| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 主要中文缩略符号表 | 第9-10页 |
| 前言 | 第10-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-26页 |
| 1.1 PVY的基因组结构与功能 | 第11-12页 |
| 1.2 HC-Pro研究进展 | 第12-16页 |
| 1.2.1 蚜传活性 | 第13页 |
| 1.2.2 蛋白酶活性 | 第13-14页 |
| 1.2.3 参与病毒复制和症状表达 | 第14页 |
| 1.2.4 影响病毒细胞间和长距离移动 | 第14页 |
| 1.2.5 抑制植物的基因沉默 | 第14-15页 |
| 1.2.6 HC-Pro与寄主蛋白的互作 | 第15-16页 |
| 1.3 叶绿素结合蛋白Cab的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4 蛋白质相互作用的研究方法 | 第17-26页 |
| 1.4.1 酵母双杂交系统 | 第17-18页 |
| 1.4.2 GST融合蛋白沉降技术 | 第18-19页 |
| 1.4.3 串联亲和纯化（TAP） | 第19-20页 |
| 1.4.4 荧光能量共振转移 | 第20-21页 |
| 1.4.5 噬菌体展示 | 第21页 |
| 1.4.6 免疫共沉淀 | 第21-23页 |
| 1.4.7 双分子荧光互补 | 第23-26页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第26-36页 |
| 2.1 材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 本实验所用的菌株和质粒载体 | 第26页 |
| 2.1.2 常用试剂药品及试剂盒 | 第26-27页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第27页 |
| 2.2 方法 | 第27-36页 |
| 2.2.1 目的基因的扩增 | 第27-29页 |
| 2.2.2 目的基因生物信息学分析 | 第29页 |
| 2.2.3 亚细胞定位载体pSPGFP:35S骨架的构建 | 第29-32页 |
| 2.2.4 亚细胞定位载体pSPGFP-Cab-1A的构建 | 第32-33页 |
| 2.2.5 表达载体电击转化农杆菌GV3101 | 第33页 |
| 2.2.6 表达载体在烟草细胞中的瞬时表达 | 第33-34页 |
| 2.2.7 农杆菌GV3101叶盘法遗传转化加工番茄 | 第34-35页 |
| 2.2.8 激光共聚焦观察 | 第35-36页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第36-44页 |
| 3.1 Cab-1A基因的扩增 | 第36页 |
| 3.2 生物信息学分析 | 第36-37页 |
| 3.2.1 Cab蛋白同源序列比对 | 第36-37页 |
| 3.2.2 cab-1a结构预测分析 | 第37页 |
| 3.3 表达载体的酶切鉴定 | 第37-40页 |
| 3.3.1 pSPYNE-35S-Cab-1A和pSPYCE-35S-Cab-1A载体的酶切鉴定 | 第37-38页 |
| 3.3.2 HC-Pro的BiFC载体酶切鉴定 | 第38页 |
| 3.3.3 pCBGFP-Cab-1A、pSPGFP-Cab-1A载体的酶切鉴定 | 第38-40页 |
| 3.4 农杆菌转化子鉴定 | 第40-41页 |
| 3.5 BiFC载体、亚细胞定位载体瞬时转化 | 第41-44页 |
| 3.5.1 BiFC载体瞬时转化烟草细胞 | 第41-42页 |
| 3.5.2 Cab-1A的亚细胞定位 | 第42-43页 |
| 3.5.3 BiFC载体叶盘法转化番茄 | 第43-44页 |
| 第四部分 讨论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-53页 |
| 附录 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55-56页 |
| 附件 | 第56页 |
