| 摘要 | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-17页 |
| 1 植物液泡膜~H+-PPase基因的研究进展 | 第9-12页 |
| 1.1 液泡膜H~+-PPase的分布与类型 | 第9页 |
| 1.2 液泡膜H~+-PPase的拓扑结构及其特性 | 第9-10页 |
| 1.3 液泡膜H~+-PPase的主要功能 | 第10-11页 |
| 1.3.1 质子泵功能 | 第10页 |
| 1.3.2 Pi的再循环和PPi中自由能的利用 | 第10页 |
| 1.3.3 离子区域化功能 | 第10-11页 |
| 1.3.4 控制植物生长素的运输 | 第11页 |
| 1.4 液泡膜H~+-PPase与植物耐盐性的关系 | 第11-12页 |
| 1.4.1 盐胁迫下液泡膜H~+-PPase的活性 | 第11-12页 |
| 1.4.2 液泡膜H~+-PPase的过量表达增强植物的耐盐性 | 第12页 |
| 2 马蔺研究进展 | 第12-14页 |
| 2.1 马蔺抗旱性、耐盐性、耐重金属特性的研究 | 第12-13页 |
| 2.1.1 马蔺耐盐性研究 | 第12-13页 |
| 2.1.2 马蔺抗旱性研究 | 第13页 |
| 2.1.3 马蔺耐重金属特性研究 | 第13页 |
| 2.2 马蔺遗传多样性分析 | 第13-14页 |
| 2.3 马蔺在园林中的应用研究 | 第14页 |
| 2.3.1 马蔺在城市园林景观绿地建设中应用 | 第14页 |
| 2.3.2 马蔺在荒漠化治理工程中的应用 | 第14页 |
| 3 研究目的与意义 | 第14-16页 |
| 4 技术路线图 | 第16-17页 |
| 第二章 马蔺IlVP基因克隆、表达水平分析 | 第17-39页 |
| 1 实验材料 | 第17页 |
| 1.1 实验材料 | 第17页 |
| 1.2 主要试剂 | 第17页 |
| 2 实验方法 | 第17-27页 |
| 2.1 实验材料培养 | 第17-18页 |
| 2.2 马蔺IlVP基因核心片段的克隆 | 第18-21页 |
| 2.2.1 马蔺根中的总RNA提取 | 第18页 |
| 2.2.2 凝胶电泳检测RNA | 第18页 |
| 2.2.3 cDNA合成 | 第18-19页 |
| 2.2.4 马蔺IlVP基因核心片段的扩增 | 第19-20页 |
| 2.2.5 核心片段PCR产物胶回收 | 第20页 |
| 2.2.6 马蔺IlVP核心片段克隆 | 第20-21页 |
| 2.3 马蔺IlVP基因3'序列扩增 | 第21-23页 |
| 2.4 马蔺IlVP基因5'端序列扩增 | 第23-25页 |
| 2.5 马蔺IlVP全长序列的获得 | 第25-26页 |
| 2.6 IlVP基因表达模式分析 | 第26-27页 |
| 3 实验结果与分析 | 第27-37页 |
| 3.1 马蔺总RNA提取 | 第27页 |
| 3.2 马蔺IlVP基因核心片段扩增结果 | 第27-28页 |
| 3.3 马蔺IlVP基因3'RACE扩增结果 | 第28-29页 |
| 3.4 马蔺IlVP基因5'RACE扩增结果 | 第29-30页 |
| 3.5 马蔺IlVP基因全长序列分析 | 第30-32页 |
| 3.6 马蔺IlVP结构及多重比较分析 | 第32-36页 |
| 3.7 马蔺IlVP表达模式分析 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 植物表达载体构建及遗传转化 | 第39-49页 |
| 1 实验材料 | 第39-40页 |
| 1.1 植物材料 | 第39页 |
| 1.2 酶与试剂 | 第39-40页 |
| 2 实验方法 | 第40-44页 |
| 2.1 马蔺IlVP基因线性片段的获得 | 第40页 |
| 2.1.1 提取质粒 | 第40页 |
| 2.1.2 马蔺IlVP质粒双酶切 | 第40页 |
| 2.2 pBI121载体线性片段获得 | 第40-41页 |
| 2.2.1 pBI121转化大肠杆菌 | 第40-41页 |
| 2.2.2 提取pBI121质粒 | 第41页 |
| 2.3 重组载体获得 | 第41页 |
| 2.4 重组载体pBI121-35S-IlVP-Nos的转化 | 第41-42页 |
| 2.5 烟草的培养 | 第42页 |
| 2.6 农杆菌EHA105感受态细胞的制备与转化 | 第42页 |
| 2.6.1 制备农杆菌EHA105感受态细胞 | 第42页 |
| 2.6.2 农杆菌的转化 | 第42页 |
| 2.6.3 阳性克隆鉴定 | 第42页 |
| 2.7 对烟草的转化与筛选 | 第42-44页 |
| 2.7.1 对烟草的转化 | 第42-43页 |
| 2.7.2 PCR检测阳性植株 | 第43-44页 |
| 2.8 炼苗 | 第44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-48页 |
| 3.1 马蔺IlVP基因线性片段获得 | 第44-45页 |
| 3.2 获得pBI121载体片段 | 第45页 |
| 3.3 pBI121-35S-IlVP-Nos重组载体获得 | 第45-46页 |
| 3.4 烟草转化 | 第46-47页 |
| 3.5 PCR检测阳性植株 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-49页 |
| 第四章 转基因烟草Northern、Southern杂交验证及耐盐性检测 | 第49-61页 |
| 1 实验材料 | 第49页 |
| 1.1 植物材料 | 第49页 |
| 1.2 实验试剂 | 第49页 |
| 2 实验方法 | 第49-53页 |
| 2.1 Northern及Southern杂交验证 | 第49-52页 |
| 2.1.1 Northern杂交 | 第49-51页 |
| 2.1.2 Southern检测 | 第51-52页 |
| 2.2 转基因烟草耐盐性检测 | 第52-53页 |
| 2.2.1 转基因烟草的培养 | 第52页 |
| 2.2.2 转基因烟草耐盐性检测 | 第52-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-59页 |
| 3.1 Northern及Southern杂交验证 | 第53-54页 |
| 3.1.1 Northern杂交 | 第53页 |
| 3.1.2 Southern检测 | 第53-54页 |
| 3.2 转基因烟草耐盐性评价 | 第54页 |
| 3.3 根、茎、叶的鲜重及干重 | 第54-55页 |
| 3.4 叶面积 | 第55-56页 |
| 3.5 叶片相对含水量 | 第56-57页 |
| 3.6 叶片质膜透性(相对电导率) | 第57页 |
| 3.7 Na~+、K~+、Ca~(2+)含量 | 第57-58页 |
| 3.8 叶片水分利用效率 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| 第五章 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| Abstract | 第66-68页 |
| 附录1 | 第69-70页 |
| 附录2 | 第70-71页 |
| 附录3 | 第71-72页 |
| 附录4 | 第72-73页 |
| 附录5 | 第73-74页 |
| 附录6 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
