| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略语 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-15页 |
| 研究现状、成果 | 第12-13页 |
| 研究目的、方法 | 第13-15页 |
| 对象和方法 | 第15-35页 |
| 1. 实验对象 | 第15-21页 |
| 1.1 实验动物 | 第15页 |
| 1.2 主要仪器设备及耗材 | 第15-17页 |
| 1.3 主要试剂 | 第17-18页 |
| 1.4 主要试剂及溶液的配制 | 第18-21页 |
| 2. 实验方法 | 第21-35页 |
| 2.1 原代兔角膜基质细胞的获得与培养 | 第21-22页 |
| 2.2 预实验分组 | 第22页 |
| 2.3 MTT比色法检测各实验组角膜成纤维细胞存活率 | 第22-23页 |
| 2.4 实验分组 | 第23-24页 |
| 2.5 总mRNA的提取及其反转录 | 第24-26页 |
| 2.5.1 Redzol一步法提取细胞总mRNA | 第24-25页 |
| 2.5.2 mRNA浓度检测 | 第25-26页 |
| 2.5.3 反转录合成cDNA | 第26页 |
| 2.6 实时荧光定量PCR检测炎症相关基因表达 | 第26-28页 |
| 2.7 蛋白质的提取及浓度测定 | 第28-29页 |
| 2.7.1 细胞蛋白质的提取 | 第28-29页 |
| 2.7.2 BCA法测定蛋白质浓度 | 第29页 |
| 2.8 蛋白质印迹法检测各组目的蛋白的相对表达量 | 第29-32页 |
| 2.8.1 蛋白样品的制备 | 第29页 |
| 2.8.2 SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第29-31页 |
| 2.8.3 转膜 | 第31-32页 |
| 2.8.4 抗体孵育及洗脱 | 第32页 |
| 2.8.5 化学发光法及显影定影 | 第32页 |
| 2.8.6 条带扫描及结果分析 | 第32页 |
| 2.9 免疫荧光吸附反应检测各实验组IL-6,IL-8的蛋白相对表达量 | 第32-34页 |
| 2.10 统计学分析方法 | 第34-35页 |
| 结果 | 第35-43页 |
| 1 角膜基质细胞的培养及向角膜成纤维细胞转化 | 第35页 |
| 2 LPS诱导角膜基质细胞炎症模型的建立 | 第35-37页 |
| 2.1 MTT探索LPS及PTEN浓度 | 第35-36页 |
| 2.2 实时定量荧光PCR检测LPS组IL-6,IL-8的mRNA表达量 | 第36-37页 |
| 3 BPV抑制角膜基质细胞PTEN的表达 | 第37-38页 |
| 3.1 实时定量荧光PCR检测BPV组PTEN的mRNA表达量 | 第37-38页 |
| 3.2 蛋白质印迹法检测BPV组磷酸化PTEN蛋白的相对表达量 | 第38页 |
| 4 PTEN抑制LPS诱导的角膜基质细胞炎症 | 第38-41页 |
| 4.1 实时定量荧光PCR检测各组IL-6、IL-8的mRNA表达量 | 第38-39页 |
| 4.2 蛋白质印迹法检测各组磷酸化PTEN蛋白的相对表达量 | 第39-40页 |
| 4.3 蛋白质印迹法检测各组磷酸化AKT蛋白的相对表达量 | 第40-41页 |
| 5 酶联免疫荧光法检测各实验组IL-6、IL-8结果 | 第41-43页 |
| 5.1 标准曲线绘制 | 第41页 |
| 5.2 IL-6、IL-8浓度测定 | 第41-43页 |
| 讨论 | 第43-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第51-52页 |
| 综述 PTEN-PI3K/AKT信号转导通路在炎症中的生物学作用 | 第52-60页 |
| 综述参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 个人简历 | 第61页 |
