摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
缩略词表 | 第15-17页 |
前言 | 第17-18页 |
第一章 文献综述 | 第18-32页 |
1.1 植物雄性不育的研究概况 | 第18-20页 |
1.1.1 植物雄性不育的起源 | 第18页 |
1.1.2 植物雄性不育的类型 | 第18-19页 |
1.1.3 十字花科植物雄性不育 | 第19-20页 |
1.2 植物雄性不育的生理生化研究进展 | 第20-23页 |
1.2.1 植物雄性不育与物质代谢 | 第20-21页 |
1.2.2 植物雄性不育与能量代谢 | 第21-22页 |
1.2.3 植物雄性不育与内源激素 | 第22-23页 |
1.3 植物雄性不育在细胞水平上的研究 | 第23-24页 |
1.3.1 植物雄性不育系花器官形态特征 | 第23页 |
1.3.2 植物雄性不育的细胞学观察 | 第23-24页 |
1.4 植物雄性不育相关基因研究进展 | 第24-26页 |
1.4.1 植物细胞核雄性不育相关基因 | 第24页 |
1.4.2 拟南芥花药和花粉发育相关基因 | 第24-25页 |
1.4.3 十字花科植物花药和花粉发育相关基因 | 第25-26页 |
1.5 植物雄性不育的转录组分析 | 第26-29页 |
1.5.1 转录组测序技术的发展 | 第26-27页 |
1.5.2 RNA-seq技术测序流程 | 第27-28页 |
1.5.3 RNA-seq技术在植物雄性不育研究中的应用 | 第28-29页 |
1.6 植物雄性不育的蛋白质组分析 | 第29-31页 |
1.6.1 蛋白质组相关分离技术 | 第29页 |
1.6.2 iTRAQ技术实验原理 | 第29-31页 |
1.6.3 iTRAQ技术在植物雄性不育研究中的应用 | 第31页 |
1.7 本研究的目的与意义 | 第31-32页 |
第二章 大白菜雄性不育两用系'AB01'花蕾转录组分析 | 第32-62页 |
2.1 材料与方法 | 第32-38页 |
2.1.1 植物材料 | 第32页 |
2.1.2 石蜡切片 | 第32-33页 |
2.1.3 RNA样品制备 | 第33-34页 |
2.1.4 RNA质量检测 | 第34页 |
2.1.5 cDNA文库构建和Illumina测序 | 第34页 |
2.1.6 转录组测序分析 | 第34-35页 |
2.1.7 RNA反转录 | 第35-36页 |
2.1.8 qRT-PCR检测 | 第36页 |
2.1.9 DNA提取与PCR | 第36-37页 |
2.1.10 原位杂交 | 第37-38页 |
2.2 结果与分析 | 第38-61页 |
2.2.1 可育株与不育株花器官表型特征 | 第38-40页 |
2.2.2 RNA-seq数据与参考基因组比对结果 | 第40-42页 |
2.2.3 基因表达水平的分析 | 第42-43页 |
2.2.4 可育株与不育株花蕾的差异表达基因 | 第43-45页 |
2.2.5 花粉壁发育相关的差异表达基因 | 第45页 |
2.2.6 内源激素相关的差异表达基因 | 第45页 |
2.2.7 差异表达的转录因子相关基因 | 第45-50页 |
2.2.8 差异表达基因的GO功能注释和KEGG Pathway富集分析 | 第50-53页 |
2.2.9 差异表达基因的qRT-PCR验证 | 第53-57页 |
2.2.10 原位杂交检测结果 | 第57-61页 |
2.3 小结 | 第61-62页 |
第三章 大白菜雄性不育两用系'AB01'花蕾蛋白质组分析 | 第62-84页 |
3.1 材料与方法 | 第62-65页 |
3.1.1 植物材料 | 第62页 |
3.1.2 六种蛋白质提取方法 | 第62-64页 |
3.1.3 可育株与不育株花蕾蛋白质提取 | 第64页 |
3.1.4 SDS电泳 | 第64页 |
3.1.5 蛋白质的酶解 | 第64页 |
3.1.6 iTRAQ试剂的标记 | 第64页 |
3.1.7 SCX液相分离肽段 | 第64页 |
3.1.8 Triple TOF 5600的LC-EST-MSMS分析 | 第64页 |
3.1.9 生物信息学分析 | 第64页 |
3.1.10 qRT-PCR验证 | 第64-65页 |
3.2 结果与分析 | 第65-82页 |
3.2.1 蛋白质样品浓度检测 | 第65-66页 |
3.2.2 蛋白质提取方法的2-DE图谱比较分析 | 第66-67页 |
3.2.3 蛋白质样品的检测 | 第67-68页 |
3.2.4 蛋白质质量评估 | 第68-69页 |
3.2.5 蛋白质鉴定 | 第69页 |
3.2.6 蛋白质相对分子质量检测 | 第69页 |
3.2.7 肽段序列覆盖度分布 | 第69-70页 |
3.2.8 差异表达蛋白的筛选 | 第70-73页 |
3.2.9 花粉壁发育相关的差异表达蛋白 | 第73-74页 |
3.2.10 位于A07染色体位点差异表达分析 | 第74-76页 |
3.2.11 GO功能注释 | 第76页 |
3.2.12 COG注释 | 第76页 |
3.2.13 KEGG Pathway分析 | 第76-79页 |
3.2.14 差异表达蛋白的GO功能注释 | 第79页 |
3.2.15 差异表达蛋白的KEGG Pathway富集分析 | 第79-81页 |
3.2.16 差异表达蛋白的表达模式验证 | 第81-82页 |
3.3 小结 | 第82-84页 |
第四章 大白菜雄性不育两用系'AB01'花蕾转录组与蛋白质组关联分析 | 第84-95页 |
4.1 材料与方法 | 第84页 |
4.1.1 植物材料 | 第84页 |
4.1.2 差异表达基因与差异表达蛋白的关联性分析 | 第84页 |
4.1.3 GO功能注释和KEGG Pathway富集分析 | 第84页 |
4.2 结果与分析 | 第84-93页 |
4.2.1 转录组与蛋白质组关联比对结果 | 第84页 |
4.2.2 差异表达基因与差异表达蛋白的关联性分析结果 | 第84-89页 |
4.2.3 差异表达基因与差异表达蛋白的GO功能分类 | 第89-91页 |
4.2.4 差异表达基因与差异表达蛋白的KEGG Pathway富集分析 | 第91-93页 |
4.3 小结 | 第93-95页 |
讨论 | 第95-100页 |
结论 | 第100-101页 |
参考文献 | 第101-114页 |
附录 | 第114-123页 |
致谢 | 第123-124页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第124-125页 |