摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-20页 |
1.1 链格孢真菌的经济重要性及其分类研究进展 | 第11-13页 |
1.1.1 链格孢的经济重要性 | 第11页 |
1.1.2 链格孢真菌的分类研究 | 第11-13页 |
1.1.2.1 形态学分类研究 | 第11-12页 |
1.1.2.2 分子鉴定分类的研究 | 第12-13页 |
1.2 梨黑斑病的发生与病原鉴定 | 第13-14页 |
1.2.1 发生与危害 | 第13-14页 |
1.2.2 梨黑斑病病原鉴定 | 第14页 |
1.3 真菌病毒的分类与研究进展 | 第14-18页 |
1.3.1 分类 | 第14-17页 |
1.3.2 病毒对真菌的影响 | 第17页 |
1.3.3 真菌病毒的传播 | 第17-18页 |
1.3.4 侵染链格孢属的真菌病毒的研究 | 第18页 |
1.4 本研究的目的与意义 | 第18-20页 |
第二章 梨黑斑病病原菌的分离与鉴定 | 第20-38页 |
2.1 实验材料 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-23页 |
2.2.1 样品的采集与病原菌的分离 | 第20-21页 |
2.2.2 形态学观察 | 第21页 |
2.2.3 分子鉴定 | 第21-23页 |
2.2.3.1 病原菌基因组DNA提取 | 第21-22页 |
2.2.3.2 PCR序列的扩增及产物纯化 | 第22-23页 |
2.2.3.3 PCR扩增序列的系统进化分析 | 第23页 |
2.2.4 病原菌致病性测定 | 第23页 |
2.2.4.1 病原菌离体叶片刺伤接种 | 第23页 |
2.2.4.2 病原菌活体叶片接种 | 第23页 |
2.2.5 数据处理 | 第23页 |
2.3 结果与分析 | 第23-36页 |
2.3.1 田间症状的观察 | 第23-24页 |
2.3.2 病原菌分离纯化及其形态学观察结果 | 第24-28页 |
2.3.3 分子鉴定结果 | 第28-34页 |
2.3.4 病原菌的致病力分析 | 第34-36页 |
2.4 讨论 | 第36-38页 |
第三章 SCFS-3 菌株的弱毒特性与携带dsRNA关系 | 第38-48页 |
3.1 实验材料 | 第38页 |
3.2 试验方法 | 第38-41页 |
3.2.1 生物学特性观察 | 第38页 |
3.2.2 垂直传毒 | 第38-40页 |
3.2.3 水平传毒 | 第40页 |
3.2.4 数据分析 | 第40-41页 |
3.3 结果与分析 | 第41-46页 |
3.3.1 链格孢属菌株SCFS-3 生物学观察结果 | 第41-43页 |
3.3.2 垂直传毒的实验结果 | 第43-45页 |
3.3.3 水平传毒的实验结果 | 第45-46页 |
3.4 讨论 | 第46-48页 |
第四章 dsRNA病毒序列扩增及分析 | 第48-72页 |
4.1 实验材料 | 第48-50页 |
4.1.1 实验所用菌株 | 第48页 |
4.1.2 培养基 | 第48页 |
4.1.3 载体及引物 | 第48-50页 |
4.1.4 本章节用到的仪器设备 | 第50页 |
4.2 实验方法 | 第50-57页 |
4.2.1 dsRNA全长的克隆 | 第50-54页 |
4.2.1.1 dsRNA样品的提取及处理 | 第50-51页 |
4.2.1.2 dsRNA样品的cDNA克隆 | 第51页 |
4.2.1.3 RNA降解及cDNA的复性 | 第51页 |
4.2.1.4 cDNA补平反应 | 第51页 |
4.2.1.5 PCR扩增 | 第51页 |
4.2.1.6 目标片段回收纯化以及载体连接 | 第51-52页 |
4.2.1.7 dsRNA末端序列克隆 | 第52-54页 |
4.2.2 病毒粒子的观察 | 第54-55页 |
4.2.3 病毒粒体的结构蛋白的检测 | 第55-56页 |
4.2.3.1 SDS-PAGE凝胶的制备 | 第55-56页 |
4.2.3.2 病毒粒体的结构蛋白SDS-PAGE电泳、染色及观察 | 第56页 |
4.2.4 dsRNA序列拼接及分析所用软件 | 第56-57页 |
4.3 结果与分析 | 第57-70页 |
4.3.1 DsRNA病毒cDNA序列扩增结果 | 第57-65页 |
4.3.2 病毒ABRV1粒体观察结果 | 第65-66页 |
4.3.3 病毒粒体的结构蛋白的检测结果 | 第66-70页 |
4.4 讨论 | 第70-72页 |
第五章 全文结论与展望 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-79页 |
附录A 常用试剂配方 | 第79-80页 |
附录B 常用培养基的配方 | 第80-81页 |
附表C 本研究300个样品原始编号、采集地点及分离品种 | 第81-91页 |
附录D 硕士期间发表论文 | 第91-92页 |
致谢 | 第92页 |