        3.3.1 链格孢属菌株SCFS-3 生物学观察结果第41-43页
        3.3.2 垂直传毒的实验结果第43-45页
        3.3.3 水平传毒的实验结果第45-46页
    3.4 讨论第46-48页
第四章 dsRNA病毒序列扩增及分析第48-72页
    4.1 实验材料第48-50页
        4.1.1 实验所用菌株第48页
        4.1.2 培养基第48页
        4.1.3 载体及引物第48-50页
        4.1.4 本章节用到的仪器设备第50页
    4.2 实验方法第50-57页
        4.2.1 dsRNA全长的克隆第50-54页
            4.2.1.1 dsRNA样品的提取及处理第50-51页
            4.2.1.2 dsRNA样品的cDNA克隆第51页
            4.2.1.3 RNA降解及cDNA的复性第51页
            4.2.1.4 cDNA补平反应第51页
            4.2.1.5 PCR扩增第51页
            4.2.1.6 目标片段回收纯化以及载体连接第51-52页
            4.2.1.7 dsRNA末端序列克隆第52-54页
        4.2.2 病毒粒子的观察第54-55页
        4.2.3 病毒粒体的结构蛋白的检测第55-56页
            4.2.3.1 SDS-PAGE凝胶的制备第55-56页
            4.2.3.2 病毒粒体的结构蛋白SDS-PAGE电泳、染色及观察第56页
        4.2.4 dsRNA序列拼接及分析所用软件第56-57页
    4.3 结果与分析第57-70页
        4.3.1 DsRNA病毒cDNA序列扩增结果第57-65页
        4.3.2 病毒ABRV1粒体观察结果第65-66页
        4.3.3 病毒粒体的结构蛋白的检测结果第66-70页
    4.4 讨论第70-72页
第五章 全文结论与展望第72-73页
参考文献第73-79页
附录A 常用试剂配方第79-80页
附录B 常用培养基的配方第80-81页
附表C 本研究300个样品原始编号、采集地点及分离品种第81-91页
附录D 硕士期间发表论文第91-92页
致谢第92页

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