摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 引言 | 第10-20页 |
1.1 蛋白质组学概念及其差异蛋白质组学技术简介 | 第10-11页 |
1.1.1 基于凝胶差异分析技术 | 第10页 |
1.1.2 非凝胶差异分析技术 | 第10-11页 |
1.2 差异蛋白质组学技术在水生动物应激反应研究中的应用 | 第11-16页 |
1.2.1 非生物环境因子引起应激反应的差异蛋白质组学 | 第11-14页 |
1.2.2 病原微生物引起应激反应的差异蛋白质组学 | 第14-15页 |
1.2.3 展望 | 第15-16页 |
1.3 动物性腺差异的蛋白质组学研究进展 | 第16页 |
1.4 组织蛋白酶 B(cathepsin B)的研究进展 | 第16-17页 |
1.5 日本囊对虾地理分布、形态特征及生活习性 | 第17-18页 |
1.6 本研究的背景和主要内容 | 第18-19页 |
1.7 本研究的技术路线 | 第19-20页 |
第2章 日本囊对虾性腺蛋白质双向电泳样品制备方法 | 第20-31页 |
2.1 材料 | 第20-22页 |
2.1.1 实验动物 | 第20页 |
2.1.2 主要仪器 | 第20页 |
2.1.3 主要试剂 | 第20-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-27页 |
2.2.1 日本囊对虾性腺蛋白质提取方法 | 第22-23页 |
2.2.2 测定蛋白质样品浓度 | 第23-24页 |
2.2.3 SDS-PAGE | 第24页 |
2.2.4 双向电泳 | 第24-27页 |
2.3 结果 | 第27-29页 |
2.3.1 SDS-PAGE 结果分析 | 第27页 |
2.3.2 双向电泳结果分析 | 第27-29页 |
2.4 讨论 | 第29-30页 |
2.5 小结 | 第30-31页 |
第3章 日本囊对虾性腺差异蛋白质组学研究 | 第31-47页 |
3.1 材料 | 第31页 |
3.1.1 实验动物 | 第31页 |
3.1.2 主要仪器 | 第31页 |
3.1.3 主要试剂 | 第31页 |
3.2 实验方法 | 第31-34页 |
3.2.1 RDP 法提取日本囊对虾性腺蛋白质样品 | 第31-32页 |
3.2.2 Bradford 法测定蛋白质样品浓度 | 第32页 |
3.2.3 SDS-PAGE | 第32页 |
3.2.4 双向电泳 | 第32-34页 |
3.3 结果 | 第34-43页 |
3.3.1 日本囊对虾卵巢与精巢 SDS-PAGE 图谱的比较 | 第34-35页 |
3.3.2 日本囊对虾卵巢与精巢 2-DE 图谱的比较 | 第35-36页 |
3.3.3 差异蛋白点鉴定结果 | 第36-43页 |
3.4 讨论 | 第43-46页 |
3.5 小结 | 第46-47页 |
第4章 性腺差异表达蛋白 Cathepsin B 的基因克隆与表达分析 | 第47-66页 |
4.1 材料 | 第47-49页 |
4.1.1 实验动物 | 第47页 |
4.1.2 主要仪器和试剂 | 第47-48页 |
4.1.3 引物 | 第48-49页 |
4.2 实验方法 | 第49-55页 |
4.2.1 基因全长的克隆 | 第49-52页 |
4.2.2 Real-time PCR 检测相关基因在不同组织中的表达 | 第52页 |
4.2.3 原核表达重组载体的构建 | 第52-54页 |
4.2.4 重组表达载体的表达与纯化 | 第54-55页 |
4.3 结果 | 第55-64页 |
4.3.1 总 RNA 的提取结果 | 第55-56页 |
4.3.2 日本囊对虾 Mj-CTSB 基因序列分析 | 第56-62页 |
4.3.3 Mj-CTSB 基因在日本囊对虾不同组织间的表达差异 | 第62页 |
4.3.4 重组表达质粒 pGEX-CTSB 的构建 | 第62-63页 |
4.3.5 重组表达质粒 pGEX-CTSB 在 E.coli BL21 中的表达及纯化 | 第63-64页 |
4.4 讨论 | 第64-65页 |
4.5 小结 | 第65-66页 |
第5章 总结与展望 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-79页 |
附录 | 第79-83页 |
在学期间发表的学术论文 | 第83页 |