符号说明 | 第4-9页 |
中文摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-23页 |
1.1 干旱胁迫对植物的影响 | 第12-16页 |
1.1.1 干旱对植物生长发育的影响 | 第13页 |
1.1.2 干旱胁迫破坏细胞膜的结构与功能 | 第13-14页 |
1.1.3 干旱对叶绿体结构的损伤 | 第14-15页 |
1.1.4 干旱对叶绿体光合功能的影晌 | 第15页 |
1.1.5 干旱胁迫下产生大量ROS | 第15-16页 |
1.2 植物对干旱胁迫的适应机制 | 第16-19页 |
1.2.1 植物通过渗透调节适应干旱胁迫 | 第16-18页 |
1.2.2 细胞内ROS的及时清除 | 第18-19页 |
1.3 植物AsA的功能、合成及再生 | 第19-22页 |
1.3.1 As A的生物功能 | 第19-20页 |
1.3.2 As A的生物合成 | 第20-21页 |
1.3.3 As A的再生 | 第21页 |
1.3.4 单脱氢抗坏血酸还原酶(MDAR)研究进展 | 第21-22页 |
1.4 本研究的目的及意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-32页 |
2.1 实验材料与处理 | 第23页 |
2.1.1 实验材料 | 第23页 |
2.1.2 材料培养 | 第23页 |
2.1.3 材料处理 | 第23页 |
2.1.4 MS培养基的配置 | 第23页 |
2.2 SlMDAR表达的荧光定量PCR分析 | 第23-25页 |
2.2.1 引物合成 | 第23-24页 |
2.2.2 植物总RNA的提取 | 第24-25页 |
2.2.3 cDNA第一条链的合成 | 第25页 |
2.2.4 实时定量荧光PCR | 第25页 |
2.3 转基因番茄植株的PCR检测 | 第25-27页 |
2.3.1 PCR引物 | 第25-26页 |
2.3.2 植物基因组DNA的提取 | 第26页 |
2.3.3 转基因番茄植株的PCR筛选 | 第26-27页 |
2.4 转基因番茄植株的qRT-PCR检测 | 第27页 |
2.5 转基因番茄植株的Western检测 | 第27-29页 |
2.5.1 植物总蛋白的提取 | 第27页 |
2.5.2 转膜 | 第27-28页 |
2.5.3 免疫检测 | 第28-29页 |
2.6 MDAR酶活性的测定 | 第29页 |
2.7 As A和DHA含量的测定 | 第29页 |
2.8 电解质外渗量的测定与膜脂过氧化程度的分析 | 第29-30页 |
2.9 DAB和NBT染色分析 | 第30页 |
2.10 O_2·?与H_2O_2的测定 | 第30-31页 |
2.11 APX和SOD酶活性的测定 | 第31页 |
2.12 光合气体交换参数的测定 | 第31页 |
2.13 叶绿素荧光参数测定 | 第31-32页 |
2.14 D1蛋白含量的检测 | 第32页 |
3 结果与分析 | 第32-40页 |
3.1 转反义基因番茄植株抑制SlMDAR表达的验证 | 第32页 |
3.2 PEG模拟干旱处理诱导SlMDAR的表达 | 第32-34页 |
3.3 转基因番茄MDAR酶活性和AsA含量对反义抑制SlMDAR表达的响应 | 第34页 |
3.4 反义抑制SlMDAR的表达对转基因番茄抗旱性的影响 | 第34-35页 |
3.5 反义抑制SlMDAR的表达影响转基因番茄抗旱性的机理分析 | 第35-40页 |
3.5.1 反义抑制SlMDAR的表达对干旱胁迫下转基因番茄生物膜稳定性的影响 | 第35-36页 |
3.5.2 反义抑制SlMDAR的表达对干旱胁迫下转基因番茄活性氧积累的影响 | 第36-38页 |
3.5.3 反义抑制SlMDAR的表达对干旱胁迫下转基因番茄株系光合能力的影响 | 第38页 |
3.5.4 反义抑制SlMDAR的表达对干旱胁迫下转基因番茄株系D1蛋白含量的影响 | 第38-40页 |
4 讨论 | 第40-44页 |
4.1 反义抑制SLMDAR的表达降低了转基因番茄的AsA水平 | 第40-41页 |
4.2 反义抑制SlMDAR的表达增加了转基因番茄对干旱的敏感性 | 第41-44页 |
4.2.1 反义抑制SlMDAR的表达加剧了干旱胁迫下转基因番茄生物膜系统的损伤 | 第41-42页 |
4.2.2 反义抑制SlMDAR的表达加剧了干旱胁迫下转基因番茄中ROS的积累 | 第42页 |
4.2.3 反义抑制SlMDAR的表达降低了干旱胁迫下转基因番茄的光合能力 | 第42-44页 |
5 结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第55页 |