| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 第一篇 文献综述 | 第15-23页 |
| 1 弓形虫病诊断方法研究进展 | 第15-23页 |
| 1.1 病原学诊断 | 第16页 |
| 1.2 免疫学诊断方法 | 第16-19页 |
| 1.3 分子生物学诊断方法 | 第19-21页 |
| 1.4 防治措施 | 第21-23页 |
| 第二篇 研究内容 | 第23-59页 |
| 第1章 弓形虫SAG3抗原的制备及纯化 | 第23-31页 |
| 1.1 材料和方法 | 第23-25页 |
| 1.1.1 试验材料 | 第23页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第23页 |
| 1.1.3 主要试剂的配制 | 第23-25页 |
| 1.2 试验方法 | 第25-28页 |
| 1.2.1 重组蛋白SAG3诱导表达 | 第25-26页 |
| 1.2.2 SAG3重组蛋白的纯化 | 第26页 |
| 1.2.3 SAG3重组蛋白的透析与复性 | 第26-27页 |
| 1.2.4 SAG3重组蛋白浓缩 | 第27页 |
| 1.2.5 SDS-PAGE电泳 | 第27-28页 |
| 1.3 结果 | 第28-29页 |
| 1.3.1 SAG3重组蛋白的纯化 | 第28-29页 |
| 1.3.2 SAG3重组蛋白的透析与复性 | 第29页 |
| 1.4 讨论 | 第29-30页 |
| 1.5 小结 | 第30-31页 |
| 第2章 猫弓形虫感染间接ELISA检测方法的建立 | 第31-40页 |
| 2.1 材料与方法 | 第31-34页 |
| 2.1.1 主要材料 | 第31页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第31-32页 |
| 2.1.3 间接ELISA反应步骤 | 第32页 |
| 2.1.4 猫弓形虫SAG3蛋白间接ELISA方法条件的建立 | 第32-33页 |
| 2.1.5 间接ELISA阴性和阳性判断标准确定 | 第33页 |
| 2.1.6 敏感性试验 | 第33页 |
| 2.1.7 特异性试验 | 第33-34页 |
| 2.1.8 重复性试验 | 第34页 |
| 2.1.9 样品检测 | 第34页 |
| 2.2 结果 | 第34-37页 |
| 2.2.1 抗原及血清稀释度 | 第34-35页 |
| 2.2.2 最佳封闭剂 | 第35页 |
| 2.2.3 HRP标记的山羊抗猫IgG工作浓度确定 | 第35页 |
| 2.2.4 HRP标记的山羊抗猫IgG最佳孵育时间的确定 | 第35-36页 |
| 2.2.5 底物反应时间的确定 | 第36页 |
| 2.2.6 临界值的判断 | 第36页 |
| 2.2.7 敏感性试验 | 第36页 |
| 2.2.8 特异性试验 | 第36-37页 |
| 2.2.9 重复性试验 | 第37页 |
| 2.2.10 样品检测 | 第37页 |
| 2.3 讨论 | 第37-39页 |
| 2.4 小结 | 第39-40页 |
| 第3章 猫弓形虫病感染Dot-ELISA检测方法的建立 | 第40-46页 |
| 3.1 材料与方法 | 第40-42页 |
| 3.1.1 主要材料 | 第40页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第40页 |
| 3.1.3 方法 | 第40-42页 |
| 3.2 结果 | 第42-43页 |
| 3.2.1 血清最佳稀释倍数的确定 | 第42页 |
| 3.2.3 HRP标记的山羊抗猫IgG最佳工作浓度的确定 | 第42页 |
| 3.2.4 包被抗原最佳工作浓度的确定 | 第42页 |
| 3.2.5 敏感性试验 | 第42-43页 |
| 3.2.6 特异性试验 | 第43页 |
| 3.2.7 重复性试验 | 第43页 |
| 3.2.8 样品检测 | 第43页 |
| 3.3 讨论 | 第43-45页 |
| 3.4 小结 | 第45-46页 |
| 第4章 猫弓形虫感染免疫胶体金试纸条的研制 | 第46-59页 |
| 4.1 材料与方法 | 第46-48页 |
| 4.1.1 主要材料 | 第46页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第46页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第46-48页 |
| 4.2 方法 | 第48-51页 |
| 4.2.1 胶体金溶液的烧制 | 第48页 |
| 4.2.2 胶体金颗粒的鉴定 | 第48页 |
| 4.2.3 胶体金最佳PH的确定 | 第48页 |
| 4.2.4 最佳抗体标记量的确定 | 第48-49页 |
| 4.2.5 金标抗体的制备 | 第49页 |
| 4.2.6 标记后胶体金颗粒鉴定 | 第49页 |
| 4.2.7 样品垫的处理 | 第49页 |
| 4.2.8 试纸条的组装 | 第49-50页 |
| 4.2.9 试纸条最佳反应条件的确定 | 第50页 |
| 4.2.10 试纸条性能试验 | 第50-51页 |
| 4.2.11 临床样品检测 | 第51页 |
| 4.3 结果 | 第51-56页 |
| 4.3.1 胶体金溶液的烧制 | 第51页 |
| 4.3.2 透射电镜鉴定 | 第51-52页 |
| 4.3.3 胶体金最佳pH的确定 | 第52页 |
| 4.3.4 最佳抗体标记量的确定 | 第52-53页 |
| 4.3.5 硝酸纤维素（NC）膜的选择 | 第53页 |
| 4.3.6 检测线(T)包被浓度的确定 | 第53页 |
| 4.3.7 质控线(C)包被浓度的确定 | 第53-54页 |
| 4.3.8 特异性试验 | 第54页 |
| 4.3.9 敏感性试验 | 第54-55页 |
| 4.3.10 重复性试验 | 第55页 |
| 4.3.11 保存期试验 | 第55-56页 |
| 4.3.12 临床样品检测 | 第56页 |
| 4.4 讨论 | 第56-57页 |
| 4.5 小结 | 第57-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 导师简介 | 第68-69页 |
| 作者简介 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
