| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-23页 |
| 1.1 植物器官离体再生研究 | 第11-15页 |
| 1.1.1 植物细胞的全能性假说 | 第11页 |
| 1.1.2 植物的离体再生过程 | 第11-12页 |
| 1.1.3 植物胚胎的发育过程 | 第12页 |
| 1.1.4 植物胚胎发育的分子调控 | 第12-15页 |
| 1.2 再生相关基因的研究进展 | 第15页 |
| 1.3 转录因子的分类和功能 | 第15-19页 |
| 1.3.1 B3转录因子超家族 | 第16-17页 |
| 1.3.2 B3结构域的结构与分类 | 第17-19页 |
| 1.3.3 B3转录因子超家族在植物中的功能 | 第19页 |
| 1.4 LEC基因的研究概况 | 第19-21页 |
| 1.4.1 LEC基因的发现 | 第19-20页 |
| 1.4.2 LEC基因的功能 | 第20-21页 |
| 1.5 研究的目的与意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-40页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 菌种及载体 | 第23页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-40页 |
| 2.2.1 大豆GmLEC2基因的克隆 | 第23-26页 |
| 2.2.2 GmLEC2基因的生物信息学分析 | 第26-27页 |
| 2.2.3 亚细胞定位载体的构建 | 第27-30页 |
| 2.2.4 原生质体的制备及亚细胞定位反应 | 第30-31页 |
| 2.2.5 IPTG对GmLEC2蛋白的诱导表达 | 第31-33页 |
| 2.2.6 GmLEC2基因的组织特异性表达 | 第33页 |
| 2.2.7 Gateway植物表达载体的构建 | 第33-35页 |
| 2.2.8 GmLEC2基因的拟南芥遗传转化 | 第35页 |
| 2.2.9 拟南芥转基因植株的检测及表型分析 | 第35-36页 |
| 2.2.10 GmLEC2基因大豆的过表达 | 第36-38页 |
| 2.2.11 大豆过表达植株的检测 | 第38-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-59页 |
| 3.1 大豆GmLEC2基因的克隆 | 第40-41页 |
| 3.2 GmLEC2基因的生物信息学分析 | 第41-47页 |
| 3.2.1 启动子元件的预测 | 第42-43页 |
| 3.2.2 编码蛋白的组分和理化性质的分析 | 第43-44页 |
| 3.2.3 信号肽、跨膜结构及亚细胞定位的预测 | 第44页 |
| 3.2.4 编码蛋白质的二级结构分析 | 第44-45页 |
| 3.2.5 编码蛋白质的三级结构分析 | 第45-46页 |
| 3.2.6 蛋白功能预测与结构域分析 | 第46-47页 |
| 3.3 GmLEC2基因的亚细胞定位结果分析 | 第47-49页 |
| 3.4 IPTG诱导蛋白表达分析 | 第49-51页 |
| 3.5 大豆GmLEC2的组织特异性表达分析 | 第51页 |
| 3.6 Gateway植物表达载体的构建 | 第51-55页 |
| 3.6.1 Gateway入门载体的酶切、连接及转化 | 第53页 |
| 3.6.2 连接产物的鉴定及基因序列的获得 | 第53页 |
| 3.6.3 入门载体与表达载体的连接及转化大肠杆菌的鉴定 | 第53-54页 |
| 3.6.4 转化农杆菌及鉴定 | 第54-55页 |
| 3.7 GmLEC2基因的拟南芥遗传转化及检测 | 第55-57页 |
| 3.7.1 拟南芥的转化 | 第55页 |
| 3.7.2 转基因植株的鉴定及表型分析 | 第55-57页 |
| 3.8 GmLEC2基因的大豆过表达及检测 | 第57-59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| 4.1 目的基因的选择 | 第59页 |
| 4.2 GmLEC2基因的生物信息学分析 | 第59页 |
| 4.3 转基因拟南芥的检测 | 第59页 |
| 4.4 组织特异性表达分析 | 第59-60页 |
| 4.5 拟南芥转基因植株的表型分析 | 第60页 |
| 4.6 大豆遗传转化影响因素的探讨 | 第60-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第71页 |