摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
前言 | 第12-21页 |
参考文献 | 第18-21页 |
第一部分 液相色谱联合基质辅助激光解吸/电离串联飞行时间质谱对RA患者滑膜液瓜氨酸化肽的鉴定分析 | 第21-44页 |
1. 实验材料 | 第21-25页 |
1.1 标本来源 | 第21-22页 |
1.2 排除标准 | 第22页 |
1.3 实验试剂 | 第22-24页 |
1.4 实验仪器 | 第24-25页 |
2. 实验方法 | 第25-29页 |
2.1 滑膜液白蛋白和IgG去除 | 第25页 |
2.2 免疫沉淀 | 第25-26页 |
2.3 BCA蛋白定量 | 第26页 |
2.4 Western blotting | 第26-28页 |
2.5 瓜氨酸化蛋白的降解、烷化及酶解 | 第28页 |
2.6 nano2D-HPLC | 第28-29页 |
2.7 MALDI-TOF/TOF MS分析 | 第29页 |
2.8 生物信息学分析 | 第29页 |
3. 实验结果 | 第29-39页 |
3.1 免疫沉淀结果 | 第29-30页 |
3.2 质谱鉴定结果 | 第30-36页 |
3.4 生物信息学分析 | 第36-39页 |
4. 讨论 | 第39-41页 |
5. 小结 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-44页 |
第二部分 瓜氨酸化抗原的验证 | 第44-55页 |
1. 实验材料 | 第44-46页 |
1.1 标本来源 | 第44-45页 |
1.2 排除标准 | 第45页 |
1.3 实验试剂 | 第45页 |
1.4 实验仪器 | 第45-46页 |
2. 实验方法 | 第46-48页 |
2.1 SFs白蛋白和IgG去除 | 第46页 |
2.2 BCA蛋白定量 | 第46页 |
2.3 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第46页 |
2.4 考马斯亮蓝染色 | 第46-47页 |
2.5 MALDI-TOF/TOF MS分析 | 第47页 |
2.6 Western blotting | 第47-48页 |
3. 实验结果 | 第48-51页 |
3.1 考马斯亮蓝染色结果 | 第48页 |
3.2 Western blotting结果(一抗为兔抗人瓜氨酸化蛋白抗体) | 第48-49页 |
3.3 质谱分析结果 | 第49-50页 |
3.4 Western blotting结果(一抗为兔抗LRG1抗体、兔抗macroH2A.1抗体、兔抗KNG抗体) | 第50-51页 |
4. 讨论 | 第51-53页 |
5. 小结 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-55页 |
全文总结 | 第55-56页 |
综述 | 第56-68页 |
参考文献 | 第63-68页 |
附录A 缩略词表 | 第68-69页 |
附录B 攻读硕士学位期间发表论文 | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |