| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第12-28页 |
| 1.1 引言 | 第12-13页 |
| 1.2 微小RNA研究现状 | 第13-15页 |
| 1.3 长非编码RNA研究现状 | 第15-16页 |
| 1.4 核糖开关的研究现状 | 第16-19页 |
| 1.4.1 核糖开关的结构特点 | 第17-18页 |
| 1.4.2 核糖开关的作用机制 | 第18-19页 |
| 1.5 SAM核糖开关家族的研究现状 | 第19-21页 |
| 1.6 SAM-V核糖开关的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.7 核糖开关结构和功能的研究意义 | 第22-23页 |
| 1.8 RNA高级结构的研究方法 | 第23-25页 |
| 1.9 RNA体外合成研究现状 | 第25-26页 |
| 1.10 文章主要工作内容 | 第26-28页 |
| 第2章 SAM-V核糖开关体外转录准备 | 第28-42页 |
| 2.1 实验仪器与材料 | 第28-32页 |
| 2.1.1 实验仪器与设备 | 第28-29页 |
| 2.1.2 主要生化试剂及材料 | 第29-30页 |
| 2.1.3 常用试剂配置 | 第30-32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-38页 |
| 2.2.1 感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
| 2.2.2 Taq DNA聚合酶的制备与纯化 | 第33-34页 |
| 2.2.3 T7 RNA聚合酶的制备及纯化 | 第34-36页 |
| 2.2.4 SAM-V晶体结构模板PCR扩增 | 第36-38页 |
| 2.2.5 SAM-V核糖开关的体外转录 | 第38页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第38-41页 |
| 2.3.1 感受态细胞效率 | 第38-39页 |
| 2.3.2 Taq DNA聚合酶活性检测 | 第39页 |
| 2.3.3 T7 RNA聚合酶SDS-PAGE凝胶检测 | 第39-40页 |
| 2.3.4 SAM-V晶体结构模板PCR扩增 | 第40-41页 |
| 2.3.5 SAM-V晶体结构模板体外转录 | 第41页 |
| 2.4 本章小结 | 第41-42页 |
| 第3章 SAM-V核糖开关的体外转录优化 | 第42-57页 |
| 3.1 实验仪器与材料 | 第42-44页 |
| 3.1.1 实验仪器与设备 | 第42-43页 |
| 3.1.2 实验材料与试剂 | 第43-44页 |
| 3.1.3 常用试剂配制 | 第44页 |
| 3.2 实验方法 | 第44-48页 |
| 3.2.1 SAM-V晶体结构模板DNA制备 | 第45-46页 |
| 3.2.2 体外转录标准体系 | 第46页 |
| 3.2.3 体外转录优化体系 | 第46-47页 |
| 3.2.4 RNA凝胶检测和浓度测定 | 第47-48页 |
| 3.3 结果和讨论 | 第48-55页 |
| 3.3.1 DNA模板准备 | 第48页 |
| 3.3.2 体外转录优化结果分析 | 第48-54页 |
| 3.3.3 体外转录标准体系与优化体系的比较 | 第54-55页 |
| 3.4 本章小结 | 第55-57页 |
| 第4章 全文总结与展望 | 第57-59页 |
| 4.1 结论 | 第57-58页 |
| 4.2 展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 附录 1：FPLC法分离纯化体外转录RNA | 第64-65页 |
| 附录 2：攻读学位期间发表的论文情况 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |