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外源乙烯调控长春花萜类吲哚生物碱合成的代谢和转录组分析

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 绪论第14-33页
    1.1 药用植物长春花及其次生代谢途径概述第14-18页
        1.1.1 长春花的生物学特性及研究现状第14-18页
    1.2 植物激素乙烯对植物的重要影响第18-20页
        1.2.1 乙烯概述第18-19页
        1.2.2 乙烯信号传导途径第19-20页
    1.3 其他信号通路对萜类吲哚生物碱合成的调控第20-22页
        1.3.1 其他信号通路相互作用分子机理第20-21页
        1.3.2 转录因子对TIAs合成通路的调控第21-22页
    1.4 代谢组学简介第22-26页
        1.4.1 代谢组学的发展第23页
        1.4.2 代谢组的分析方法第23-25页
        1.4.3 代谢组在植物次生代谢物研究中的进展第25-26页
    1.5 转录组及转录组学简介第26-32页
        1.5.1 二代测序技术的发展第26-28页
        1.5.2 转录组及转录组学第28-30页
        1.5.3 转录组研究方法第30页
        1.5.4 转录组在药用植物中的应用第30-32页
    1.6 研究目的及意义第32-33页
2 外源乙烯对长春花生长、光合特性和TIAs含量的影响第33-42页
    2.1 引言第33页
    2.2 实验材料及方法第33-35页
        2.2.1 实验材料及处理第33-34页
        2.2.2 形态指标测定方法第34页
        2.2.3 光合参数的测定方法第34-35页
        2.2.4 长春花代谢物提取第35页
        2.2.5 数据处理与分析第35页
    2.3 实验结果第35-40页
        2.3.1 外源乙烯对长春花生长的影响第35-37页
        2.3.2 外源乙烯对长春花叶片光合作用的影响第37-38页
        2.3.3 外源乙烯对长春花叶片光合色素的影响第38-39页
        2.3.4 外源乙烯对长春花生物碱合成的影响第39-40页
    2.4 讨论第40-41页
    2.5 本章小结第41-42页
3 外源乙烯诱导长春花的代谢组分析第42-54页
    3.1 引言第42-43页
    3.2 实验处理与方法第43-44页
        3.2.1 实验材料处理第43页
        3.2.2 液相色谱串联电喷雾离子源四级杆飞行时间质谱分析第43-44页
        3.2.3 多变量分析第44页
    3.3 结果与分析第44-50页
        3.3.1 外源乙烯对长春花代谢物含量的影响第44-46页
        3.3.2 差异代谢物多变量分析第46-47页
        3.3.3 差异代谢物和萜类吲哚生物碱的相关性第47-48页
        3.3.4 外源乙烯调控代谢网络的差异代谢物分析第48-50页
    3.4 讨论第50-52页
        3.4.1 外源乙烯对长春花代谢物的影响第50页
        3.4.2 差异代谢物之间存在明显相关性第50-51页
        3.4.3 外源乙烯使代谢流趋向次生代谢方向第51-52页
    3.5 本章小结第52-54页
4 外源乙烯诱导长春花基因表达的转录组分析第54-82页
    4.1 引言第54-55页
    4.2 实验处理及方法第55-62页
        4.2.1 实验材料处理第55-56页
        4.2.2 总RNA抽提第56页
        4.2.3 总RNA纯化第56-57页
        4.2.4 cDNA文库构建第57页
        4.2.5 上机测序第57-58页
        4.2.6 转录组拼接第58页
        4.2.7 功能注释和分类第58-59页
        4.2.8 Real-time PCR验证第59-61页
        4.2.9 统计分析第61-62页
    4.3 结果与分析第62-76页
        4.3.1 测序数据及质量评估第62-63页
        4.3.2 Unigene功能注释及COG分类第63-64页
        4.3.3 All unigene的GO分类第64-65页
        4.3.4 All unigene的KEGG代谢通路分析第65-66页
        4.3.5 All unigene表达差异分析第66-67页
        4.3.6 代谢相关基因的GO分类分析第67-69页
        4.3.7 差异基因的代谢通路分析第69-70页
        4.3.8 差异表达基因的荧光实时定量PCR验证第70-73页
        4.3.9 TIAs合成催化酶基因、转录因子和生物碱的相关性第73-76页
    4.4 讨论第76-80页
        4.4.1 对转录组测定数据的分析第76-77页
        4.4.2 外源乙烯调控萜类吲哚生物碱合成第77-78页
        4.4.3 TIAs合成催化酶基因、转录因子基因和生物碱的相关性分析第78-79页
        4.4.4 其他信号和也参与调控次生代谢过程第79-80页
    4.5 本章小结第80-82页
结论第82-84页
参考文献第84-96页
附录第96-111页
攻读学位期间发表的学术论文第111-112页
致谢第112-114页
附件第114-115页

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