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O型FMDV衣壳抗原的耐酸改造及其在昆虫细胞中的表达

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
英文缩写表第11-12页
第一章 引言第12-20页
    1.1 研究背景第12-13页
    1.2.蹄疫研究进展第13-14页
    1.3.蹄疫病毒研究进展第14-16页
        1.3.1.蹄疫病毒的基因组第14页
        1.3.2.蹄疫病毒的血清型第14页
        1.3.3.蹄疫病毒的抗原表位第14-15页
        1.3.4.蹄疫病毒的细胞受体第15-16页
    1.4.蹄疫疫苗研究进展第16-18页
        1.4.1 传统疫苗第16-17页
        1.4.2 新型疫苗第17-18页
    1.5.蹄疫的主要防控措施第18-19页
    1.6 Bac-to-Bac杆状病毒研究进展第19-20页
第二章O型FMDV的酸稳定性位点的筛选第20-27页
    2.1 材料与方法第20-21页
        2.1.1 病毒和细胞第20页
        2.1.2 菌株、载体及试剂第20页
        2.1.3 引物设计与合成第20页
        2.1.4 病毒的酸化培养第20页
        2.1.5 酸化病毒的噬斑筛选与培养第20-21页
        2.1.6 耐酸毒株和亲本病毒P1区的克隆测序与分析第21页
    2.2 结果第21-25页
        2.2.1.蹄疫病毒的酸化培养第21-22页
        2.2.2 酸化毒的噬斑筛选第22-23页
        2.2.3 亲本病毒和耐酸毒株P1基因的扩增、克隆与鉴定第23-25页
        2.2.4 亲本病毒和耐酸毒株的序列比对第25页
    2.3 讨论第25-27页
第三章O型.蹄疫病毒衣壳蛋白在昆虫细胞中的表达第27-38页
    3.1 材料与方法第27-29页
        3.1.1 质粒和细胞第27页
        3.1.2 抗体及试剂第27页
        3.1.3 引物设计与合成第27-28页
        3.1.4 重组转移载体pFastBacDual-P12A3C的构建和定点突变第28页
        3.1.5 重组转座子Bacmid-P12A3C的构建第28页
        3.1.6 重组杆状病毒rBac-P12A3C的构建第28页
        3.1.7 间接免疫荧光(IFA)实验检测目的蛋白表达第28-29页
        3.1.8 重组蛋白的提取第29页
        3.1.9 重组蛋白的Western检测第29页
        3.1.10 重组蛋白的双抗体夹心ELISA检测第29页
        3.1.11 重组蛋白的蔗糖密度梯度离心及ELISA鉴定第29页
        3.1.12 病毒样颗粒的电镜观察第29页
    3.2 结果第29-36页
        3.2.1 P12A3C基因的克隆及鉴定第29-30页
        3.2.2 重组转移载体pFastBacDual-P12A3C的构建及鉴定第30-32页
        3.2.3 重组杆状病毒转座子Bacmid-P12A3C的构建与鉴定第32页
        3.2.4 重组杆状病毒rBac-P12A3C的构建第32-33页
        3.2.5 IFA检测外源基因的表达第33-34页
        3.2.6 目的蛋白的Western-blot检测第34页
        3.2.7 重组蛋白的双抗夹心ELISA检测第34-35页
        3.2.8 重组蛋白的蔗糖密度梯度离心及ELISA鉴定第35-36页
        3.2.9 病毒样颗粒的电镜观察结果第36页
    3.3 讨论第36-38页
第四章 全文结论第38-39页
参考文献第39-45页
致谢第45-46页
作者简介第46页

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