| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第11-22页 |
| 1.1 艾滋病简介 | 第11-14页 |
| 1.1.1 艾滋病的现状 | 第11页 |
| 1.1.2 HIV-1 病毒概况 | 第11-12页 |
| 1.1.3 HIV-1 病毒生活周期以及致病机制 | 第12-13页 |
| 1.1.4 HIV-1 在细胞内的逃逸机制 | 第13-14页 |
| 1.2 HIV-1 主要抗原表位 | 第14-16页 |
| 1.2.1 gp120 | 第14页 |
| 1.2.2 gp41 | 第14-16页 |
| 1.3 HIV-1 疫苗研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4 豚鼠动物模型 | 第17页 |
| 1.5 酵母表面展示技术 | 第17-19页 |
| 1.6 流式细胞术的应用及优势 | 第19页 |
| 1.7 立题依据及设计 | 第19-22页 |
| 第二章 重组质粒构建以及酵母细胞表达检测 | 第22-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-28页 |
| 2.1.1 仪器 | 第22页 |
| 2.1.2 常用试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.3 载体与质粒 | 第23页 |
| 2.1.4 溶液配制 | 第23-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-33页 |
| 2.2.1 序列设计 | 第28-29页 |
| 2.2.2 PCR 合成目的片段 | 第29-30页 |
| 2.2.3 重组p-EASY克隆载体的构建 | 第30-31页 |
| 2.2.4 重组pCTCON2载体的构建 | 第31-32页 |
| 2.2.5 质粒电转酵母细胞以及鉴定方法 | 第32页 |
| 2.2.6 酵母细胞表达以及检测方法 | 第32-33页 |
| 2.3 实验结果 | 第33-38页 |
| 2.3.1 PCR扩增目的片段结果 | 第33-34页 |
| 2.3.2 重组p-EASY结果 | 第34-35页 |
| 2.3.3 重组pCTCON2载体的构建结果 | 第35-36页 |
| 2.3.4 重组pCTCON2表达载体电转酵母结果 | 第36页 |
| 2.3.5 酵母细胞表达以及检测结果 | 第36-38页 |
| 2.4 本章小结 | 第38-39页 |
| 第三章 利用易错PCR构建插入序列的突变文库 | 第39-43页 |
| 3.1 实验材料 | 第39页 |
| 3.1.1 仪器 | 第39页 |
| 3.1.2 常用试剂 | 第39页 |
| 3.1.3 载体与质粒 | 第39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-41页 |
| 3.2.1 随机突变引物设计 | 第39页 |
| 3.2.2 利用随机突变试剂盒建酵母突变文库 | 第39-41页 |
| 3.3 实验结果 | 第41-42页 |
| 3.3.1 利用随机突变建酵母突变文库结果 | 第41-42页 |
| 3.4 本章小结 | 第42-43页 |
| 第四章 用FACS分析分选与中和广谱抗体结合力强的抗原 | 第43-49页 |
| 4.1 实验材料 | 第43页 |
| 4.1.1 仪器 | 第43页 |
| 4.1.2 常用试剂 | 第43页 |
| 4.1.3 溶液配制 | 第43页 |
| 4.2 实验方法 | 第43-45页 |
| 4.2.1 将突变库质粒电转导入酵母细胞 | 第43-44页 |
| 4.2.2 流式分选与中和广谱抗体结合力强的抗原 | 第44-45页 |
| 4.2.3 分析筛选出的抗原与原始抗原位点上的异同 | 第45页 |
| 4.3 实验结果 | 第45-48页 |
| 4.3.1 流式细胞仪分选与 2F5/4E10抗体结合力高的酵母细胞群 | 第45-46页 |
| 4.3.2 筛选与抗体 2F5/4E10的结合力强的单个酵母细胞 | 第46-47页 |
| 4.3.3 分析筛选出的抗原与原始抗原位点上的异同 | 第47-48页 |
| 4.4 本章小结 | 第48-49页 |
| 第五章 对筛选出的抗原免疫原性的表征 | 第49-54页 |
| 5.1 实验材料 | 第49-50页 |
| 5.1.1 主要试剂 | 第49-50页 |
| 5.1.2 多肽 | 第50页 |
| 5.1.3 实验动物 | 第50页 |
| 5.2 实验方法 | 第50-51页 |
| 5.2.1 验证多肽免疫原表位正确性 | 第50页 |
| 5.2.2 免疫动物策略 | 第50-51页 |
| 5.2.3 动物采血 | 第51页 |
| 5.2.4 ELISA检测 | 第51页 |
| 5.3 实验结果 | 第51-53页 |
| 5.3.1 验证多肽免疫原表位正确性结果 | 第51-52页 |
| 5.3.2 ELISA检测免疫原免疫豚鼠血清中特异性IgG的水平 | 第52-53页 |
| 5.4 本章小结 | 第53-54页 |
| 第六章 结论 | 第54-56页 |
| 6.1 讨论 | 第54页 |
| 6.2 结论 | 第54-55页 |
| 6.3 创新点与展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
