| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 前言 | 第8-15页 |
| 1.1 卤虫的研究进展 | 第8-10页 |
| 1.1.1 卤虫的分布和形态学简介 | 第8页 |
| 1.1.2 卤虫的分类和遗传学研究进展 | 第8-9页 |
| 1.1.3 中国卤虫的研究 | 第9-10页 |
| 1.1.4 中国卤虫的经济价值 | 第10页 |
| 1.2 中国卤虫的研究现状 | 第10-11页 |
| 1.3 API5的研究现状 | 第11-13页 |
| 1.3.1 API5结构及功能 | 第11页 |
| 1.3.2 API5与细胞周期 | 第11-13页 |
| 1.3.3 API5与细胞凋亡 | 第13页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第13-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-31页 |
| 2.1 材料 | 第15-20页 |
| 2.1.1 卤虫的孵化及培养 | 第15页 |
| 2.1.2 药品及试剂 | 第15-19页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.2 方法 | 第20-31页 |
| 2.2.1 提取中国卤虫总RNA | 第20-21页 |
| 2.2.2 cDNA模版的合成 | 第21页 |
| 2.2.3 PCR产物的回收和克隆 | 第21-23页 |
| 2.2.4 As-API5蛋白的原核表达 | 第23-25页 |
| 2.2.5 PET28a-API5重组蛋白的大量诱导及纯化 | 第25-26页 |
| 2.2.6 Real –Time qPCR | 第26页 |
| 2.2.7 2~(-ΔΔCT)计算法 | 第26页 |
| 2.2.8 原位杂交 | 第26-28页 |
| 2.2.9 蛋白免疫印迹试验 | 第28-29页 |
| 2.2.10 SiRNA | 第29-30页 |
| 2.2.11 生物信息学分析 | 第30-31页 |
| 3 结果 | 第31-45页 |
| 3.1 生物信息学分析 | 第31-35页 |
| 3.2 As-API5序列的同源性 | 第35-37页 |
| 3.3 As-API5重组蛋白的表达及纯化 | 第37-39页 |
| 3.3.1 ITPG诱导As -Pet28a -API5重组蛋白的表达 | 第37-38页 |
| 3.3.2 As-API5重组蛋白的可溶性检测 | 第38页 |
| 3.3.3 重组蛋白的纯化 | 第38-39页 |
| 3.4 表达部位的分析 | 第39-40页 |
| 3.5 As-API5蛋白的表达模式 | 第40-43页 |
| 3.5.1 不同发育时期As-API5及相关蛋白相对表达量的分析 | 第40-41页 |
| 3.5.2 低温刺激下，As-API5及相关蛋白相对表达量的分析 | 第41-42页 |
| 3.5.3 高盐刺激下，As-API5及相关蛋白相对表达量的分析 | 第42-43页 |
| 3.6 siRNA | 第43-45页 |
| 4. 讨论 | 第45-48页 |
| 4.1 中国卤虫As-api5全长序列的生物信息学分析 | 第45页 |
| 4.2 api5在中国卤虫不同发育时期的表达部位 | 第45页 |
| 4.3 As-API5不同发育时期的表达模式 | 第45-46页 |
| 4.4 As-API5高盐、低温胁迫下的表达模式 | 第46页 |
| 4.5 中国卤虫不同发育时期api5的siRNA | 第46-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
