摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 食品黄曲霉毒素污染现状及其危害 | 第12-22页 |
1 黄曲霉毒素的污染现状 | 第12-14页 |
1.1 黄曲霉毒素的发现 | 第12页 |
1.2 AF的来源、种类与理化特性 | 第12-13页 |
1.2.1 AF的来源 | 第12页 |
1.2.2 AF的种类 | 第12-13页 |
1.2.3 AF的理化特性 | 第13页 |
1.3 AF的污染现状 | 第13-14页 |
2 AF的危害作用 | 第14-20页 |
2.1 AF的毒性 | 第14-15页 |
2.1.1 AF的脏器毒性 | 第15页 |
2.1.2 AF的致癌毒性 | 第15页 |
2.1.3 AF的免疫毒性 | 第15页 |
2.2 AF引发的食品安全事件与国际贸易纠纷 | 第15-17页 |
2.2.1 A F引发的食品安全事件 | 第15-16页 |
2.2.2 AF引发的国际贸易纠纷 | 第16-17页 |
2.3 AF食品残留限量标准 | 第17-20页 |
2.3.1 我国AFB1食品残留限量标准 | 第17-18页 |
2.3.2 世界主要国家TAFs食品残留限量标准 | 第18-20页 |
3 小结 | 第20-22页 |
第二章 食品黄曲霉毒素总量检测技术研究进展 | 第22-30页 |
1 生物鉴定分析法 | 第22页 |
2 理化分析法 | 第22-24页 |
2.1 薄层色谱法 | 第23页 |
2.2 高效液相色谱法 | 第23-24页 |
2.3 高效液相色谱-串联质谱法 | 第24页 |
3 免疫分析法 | 第24-28页 |
3.1 酶联免疫吸附法 | 第24-25页 |
3.2 胶体金免疫层析法 | 第25-26页 |
3.3 荧光免疫分析法 | 第26-27页 |
3.3.1 荧光偏振免疫分析法 | 第26-27页 |
3.3.2 时间分辨荧光免疫分析法 | 第27页 |
3.4 免疫传感器法 | 第27-28页 |
4 小结 | 第28-30页 |
第三章 食品黄曲霉毒素人工免疫原合成与免疫原性鉴定 | 第30-48页 |
1 B族AF人工免疫原的合成与鉴定 | 第30-39页 |
1.1 材料与方法 | 第30-35页 |
1.1.1 材料 | 第30-31页 |
1.1.2 方法 | 第31-35页 |
1.2 结果与分析 | 第35-39页 |
1.2.1 UV鉴定 | 第35-36页 |
1.2.2 SDS-PAGE鉴定 | 第36-37页 |
1.2.3 AFB1 pAb鉴定 | 第37-39页 |
2 G族AF人工免疫原的合成与鉴定 | 第39-45页 |
2.1 材料与方法 | 第39-41页 |
2.1.1 材料 | 第39页 |
2.1.2 方法 | 第39-41页 |
2.2 结果与分析 | 第41-45页 |
2.2.1 UV鉴定 | 第41-42页 |
2.2.2 SDS-PAGE鉴定 | 第42页 |
2.2.3 AFG1 pAb鉴定 | 第42-45页 |
3 讨论 | 第45-47页 |
3.1 关于AF人工免疫原合成路径 | 第45页 |
3.2 关于B族AF人工免疫原合成方法及免疫效果分析 | 第45-46页 |
3.3 关于G族AF人工免疫原合成方法及免疫效果分析 | 第46页 |
3.4 关于AF人工免疫原合成方法的发展趋势 | 第46-47页 |
4 小结 | 第47-48页 |
第四章 黄曲霉毒素单克隆抗体制备及其免疫学特性分析 | 第48-60页 |
1 B族AF mAb制备及其免疫学特性分析 | 第48-54页 |
1.1 材料与方法 | 第48-51页 |
1.1.1 材料 | 第48-49页 |
1.1.2 方法 | 第49-51页 |
1.2 结果与分析 | 第51-54页 |
1.2.1 细胞融合备用小鼠选择结果 | 第51页 |
1.2.2 杂交瘤细胞株筛选结果 | 第51-52页 |
1.2.3 单克隆细胞株稳定性分析结果 | 第52页 |
1.2.4 效价测定结果 | 第52-53页 |
1.2.5 亲和性分析结果 | 第53页 |
1.2.6 特异性分析结果 | 第53-54页 |
2 G族AF m Ab制备及其免疫学特性分析 | 第54-57页 |
2.1 材料与方法 | 第54页 |
2.2 结果与分析 | 第54-57页 |
2.2.1 细胞融合备用小鼠选择结果 | 第54-55页 |
2.2.2 杂交瘤细胞株筛选结果 | 第55页 |
2.2.3 单克隆细胞株稳定性分析结果 | 第55-56页 |
2.2.4 效价测定结果 | 第56页 |
2.2.5 亲和性分析结果 | 第56页 |
2.2.6 特异性分析结果 | 第56-57页 |
3 讨论 | 第57-58页 |
3.1 关于Balb/c小鼠免疫 | 第57页 |
3.2 关于阳性单克隆细胞株的筛选方法 | 第57-58页 |
3.3 关于AFB1 mAb、AFG1 m Ab的质量性能 | 第58页 |
4 小结 | 第58-60页 |
第五章 黄曲霉毒素总量检测免疫试纸方法的建立 | 第60-74页 |
1 材料与方法 | 第60-64页 |
1.1 材料 | 第60-61页 |
1.1.1 试剂、溶液与耗材 | 第60-61页 |
1.1.2 主要仪器 | 第61页 |
1.2 方法 | 第61-64页 |
1.2.1 TAFs免疫试纸(TAFs-Strip)的研制 | 第61-63页 |
1.2.2 AF-Strip的性能测定 | 第63-64页 |
2 结果与分析 | 第64-70页 |
2.1 胶体金质量鉴定 | 第64-65页 |
2.1.1 UV鉴定 | 第64-65页 |
2.1.2 透射电镜扫描鉴定 | 第65页 |
2.2 m Ab与胶体金的最佳标记浓度 | 第65-66页 |
2.3 AF-Strip性能测定 | 第66-70页 |
2.3.1 AFB-Strip性能测定结果 | 第66-67页 |
2.3.2 AFG-Strip性能测定结果 | 第67-68页 |
2.3.3 TAFs-Strip性能测定结果 | 第68-70页 |
3 讨论 | 第70-73页 |
3.1 关于TAFs免疫试纸检测方法 | 第70-71页 |
3.2 关于TAFs免疫试纸检测模式 | 第71-72页 |
3.3 关于TAFs-Strip的优化 | 第72页 |
3.3.1 关于NC膜的选择 | 第72页 |
3.3.2 关于样品垫的处理 | 第72页 |
3.3.3 关于金标抗体的标记率和稳定性 | 第72页 |
3.4 关于待检样品的前期处理 | 第72-73页 |
4 小结 | 第73-74页 |
研究结论 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第87页 |