摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 前言 | 第12-22页 |
1.1 环境内分泌干扰物 | 第12-15页 |
1.1.1 EDCs作用机制 | 第12-13页 |
1.1.2 EDCs的危害 | 第13-14页 |
1.1.3 双酚A(BPA)和 17α-甲基睾酮(MT)概述 | 第14-15页 |
1.2 肝脏生物转化相关基因及其研究进展 | 第15-20页 |
1.2.1 I相代谢过程 | 第15-17页 |
1.2.2 II相代谢过程 | 第17-19页 |
1.2.3 关键转录因子 | 第19-20页 |
1.2.4 鱼类肝脏生物转化代谢 | 第20页 |
1.3 水环境中毒性试验材料 | 第20页 |
1.3.1 稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)生活习性与分布 | 第20页 |
1.3.2 稀有鮈鲫作为毒性试验材料具有的优点 | 第20页 |
1.4 研究的目的与意义 | 第20-22页 |
第二章 生物转化相关基因的克隆、序列分析及其组织表达 | 第22-48页 |
2.1 实验材料 | 第22-23页 |
2.1.1 稀有鮈鲫 | 第22页 |
2.1.2 实验试剂 | 第22页 |
2.1.3 实验仪器 | 第22-23页 |
2.1.4 主要实验溶液及配制 | 第23页 |
2.2 生物转化相关基因CDNA的克隆 | 第23-32页 |
2.2.1 生物转化相关基因中间片段的克隆 | 第23-26页 |
2.2.2 RACE方法克隆生物合成相关基因cDNA的两端序列 | 第26-29页 |
2.2.3 序列整理及分析 | 第29页 |
2.2.4 实时荧光定量PCR引物的设计与合成 | 第29-31页 |
2.2.5 qRT-PCR检测稀有鮈鲫生物转化相关基因的组织分布情况 | 第31-32页 |
2.3 结果与分析 | 第32-46页 |
2.3.1 肝脏总RNA的提取及检测 | 第32页 |
2.3.2 稀有鮈鲫生物转化相关基因cDNA的克隆 | 第32-33页 |
2.3.3 稀有鮈鲫生物转化相关基因cDNA序列分析 | 第33-42页 |
2.3.4 组织分布 | 第42-46页 |
2.4 讨论 | 第46-47页 |
2.5 小结 | 第47-48页 |
第三章 双酚A对稀有鮈鲫PXR、CYP3A和磺基转移酶mRNA表达的影响 | 第48-55页 |
3.1 实验材料 | 第48页 |
3.1.1 实验动物 | 第48页 |
3.1.2 仪器和试剂 | 第48页 |
3.2 实验方法 | 第48-49页 |
3.2.1 BPA暴露稀有鮈鲫 | 第48页 |
3.2.2 肝脏总RNA的提取、检测和反转录 | 第48-49页 |
3.2.3 内参基因的筛选 | 第49页 |
3.2.4 qRT-PCR检测生物转化相关基因在肝脏中的表达模式 | 第49页 |
3.2.5 数据分析 | 第49页 |
3.3 实验结果 | 第49-53页 |
3.3.1 BPA暴露后稀有鮈鲫肝脏内参基因稳定性 | 第49-50页 |
3.3.2 BPA暴露后稀有鮈鲫肝脏PXR、Cyp3a、Sult1 st4和Sult1 st6转录模式 | 第50-52页 |
3.3.3 CYP3A、PXR和SULT1s相关性分析 | 第52-53页 |
3.4 讨论 | 第53-54页 |
3.5 小结 | 第54-55页 |
第四章 17α-甲基睾酮对稀有鮈鲫肝脏生物转化相关基因mRNA表达的影响 | 第55-65页 |
4.1 实验材料 | 第55页 |
4.1.1 实验动物 | 第55页 |
4.1.2 仪器和试剂 | 第55页 |
4.2 实验方法 | 第55-56页 |
4.2.1 MT暴露稀有鮈鲫 | 第55-56页 |
4.2.2 肝脏总RNA的提取、检测和反转录 | 第56页 |
4.2.3 qRT-PCR检测生物转化相关基因在肝脏中的表达模式 | 第56页 |
4.2.4 数据分析 | 第56页 |
4.3 实验结果 | 第56-61页 |
4.3.1 MT对生物转化相关基因表达模式的影响 | 第56-61页 |
4.3.2 生物转化相关基因之间相关性分析 | 第61页 |
4.4 讨论 | 第61-63页 |
4.5 小结 | 第63-65页 |
结论、创新点与展望 | 第65-66页 |
结论 | 第65页 |
创新点 | 第65页 |
展望 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-77页 |
附录 | 第77-82页 |
缩略词 | 第82-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
作者简介 | 第84页 |