摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
第一章 绪论 | 第7-13页 |
1.1 邻苯二甲酸单乙基己基酯 | 第7-8页 |
1.1.1 邻苯二甲酸单乙基己基酯简介 | 第7页 |
1.1.2 邻苯二甲酸酯的研究 | 第7-8页 |
1.2 酿酒酵母细胞 | 第8-10页 |
1.2.1 酿酒酵母作为模式生物 | 第8-9页 |
1.2.2 酿酒酵母全基因组水平上的适应性应答 | 第9页 |
1.2.3 酿酒酵母的渗透适应性 | 第9-10页 |
1.3 酿酒酵母的VPS基因家族 | 第10-11页 |
1.4 酿酒酵母麦角固醇生物合成途径 | 第11-12页 |
1.5 本课题的研究内容和意义 | 第12-13页 |
第二章 实验材料与方法 | 第13-20页 |
2.1 实验材料 | 第13-15页 |
2.1.1 主要试剂药品 | 第13页 |
2.1.2 实验菌株和质粒 | 第13-14页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第14页 |
2.1.4 培养基的配制 | 第14-15页 |
2.1.5 主要溶液配制 | 第15页 |
2.2 实验方法 | 第15-20页 |
2.2.1 玻璃珠法提取酿酒酵母基因组DNA | 第15-16页 |
2.2.2 PCR扩增DNA片段 | 第16页 |
2.2.3 倍比稀释法表型分析 | 第16页 |
2.2.4 酿酒酵母缺失株文库筛选 | 第16-17页 |
2.2.5 HPLC检测酿酒酵母细胞内MEHP | 第17页 |
2.2.6 HPLC检测酿酒酵母细胞麦角固醇 | 第17-18页 |
2.2.7 酿酒酵母质粒的转化 | 第18页 |
2.2.8 β-半乳糖苷酶(LacZ)活性的测定 | 第18-20页 |
第三章 结果与讨论 | 第20-38页 |
3.1 酿酒酵母基因缺失菌株文库筛选 | 第20-28页 |
3.1.1 酿酒酵母文库筛选所用MEHP浓度和背景菌的确定 | 第20页 |
3.1.2 酿酒酵母MEHP敏感缺失株的筛选 | 第20-21页 |
3.1.3 酿酒酵母单基因缺失株对MEHP敏感程度的表型分析 | 第21-28页 |
3.2 对MEHP敏感的酿酒酵母单基因缺失株的胞内MEHP含量的测定 | 第28-33页 |
3.2.1 缺失导致胞内MEHP含量显著高于野生型四倍的基因功能分析 | 第30-31页 |
3.2.2 缺失后导致胞内MEHP含量与野生型相比无显著性差异的基因功能分析 | 第31-32页 |
3.2.3 缺失致导致胞内MEHP含量显著低于野生型三倍的基因功能分析 | 第32-33页 |
3.3 MEHP敏感性与麦角固醇生物合成关系的探究 | 第33-36页 |
3.3.1 erg敏感表型的抑制 | 第33-34页 |
3.3.2 96株MEHP敏感基因缺失株细胞麦角固醇含量的测定与分析 | 第34-36页 |
3.4 MEHP敏感性与钙离子/钙调磷酸酯酶途径关系的探究 | 第36-38页 |
3.4.1 MEHP敏感缺失株的钙离子表型验证 | 第36-37页 |
3.4.2 MEHP对钙离子/钙调磷酸酯酶途径相关基因转录水平的影响 | 第37-38页 |
主要结论与展望 | 第38-39页 |
主要结论 | 第38页 |
展望 | 第38-39页 |
致谢 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-44页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第44页 |