| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略词 | 第9-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-25页 |
| 1.1 细小病毒科浓核病毒的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2 家蚕二分浓核病毒的研究 | 第14-20页 |
| 1.2.1 家蚕二分浓核病毒概述 | 第14-15页 |
| 1.2.2 家蚕二分浓核病毒的分子生物学研究 | 第15-18页 |
| 1.2.3 病毒复制与拯救的研究 | 第18-19页 |
| 1.2.4 家蚕对家蚕二分浓核病毒抗性的研究 | 第19-20页 |
| 1.3 细小病毒与家蚕二分浓核病毒NS1蛋白的研究 | 第20-22页 |
| 1.3.1 细小病毒NS1蛋白功能的研究 | 第20-21页 |
| 1.3.2 BmBDV NS1蛋白的相关研究 | 第21-22页 |
| 1.4 研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 1.5 研究内容及技术路线 | 第23-25页 |
| 1.5.1 主要研究内容 | 第23-24页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第24-25页 |
| 第二章 BmBDV ns1基因的克隆与原核表达载体构建 | 第25-42页 |
| 2.1 材料试剂 | 第25-27页 |
| 2.1.1 主要材料 | 第25页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.3 配制试剂 | 第26页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-36页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第27页 |
| 2.2.2 ns1片段的PCR | 第27-29页 |
| 2.2.3 将ns1片段与pMD-18T载体连接 | 第29页 |
| 2.2.4 转化以及验证 | 第29-32页 |
| 2.2.5 目的条带ns1与表达质粒的连接 | 第32-35页 |
| 2.2.6 再次转化和验证 | 第35页 |
| 2.2.7 重组质粒转化E.coli BL21菌 | 第35-36页 |
| 2.3 结果与分析 | 第36-41页 |
| 2.3.1 获得ns1序列 | 第36-40页 |
| 2.3.2 三种片段分别与表达载体连接的验证 | 第40页 |
| 2.3.3 重组质粒转化E.coli BL21菌 | 第40-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-42页 |
| 第三章 BmBDV NS1蛋白的表达及纯化 | 第42-57页 |
| 3.1 材料试剂 | 第42-44页 |
| 3.1.1 主要材料 | 第42页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第42页 |
| 3.1.3 配制试剂 | 第42-43页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第43-44页 |
| 3.2 实验方法 | 第44-49页 |
| 3.2.1 寻找最佳诱导表达温度 | 第44-46页 |
| 3.2.2 翻译起始区（TIR）内同义突变对表达的影响 | 第46-47页 |
| 3.2.3 蛋白的纯化 | 第47-48页 |
| 3.2.4 NS1蛋白的质谱分析 | 第48-49页 |
| 3.3 实验结果 | 第49-56页 |
| 3.3.1 最佳诱导表达温度 | 第49-51页 |
| 3.3.2 翻译起始区（TIR）内同义突变对表达的影响 | 第51-53页 |
| 3.3.3 BmBDV NS1蛋白的纯化 | 第53-55页 |
| 3.3.4 NS1蛋白的质谱分析 | 第55-56页 |
| 3.4 讨论 | 第56-57页 |
| 第四章 BmBDV NS1蛋白生物毒理性分析 | 第57-62页 |
| 4.1 材料试剂 | 第57-58页 |
| 4.1.1 主要材料 | 第57页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第57页 |
| 4.1.3 配制试剂 | 第57页 |
| 4.1.4 实验仪器 | 第57-58页 |
| 4.2 实验方法 | 第58-59页 |
| 4.2.1 NS1蛋白对BmN细胞的毒性 | 第58页 |
| 4.2.2 NS1蛋白在家蚕水平的毒性 | 第58-59页 |
| 4.3 实验结果 | 第59-61页 |
| 4.3.1 NS1蛋白对BmN细胞的毒性 | 第60页 |
| 4.3.2 NS1蛋白对家蚕的毒性 | 第60-61页 |
| 4.4 讨论 | 第61-62页 |
| 第五章 BmBDVNS1蛋白与Bm-SP142及BmBDV DNA聚合酶的体外互作分析 | 第62-73页 |
| 5.1 材料试剂 | 第62-63页 |
| 5.1.1 主要材料 | 第62页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第62页 |
| 5.1.3 配制试剂 | 第62-63页 |
| 5.1.4 实验仪器 | 第63页 |
| 5.2 实验方法 | 第63-65页 |
| 5.2.1 带His标签的BmBDV NS1蛋白的表达 | 第63页 |
| 5.2.2 NS1蛋白与家蚕丝氨酸蛋白酶Bm-SP142的pull-down assay | 第63-64页 |
| 5.2.3 NS1蛋白与VD1-ORF41093bp蛋白片段的pull-down assay | 第64-65页 |
| 5.2.4 NS1蛋白与VD1-ORF4616bpA蛋白片段的pull-down assay | 第65页 |
| 5.2.5 NS1蛋白与VD1-ORF4616bpB蛋白片段的pull-down assay | 第65页 |
| 5.3 实验结果 | 第65-72页 |
| 5.3.1 pET30a-ns1C/BL21菌的诱导表达 | 第65-66页 |
| 5.3.2 NS1蛋白与家蚕丝氨酸蛋白酶Bm-SP142的体外互作 | 第66-67页 |
| 5.3.3 NS1蛋白与VD1-ORF41093bp蛋白片段的体外互作 | 第67-69页 |
| 5.3.4 NS1蛋白与VD1-ORF4616bpA蛋白片段的体外互作 | 第69-70页 |
| 5.3.5 NS1蛋白与VD1-ORF4616bpB蛋白片段的体外互作 | 第70-72页 |
| 5.4 讨论 | 第72-73页 |
| 第六章 总结与展望 | 第73-75页 |
| 6.1 主要工作总结 | 第73-74页 |
| 6.2 展望 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 在学期间发表论文及参与课题 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
