| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-15页 |
| 1.1 白介素-2 概况 | 第7-9页 |
| 1.1.1 人白介素-2 | 第7页 |
| 1.1.2 人IL-2 分子结构及其生物活性 | 第7页 |
| 1.1.3 重组人IL-2 药物现状 | 第7-8页 |
| 1.1.4 重组人IL-2 类似物的研究 | 第8-9页 |
| 1.1.5 融合蛋白HSA/IL-2 的研究 | 第9页 |
| 1.2 中国仓鼠卵巢细胞表达系统概况 | 第9-11页 |
| 1.2.1 常用表达系统 | 第9-10页 |
| 1.2.2 CHO细胞表达系统的优缺点 | 第10页 |
| 1.2.3 CHO细胞生长方式 | 第10-11页 |
| 1.3 哺乳动物细胞培养工艺研究 | 第11-14页 |
| 1.3.1 细胞培养模式 | 第11-12页 |
| 1.3.2 动物细胞生物反应器 | 第12页 |
| 1.3.3 CHO细胞培养过程中参数检测及控制 | 第12-14页 |
| 1.4 立题意义和研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第15-20页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-16页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第15页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第15页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第15-16页 |
| 2.1.4 培养基及溶液配制 | 第16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-20页 |
| 2.2.1 CHO细胞的培养与冻存 | 第16-17页 |
| 2.2.2 CHO细胞的悬浮驯化 | 第17页 |
| 2.2.3 蛋白检测方法 | 第17-18页 |
| 2.2.4 基础培养基及流加培养基筛选实验 | 第18页 |
| 2.2.5 添加小分子促进剂的流加培养 | 第18页 |
| 2.2.6 CHO细胞周期及细胞凋亡测定 | 第18页 |
| 2.2.7 CHO细胞培养过程中生化指标测定 | 第18页 |
| 2.2.8 搅拌式生物反应器中CHO细胞培养工艺流程 | 第18-19页 |
| 2.2.9 Western blot检测 | 第19页 |
| 2.2.10 融合蛋白生物活性检测 | 第19页 |
| 2.2.11 数据的统计分析 | 第19-20页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第20-36页 |
| 3.1 CHO细胞无血清悬浮培养特性 | 第20-24页 |
| 3.1.1 CHO细胞悬浮驯化培养 | 第20-21页 |
| 3.1.2 无血清培养基筛选 | 第21-22页 |
| 3.1.3 流加培养过程中CHO细胞生长、代谢及融合蛋白表达情况 | 第22-24页 |
| 3.2 提高CHO细胞密度及延长细胞培养周期的培养基优化 | 第24-30页 |
| 3.2.1 小分子添加剂对CHO细胞生长及目的蛋白表达量的影响 | 第24-25页 |
| 3.2.2 水解物添加浓度的确定 | 第25-26页 |
| 3.2.3 流加培养过程中水解物对CHO细胞生长及目的蛋白表达的影响 | 第26-27页 |
| 3.2.4 酵母提取物YE对培养基渗透压影响 | 第27页 |
| 3.2.5 酵母提取物YE对CHO细胞周期的影响 | 第27-29页 |
| 3.2.6 酵母提取物YE对CHO细胞凋亡的影响 | 第29-30页 |
| 3.3 搅拌式生物反应器中CHO细胞培养工艺研究 | 第30-36页 |
| 3.3.1 消泡剂添加浓度筛选 | 第30-31页 |
| 3.3.2 通气量和搅拌速率对CHO细胞生长的影响 | 第31-32页 |
| 3.3.3 搅拌式生物反应器流加培养过程中CHO细胞生长及代谢 | 第32-33页 |
| 3.3.4 生物反应器流加培养过程的优化 | 第33-34页 |
| 3.3.5 融合蛋白验证 | 第34-36页 |
| 主要结论与展望 | 第36-37页 |
| 主要结论 | 第36页 |
| 展望 | 第36-37页 |
| 致谢 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-43页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第43页 |
