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日本囊对虾性腺差异的蛋白质组学及其差异表达基因Cathepsin B的分析

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第1章 引言第10-20页
    1.1 蛋白质组学概念及其差异蛋白质组学技术简介第10-11页
        1.1.1 基于凝胶差异分析技术第10页
        1.1.2 非凝胶差异分析技术第10-11页
    1.2 差异蛋白质组学技术在水生动物应激反应研究中的应用第11-16页
        1.2.1 非生物环境因子引起应激反应的差异蛋白质组学第11-14页
        1.2.2 病原微生物引起应激反应的差异蛋白质组学第14-15页
        1.2.3 展望第15-16页
    1.3 动物性腺差异的蛋白质组学研究进展第16页
    1.4 组织蛋白酶 B(cathepsin B)的研究进展第16-17页
    1.5 日本囊对虾地理分布、形态特征及生活习性第17-18页
    1.6 本研究的背景和主要内容第18-19页
    1.7 本研究的技术路线第19-20页
第2章 日本囊对虾性腺蛋白质双向电泳样品制备方法第20-31页
    2.1 材料第20-22页
        2.1.1 实验动物第20页
        2.1.2 主要仪器第20页
        2.1.3 主要试剂第20-22页
    2.2 实验方法第22-27页
        2.2.1 日本囊对虾性腺蛋白质提取方法第22-23页
        2.2.2 测定蛋白质样品浓度第23-24页
        2.2.3 SDS-PAGE第24页
        2.2.4 双向电泳第24-27页
    2.3 结果第27-29页
        2.3.1 SDS-PAGE 结果分析第27页
        2.3.2 双向电泳结果分析第27-29页
    2.4 讨论第29-30页
    2.5 小结第30-31页
第3章 日本囊对虾性腺差异蛋白质组学研究第31-47页
    3.1 材料第31页
        3.1.1 实验动物第31页
        3.1.2 主要仪器第31页
        3.1.3 主要试剂第31页
    3.2 实验方法第31-34页
        3.2.1 RDP 法提取日本囊对虾性腺蛋白质样品第31-32页
        3.2.2 Bradford 法测定蛋白质样品浓度第32页
        3.2.3 SDS-PAGE第32页
        3.2.4 双向电泳第32-34页
    3.3 结果第34-43页
        3.3.1 日本囊对虾卵巢与精巢 SDS-PAGE 图谱的比较第34-35页
        3.3.2 日本囊对虾卵巢与精巢 2-DE 图谱的比较第35-36页
        3.3.3 差异蛋白点鉴定结果第36-43页
    3.4 讨论第43-46页
    3.5 小结第46-47页
第4章 性腺差异表达蛋白 Cathepsin B 的基因克隆与表达分析第47-66页
    4.1 材料第47-49页
        4.1.1 实验动物第47页
        4.1.2 主要仪器和试剂第47-48页
        4.1.3 引物第48-49页
    4.2 实验方法第49-55页
        4.2.1 基因全长的克隆第49-52页
        4.2.2 Real-time PCR 检测相关基因在不同组织中的表达第52页
        4.2.3 原核表达重组载体的构建第52-54页
        4.2.4 重组表达载体的表达与纯化第54-55页
    4.3 结果第55-64页
        4.3.1 总 RNA 的提取结果第55-56页
        4.3.2 日本囊对虾 Mj-CTSB 基因序列分析第56-62页
        4.3.3 Mj-CTSB 基因在日本囊对虾不同组织间的表达差异第62页
        4.3.4 重组表达质粒 pGEX-CTSB 的构建第62-63页
        4.3.5 重组表达质粒 pGEX-CTSB 在 E.coli BL21 中的表达及纯化第63-64页
    4.4 讨论第64-65页
    4.5 小结第65-66页
第5章 总结与展望第66-67页
致谢第67-68页
参考文献第68-79页
附录第79-83页
在学期间发表的学术论文第83页

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