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拟南芥ABI5亚家族基因表达特性研究

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
中英文缩写词表(ABBREVIATIONS)第14-15页
第一章 绪论第15-23页
    1.1 ABA在植物中的作用第15-16页
    1.2 ABA的逆境响应第16页
    1.3 ABA信号转导途径的转录因子第16-18页
        1.3.1 MYC和MYB类转录因子第17页
        1.3.2 AP2类转录因子第17-18页
        1.3.3 Ring Finger类转录因子第18页
        1.3.4 其他类转录因子第18页
    1.4 ABI5亚家族基因研究进展第18-21页
        1.4.1 ABI5亚家族基因参与逆境的响应第19-20页
        1.4.2 ABI5亚家族基因表达模式研究现状第20-21页
    1.5. 研究目的及内容第21-23页
        1.5.1 研究目的及意义第21-22页
        1.5.2 研究内容第22-23页
第二章 拟南芥ABI5亚家族基因启动子的扩增及其驱动的GUS报告基因表达载体的构建第23-49页
    2.1 实验材料第23-24页
        2.1.1 植物材料及培养第23页
        2.1.2 菌株及载体第23页
        2.1.3 生化试剂及耗材第23-24页
        2.1.4 仪器第24页
    2.2 培养基及溶液配制第24-25页
        2.2.1 培养基第24页
        2.2.2 试剂溶液第24-25页
    2.3 实验方法第25-31页
        2.3.1 ABI5亚家族基因启动子引物设计第26-27页
        2.3.2 ABI5亚家族基因上游序列的生物信息学分析第27-28页
        2.3.3 高纯拟南芥叶片基因组提取第28页
        2.3.4 启动子克隆第28页
        2.3.5 ABI5基因启动子驱动的GUS基因植物表达载体构建第28-29页
        2.3.6 大肠杆菌DH5α 超级感受态细胞制备第29-30页
        2.3.7 重组质粒转化大肠杆菌DH5α 及鉴定第30页
        2.3.8 ABF3启动子克隆及载体构建第30-31页
    2.4 结果分析第31-45页
        2.4.0 ABI5亚家族基因启动子引物设计第31-32页
        2.4.1 ABI5亚家族基因启动子序列生物信息学分析第32-43页
        2.4.2 拟南芥基因组提取及质粒酶切第43页
        2.4.3 启动子克隆第43-45页
        2.4.4 重组载体构建第45页
        2.4.5 测序结果第45页
    2.5 讨论第45-47页
    2.6 本章小结第47-49页
第三章 ABI5亚家族基因启动子驱动的GUS基因表达载体遗传转化拟南芥及转基因植株组织化学染色研究第49-59页
    3.1 实验材料第49-50页
        3.1.1 植物材料及培养第49页
        3.1.2 菌株及载体第49页
        3.1.3 生化试剂及耗材第49页
        3.1.4 仪器第49-50页
    3.2 培养基及溶液配制第50-51页
        3.2.1 培养基第50页
        3.2.2 试剂溶液第50-51页
    3.3 实验方法第51-54页
        3.3.1 农杆菌GV3101感受态细胞制备第51页
        3.3.2 重组质粒转化农杆菌GV3101及鉴定第51页
        3.3.3 农杆菌花侵染法转化拟南芥第51-52页
        3.3.4 转化拟南芥筛选第52页
        3.3.5 拟南芥叶片核DNA粗提取第52-53页
        3.3.6 PCR鉴定转基因拟南芥的引物设计第53页
        3.3.7 转基因拟南芥的鉴定第53页
        3.3.8 转基因拟南芥的无菌培养第53-54页
        3.3.9 GUS组织染色第54页
    3.4 结果分析第54-57页
        3.4.1 重组质粒转化农杆菌GV3101及鉴定第54-55页
        3.4.2 转基因拟南芥鉴定第55页
        3.4.3 GUS染色分析第55-57页
    3.5 讨论第57-58页
    3.6 本章小结第58-59页
第四章 拟南芥ABI5亚家族基因在ABA、低渗、低温等处理下mRNA含量变化分析第59-76页
    4.1 实验材料第59页
        4.1.1 植物材料及培养第59页
        4.1.2 生化试剂及耗材第59页
        4.1.3 仪器第59页
    4.2 培养基和溶液配制第59-60页
        4.2.1 培养基第59-60页
        4.2.2 试剂溶液第60页
    4.3.方法第60-64页
        4.3.1 不同胁迫对拟南芥幼苗生长及发育的影响第60-61页
        4.3.2 ABI5亚家族基因在ABA、低渗、低温等条件下的表达变化第61-64页
        4.3.3 生长不同天数拟南芥幼苗中ABI5亚家族基因mRNA含量的变化第64页
    4.4 结果分析第64-73页
        4.4.1 不同胁迫对拟南芥种子萌发的影响第64页
        4.4.2 不同胁迫对拟南芥幼苗生长的影响第64页
        4.4.3 qRT-PCR引物质量评价第64-66页
        4.4.4 引物设计及合成第66-67页
        4.4.5 ABI5亚家族基因对ABA、低渗、低温等条件的响应第67-73页
        4.4.6 不同生长天数拟南芥幼苗ABI5亚家族基因表达量分析第73页
    4.5 讨论第73-75页
    4.6 本章小结第75-76页
第五章 PMX-1 遗传转化拟南芥第76-79页
    5.1 材料与方法第76-77页
    5.2 结果分析第77页
        5.2.1 pMX-1 转化农杆菌GV3101及鉴定第77页
        5.2.2 pMX-1 遗传转化拟南芥抗性植株鉴定第77页
    5.3 讨论第77-79页
结论第79-81页
参考文献第81-85页
致谢第85-86页
附录1 攻读学位期间所发表的学术论文目录第86-87页
附录2 ABI5亚家族基因启动子序列第87-94页
附录3 ABI5亚家族基因启动子元件分析第94-96页

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