摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第13-25页 |
1.1 微孢子虫 | 第13-18页 |
1.1.1 微孢子虫概述 | 第13-15页 |
1.1.2 微孢子虫生活史及其侵染机制 | 第15-17页 |
1.1.3 家蚕微孢子虫概述 | 第17-18页 |
1.2 病原微生物检测方法 | 第18-21页 |
1.2.1 形态学观察阶段 | 第19页 |
1.2.2 血清免疫学检测 | 第19-20页 |
1.2.3 分子生物学检测 | 第20-21页 |
1.3 家蚕微粒子病检测技术研究进展 | 第21-23页 |
1.4 核酸侧向层析试纸条检测技术 | 第23-25页 |
第二章 引言 | 第25-29页 |
2.1 研究背景与目的意义 | 第25-27页 |
2.2 研究内容 | 第27-28页 |
2.3 技术路线 | 第28-29页 |
第三章 家蚕微孢子虫核酸侧向层析试纸条核酸检测体系的建立 | 第29-57页 |
3.1 实验材料 | 第29-32页 |
3.1.1 实验材料 | 第29-30页 |
3.1.2 主要仪器 | 第30页 |
3.1.3 主要试剂 | 第30-32页 |
3.2 实验方法 | 第32-44页 |
3.2.1 家蚕其他病原微生物的培养方法 | 第32页 |
3.2.2 家蚕微孢子虫的纯化与培养 | 第32-33页 |
3.2.3 病原微生物基因组提取 | 第33-35页 |
3.2.4 引物设计 | 第35页 |
3.2.5 引物筛选 | 第35-37页 |
3.2.6 阳性质粒构建 | 第37-39页 |
3.2.7 引物扩增条件研究 | 第39-41页 |
3.2.8 待检样品处理方法研究 | 第41-42页 |
3.2.9 核酸侧向层析试纸条检测体系建立 | 第42-44页 |
3.3 结果与分析 | 第44-54页 |
3.3.1 家蚕微孢子虫的初步纯化及基因组DNA的获得 | 第44-45页 |
3.3.2 家蚕其他病原微生物基因组DNA的获取 | 第45-46页 |
3.3.3 核酸侧向层析检测试纸条的引物设计及筛选 | 第46-49页 |
3.3.4 阳性对照质粒构建 | 第49页 |
3.3.5 引物最佳退火温度及DNA聚合酶选择 | 第49-51页 |
3.3.6 待检样品处理方法研究 | 第51页 |
3.3.7 核酸侧向层析试纸条特异性检测 | 第51-52页 |
3.3.8 核酸侧向层析试纸条灵敏度检测 | 第52-54页 |
3.4 结论与讨论 | 第54-57页 |
第四章 家蚕微孢子虫核酸侧向层析试纸条的应用 | 第57-71页 |
4.1 实验材料 | 第57-58页 |
4.1.1 实验材料 | 第57页 |
4.1.2 实验仪器 | 第57-58页 |
4.1.3 主要试剂 | 第58页 |
4.2 实验方法 | 第58-63页 |
4.2.1 带毒母蛾制备 | 第58页 |
4.2.2 带毒蚕卵制备 | 第58-59页 |
4.2.3 待检样品基因组提取 | 第59-60页 |
4.2.4 家蚕微孢子虫核酸侧向层析试纸条的应用 | 第60-63页 |
4.2.5 NALFS对成品卵检测的稳定性及可靠性分析 | 第63页 |
4.3 结果与分析 | 第63-68页 |
4.3.1 带毒母蛾的检测 | 第63-64页 |
4.3.2 带毒蚕卵的检测 | 第64-65页 |
4.3.3 成品卵(原种及杂交一代种)的检测 | 第65-66页 |
4.3.4 不同的家蚕微孢子虫分离株的检测 | 第66-67页 |
4.3.5 NALFS对成品卵检测的稳定性及可靠性分析 | 第67-68页 |
4.4 结论与讨论 | 第68-71页 |
第五章 家蚕微孢子虫核酸侧向层析检测试剂盒的组装 | 第71-76页 |
5.1 实验方法 | 第71页 |
5.2 结果与分析 | 第71-74页 |
5.3 结论与讨论 | 第74-76页 |
第六章 综合与结论 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-86页 |
附录 | 第86-88页 |
在校期间发表的论文和参加的研究课题 | 第88-90页 |
致谢 | 第90页 |