摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩写表 | 第11-12页 |
第一章 引言 | 第12-20页 |
1.1 研究背景 | 第12-13页 |
1.2.蹄疫研究进展 | 第13-14页 |
1.3.蹄疫病毒研究进展 | 第14-16页 |
1.3.1.蹄疫病毒的基因组 | 第14页 |
1.3.2.蹄疫病毒的血清型 | 第14页 |
1.3.3.蹄疫病毒的抗原表位 | 第14-15页 |
1.3.4.蹄疫病毒的细胞受体 | 第15-16页 |
1.4.蹄疫疫苗研究进展 | 第16-18页 |
1.4.1 传统疫苗 | 第16-17页 |
1.4.2 新型疫苗 | 第17-18页 |
1.5.蹄疫的主要防控措施 | 第18-19页 |
1.6 Bac-to-Bac杆状病毒研究进展 | 第19-20页 |
第二章O型FMDV的酸稳定性位点的筛选 | 第20-27页 |
2.1 材料与方法 | 第20-21页 |
2.1.1 病毒和细胞 | 第20页 |
2.1.2 菌株、载体及试剂 | 第20页 |
2.1.3 引物设计与合成 | 第20页 |
2.1.4 病毒的酸化培养 | 第20页 |
2.1.5 酸化病毒的噬斑筛选与培养 | 第20-21页 |
2.1.6 耐酸毒株和亲本病毒P1区的克隆测序与分析 | 第21页 |
2.2 结果 | 第21-25页 |
2.2.1.蹄疫病毒的酸化培养 | 第21-22页 |
2.2.2 酸化毒的噬斑筛选 | 第22-23页 |
2.2.3 亲本病毒和耐酸毒株P1基因的扩增、克隆与鉴定 | 第23-25页 |
2.2.4 亲本病毒和耐酸毒株的序列比对 | 第25页 |
2.3 讨论 | 第25-27页 |
第三章O型.蹄疫病毒衣壳蛋白在昆虫细胞中的表达 | 第27-38页 |
3.1 材料与方法 | 第27-29页 |
3.1.1 质粒和细胞 | 第27页 |
3.1.2 抗体及试剂 | 第27页 |
3.1.3 引物设计与合成 | 第27-28页 |
3.1.4 重组转移载体pFastBacDual-P12A3C的构建和定点突变 | 第28页 |
3.1.5 重组转座子Bacmid-P12A3C的构建 | 第28页 |
3.1.6 重组杆状病毒rBac-P12A3C的构建 | 第28页 |
3.1.7 间接免疫荧光(IFA)实验检测目的蛋白表达 | 第28-29页 |
3.1.8 重组蛋白的提取 | 第29页 |
3.1.9 重组蛋白的Western检测 | 第29页 |
3.1.10 重组蛋白的双抗体夹心ELISA检测 | 第29页 |
3.1.11 重组蛋白的蔗糖密度梯度离心及ELISA鉴定 | 第29页 |
3.1.12 病毒样颗粒的电镜观察 | 第29页 |
3.2 结果 | 第29-36页 |
3.2.1 P12A3C基因的克隆及鉴定 | 第29-30页 |
3.2.2 重组转移载体pFastBacDual-P12A3C的构建及鉴定 | 第30-32页 |
3.2.3 重组杆状病毒转座子Bacmid-P12A3C的构建与鉴定 | 第32页 |
3.2.4 重组杆状病毒rBac-P12A3C的构建 | 第32-33页 |
3.2.5 IFA检测外源基因的表达 | 第33-34页 |
3.2.6 目的蛋白的Western-blot检测 | 第34页 |
3.2.7 重组蛋白的双抗夹心ELISA检测 | 第34-35页 |
3.2.8 重组蛋白的蔗糖密度梯度离心及ELISA鉴定 | 第35-36页 |
3.2.9 病毒样颗粒的电镜观察结果 | 第36页 |
3.3 讨论 | 第36-38页 |
第四章 全文结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
作者简介 | 第46页 |