摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-24页 |
1.1 昆虫的生殖系统 | 第11-14页 |
1.2 昆虫卵黄原蛋白(vitellogenin,Vg) | 第14-20页 |
1.2.1 昆虫卵黄原蛋白(Vg)概述 | 第14-16页 |
1.2.2 昆虫卵黄原蛋白(Vg)的分子结构与特性 | 第16-18页 |
1.2.3 昆虫卵黄原蛋白(Vg)的合成、转运与摄取 | 第18-20页 |
1.3 昆虫卵黄发生与卵子形成 | 第20-21页 |
1.4 昆虫卵黄原蛋白(Vg)的功能研究 | 第21-22页 |
1.5 本研究的总体思路 | 第22-24页 |
2 材料与方法 | 第24-32页 |
2.1 材料、试剂及仪器 | 第24页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第24页 |
2.1.2 试剂及试剂盒 | 第24页 |
2.1.3 主要仪器 | 第24页 |
2.2 实验方法 | 第24-32页 |
2.2.1 小菜蛾卵巢解剖 | 第24-25页 |
2.2.2 小菜蛾Vg基因的克隆与生物信息学分析 | 第25-30页 |
2.2.2.1 引物设计 | 第25-26页 |
2.2.2.2 小菜蛾总RNA提取 | 第26页 |
2.2.2.3 cDNA第一链的合成 | 第26-27页 |
2.2.2.4 PCR扩增目的片段 | 第27-28页 |
2.2.2.5 DNA纯化回收 | 第28页 |
2.2.2.6 平末端连接 | 第28-29页 |
2.2.2.7 Vg基因生物信息学分析 | 第29-30页 |
2.2.3 Vg基因表达模式分析 | 第30-31页 |
2.2.3.1 荧光定量PCR引物的设计 | 第30页 |
2.2.3.2 小菜蛾样品准备 | 第30页 |
2.2.3.3 实时荧光定量PCR | 第30-31页 |
2.2.3.4 数据分析 | 第31页 |
2.2.4 Vg基因功能验证 | 第31-32页 |
2.2.4.1 siRNA的制备 | 第31页 |
2.2.4.2 显微注射 | 第31页 |
2.2.4.3 实时荧光定量PCR | 第31页 |
2.2.4.4 生物测定 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-43页 |
3.1 小菜蛾雌性内生殖器官结构及卵巢发育动态 | 第32-33页 |
3.2 小菜蛾总RNA的提取 | 第33页 |
3.3 Vg基因的克隆 | 第33-34页 |
3.4 Vg基因的生物信息学分析 | 第34-40页 |
3.4.1 Vg基因核苷酸序列比对及氨基酸序列特性 | 第34-37页 |
3.4.2 Vg蛋白结构 | 第37页 |
3.4.3 小菜蛾Vg基因的同源性比对及发育进化 | 第37-40页 |
3.5 Vg基因的表达模式 | 第40页 |
3.6 Vg基因的功能验证 | 第40-43页 |
4 讨论 | 第43-47页 |
参考文献 | 第47-59页 |
附录 | 第59-64页 |
附录Ⅰ | 第59-60页 |
附录Ⅱ | 第60-62页 |
附录Ⅲ | 第62-64页 |
致谢 | 第64页 |