| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 1 文献综述 | 第14-26页 |
| ·群体感应系统 | 第14-19页 |
| ·铜绿假单胞菌群体感应系统 | 第17页 |
| ·N-acylhomoserine lactone（AHL）类信号分子介导群体感应系统 | 第17页 |
| ·2-alkyl-4-quinolone（AQ）类信号分子介导群体感应系统 | 第17-19页 |
| ·群体感应系统信号分子的检测方法 | 第19页 |
| ·聚羟基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoate，PHA)简介 | 第19-25页 |
| ·聚羟基脂肪酸酯单体的组成和分类 | 第20页 |
| ·聚羟基脂肪酸酯相关基因和酶 | 第20-21页 |
| ·聚羟基脂肪酸酯合成途径 | 第21-22页 |
| ·聚羟基脂肪酸酯鉴定及检测 | 第22-23页 |
| ·聚羟基脂肪酸酯应用 | 第23-24页 |
| ·聚羟基脂肪酸酯展望 | 第24-25页 |
| ·课题研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 2 QS 系统与胞内PHA 合成的表型分析 | 第26-33页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·供试菌株及载体 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·仪器设备 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-29页 |
| ·培养条件 | 第27页 |
| ·PHA 标准曲线的绘制 | 第27页 |
| ·气相色谱(GC)对PHA 含量检测 | 第27-28页 |
| ·不同时间对PHA 合成的影响 | 第28页 |
| ·信号分子提取 | 第28-29页 |
| ·结果 | 第29-32页 |
| ·PHA 标样气相色谱分析 | 第29-30页 |
| ·表型分析 | 第30-32页 |
| ·信号分子检测 | 第32页 |
| ·小结 | 第32-33页 |
| 3 QS 系统与胞内PHA 合成关系的分子水平分析 | 第33-49页 |
| ·材料 | 第33-36页 |
| ·供试菌株及载体 | 第33-34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·仪器设备 | 第34页 |
| ·培养基 | 第34-35页 |
| ·溶液配制 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-43页 |
| ·细菌RNA 提取 | 第36-37页 |
| ·去除RNA 中的DNA | 第37页 |
| ·进行Realtime-PCR | 第37-38页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞制备 | 第38-39页 |
| ·大肠杆菌的热激转化 | 第39页 |
| ·CTAB 法提取质粒DNA | 第39页 |
| ·从琼脂糖凝胶中回收DNA 片段 | 第39-40页 |
| ·铜绿假单胞菌转录报告载体的构建的构建 | 第40-43页 |
| ·β-半乳糖苷酶（lacZ）酶活测定 | 第43页 |
| ·结果 | 第43-47页 |
| ·realtime PCR 检测 | 第43-45页 |
| ·转录报告载体的构建 | 第45-47页 |
| ·铜绿假单胞菌的抗性筛选 | 第47页 |
| ·β-半乳糖苷酶活性的检测 | 第47页 |
| ·小结 | 第47-49页 |
| 4 构建铜绿假单胞菌回复菌株 | 第49-61页 |
| ·材料 | 第49-51页 |
| ·菌株、质粒和培养时间 | 第49页 |
| ·主要试剂 | 第49页 |
| ·仪器设备 | 第49-51页 |
| ·溶液配制 | 第51页 |
| ·培养基 | 第51页 |
| ·方法 | 第51-55页 |
| ·培养条件 | 第51页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞制备 | 第51页 |
| ·大肠杆菌的热激转化 | 第51页 |
| ·CTAB 法提取质粒DNA | 第51页 |
| ·从琼脂糖凝胶中回收DNA 片段 | 第51页 |
| ·铜绿假单胞菌表达载体的构建 | 第51-54页 |
| ·铜绿假单胞菌感受态细胞的制备 | 第54页 |
| ·铜绿假单胞菌电击转化 | 第54页 |
| ·铜绿假单胞菌的抗性筛选 | 第54-55页 |
| ·应用气相色谱(GC)对PHA 含量进行检测 | 第55页 |
| ·结果 | 第55-60页 |
| ·铜绿假单胞菌PA01 基因组DNA 的提取 | 第55页 |
| ·铜绿假单胞菌表达载体p415G-lasI 的构建 | 第55-58页 |
| ·铜绿假单胞菌表达载体p415G-lasR 的构建 | 第58-60页 |
| ·回复菌株的构建 | 第60页 |
| ·表型分析 | 第60页 |
| ·小结 | 第60-61页 |
| 讨论 | 第61-63页 |
| 结论 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 后记（含致谢） | 第72-73页 |
| 攻读学位期间取得的科研成果 | 第73页 |
