摘要 | 第12-13页 |
Abstract | 第13-14页 |
第一章 绪论 | 第15-23页 |
1.1 芍药概述 | 第15页 |
1.2 芍药属植物再生体系的研究进展 | 第15-17页 |
1.2.1 外植体对再生的影响 | 第15-16页 |
1.2.2 植物生长调节剂对再生的影响 | 第16页 |
1.2.3 基因型对再生的影响 | 第16页 |
1.2.4 芍药属植物再生过程中的问题 | 第16-17页 |
1.3 植物遗传转化的研究进展 | 第17-20页 |
1.3.1 农杆菌介导转化的方法及特点 | 第18页 |
1.3.2 作为遗传转化受体应当具备的条件 | 第18页 |
1.3.3 菌株的选择 | 第18页 |
1.3.4 植物对抗生素的敏感性 | 第18-19页 |
1.3.5 影响农杆菌转化的因素 | 第19-20页 |
1.4 芍药再生及遗传转化的研究进展 | 第20-21页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
1.6 技术路线 | 第22-23页 |
第二章 芍药再生体系的研究 | 第23-33页 |
2.1 试验材料 | 第23页 |
2.1.1 植物材料 | 第23页 |
2.1.2 主要试验器材及试剂 | 第23页 |
2.1.3 培养基及培养条件 | 第23页 |
2.2 试验方法 | 第23-25页 |
2.2.1 种子消毒及胚苗生长 | 第23-24页 |
2.2.2 诱导愈伤组织试验 | 第24-25页 |
2.2.3 愈伤组织的增殖试验 | 第25页 |
2.2.4 愈伤组织分化试验 | 第25页 |
2.3 结果与分析 | 第25-32页 |
2.3.1 种子的消毒时间 | 第25-26页 |
2.3.2 种胚最佳启动培养基的筛选 | 第26-27页 |
2.3.3 芍药愈伤组织诱导的影响因素 | 第27-29页 |
2.3.4 TDZ浓度对愈伤组织增殖的影响 | 第29-30页 |
2.3.5 不同激素组合对芍药愈伤组织分化的影响 | 第30-31页 |
2.3.6 褐化问题的防治 | 第31-32页 |
2.4 小结 | 第32-33页 |
2.4.1 芍药种子离体培养 | 第32页 |
2.4.2 芍药胚性愈伤组织的诱导 | 第32页 |
2.4.3 再生体系的建立 | 第32-33页 |
第三章 芍药遗传转化体系的研究 | 第33-40页 |
3.1 试验材料 | 第33页 |
3.1.1 植物材料 | 第33页 |
3.1.2 农杆菌菌株及载体 | 第33页 |
3.1.3 基本培养基及主要试剂 | 第33页 |
3.1.4 主要仪器和设备 | 第33页 |
3.2 试验方法 | 第33-35页 |
3.2.1 农杆菌的培养及活化 | 第33页 |
3.2.2 芍药胚性愈伤组织对卡那霉素(Kan)敏感性试验 | 第33页 |
3.2.3 抑菌抗生素浓度的筛选 | 第33-34页 |
3.2.4 农杆菌浸染时间与浸染浓度的筛选 | 第34页 |
3.2.5 共培养 | 第34页 |
3.2.6 延迟培养 | 第34页 |
3.2.7 筛选培养 | 第34-35页 |
3.2.8 PCR检测 | 第35页 |
3.3 结果与分析 | 第35-39页 |
3.3.1 芍药胚性愈伤组织对卡那霉素(Kan)的敏感性 | 第35-36页 |
3.3.2 Cef对农杆菌的抑菌效果及对胚性愈伤生长的影响 | 第36页 |
3.3.3 农杆菌浸染浓度与浸染时间的确定 | 第36-37页 |
3.3.4 共培养时间对诱导抗性愈伤组织的影响 | 第37-38页 |
3.3.5 延迟培养时间对诱导抗性愈伤组织的影响 | 第38页 |
3.3.6 筛选培养 | 第38页 |
3.3.7 PCR检测结果 | 第38-39页 |
3.4 小结 | 第39-40页 |
第四章 结论 | 第40-41页 |
4.1 芍药种子的离体培养 | 第40页 |
4.2 胚性愈伤组织的诱导与再生体系的研究 | 第40页 |
4.3 遗传转化体系的研究 | 第40页 |
4.4 PCR检测 | 第40-41页 |
第五章 讨论 | 第41-44页 |
5.1 影响植株再生的因素 | 第41页 |
5.1.1 外植体类型 | 第41页 |
5.1.2 植物激素 | 第41页 |
5.1.3 组织培养过程中的褐化问题 | 第41页 |
5.2 影响遗传转化的因素 | 第41-43页 |
5.2.1 受体材料的选择 | 第41-42页 |
5.2.2 乙酰丁香酮的使用 | 第42页 |
5.2.3 遗传转化效率的确定 | 第42页 |
5.2.4 农杆菌浸染时间 | 第42页 |
5.2.5 抗性芽的获得 | 第42-43页 |
5.3 试验中存在的不足 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
附录 | 第49-50页 |
致谢 | 第50-51页 |