摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-24页 |
1. 海豚链球菌 | 第16页 |
2 鱼类疫苗的发展及种类 | 第16-18页 |
·灭活疫苗 | 第17页 |
·减毒活疫苗 | 第17页 |
·单位疫苗 | 第17-18页 |
·DNA疫苗 | 第18页 |
3 鱼类疫苗免疫佐剂的研究现状 | 第18-22页 |
·鱼类细胞因子佐剂 | 第19-20页 |
·白细胞介素-8(IL-8)佐剂研究进展 | 第20-21页 |
·鱼类IL-8研究概况 | 第21-22页 |
4 斑点叉尾鮰的简介 | 第22-23页 |
5 研究目的与意义 | 第23-24页 |
第二章 斑点叉尾鮰IL-8基因的克隆及分子特性分析 | 第24-40页 |
1 材料 | 第24-25页 |
·试验动物 | 第24页 |
·菌株与质粒 | 第24页 |
·主要试剂和仪器 | 第24-25页 |
2 方法 | 第25-31页 |
·引物的设计与合成 | 第25页 |
·斑点叉尾鮰脾脏总RNA的提取 | 第25-26页 |
·斑点叉尾鮰IL-8基因的扩增 | 第26-28页 |
·IL-8的克隆与测序 | 第28-30页 |
·IL-8的分子特性分析 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-37页 |
·斑点叉尾鮰IL-8基因的PCR扩增 | 第31-32页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第32页 |
·核酸序列特征分析 | 第32-33页 |
·氨基酸序列特征分析 | 第33-37页 |
4 讨论 | 第37-40页 |
·斑点叉尾鮰IL-8基因的可变转录本 | 第37-38页 |
·斑点叉尾鮰IL-8的进化地位 | 第38-40页 |
第三章 斑点叉尾鮰IL-8成熟肽基因的原核表达及其对海豚链球菌亚单位疫苗免疫斑点叉尾鮰佐剂效应研究 | 第40-64页 |
1 试验材料 | 第40-41页 |
·试验动物 | 第40页 |
·疫苗、质粒和菌株 | 第40页 |
·主要试剂和仪器 | 第40-41页 |
2 试验方法 | 第41-51页 |
·斑点叉尾鮰IL-8成熟肽基因原核表达载体的构建 | 第41-44页 |
·重组蛋白的表达 | 第44-45页 |
·重组蛋白的制备与纯化 | 第45-46页 |
·单位疫苗和蛋白佐剂的制备 | 第46-47页 |
·免疫 | 第47页 |
·采血 | 第47页 |
·免疫指标检测 | 第47-51页 |
·攻毒试验 | 第51页 |
·数据分析 | 第51页 |
3 结果与分析 | 第51-60页 |
·斑点叉尾鮰IL-8成熟肽基因的克隆 | 第51-52页 |
·斑点叉尾鮰IL-8成熟肽基因原核表达载体的构建 | 第52-53页 |
·重组mCcIL-8蛋白的原核表达 | 第53-56页 |
·重组mCcIL-8蛋白佐剂效果的评价 | 第56-60页 |
4 讨论 | 第60-64页 |
·点叉尾鮰IL-8成熟肽基因的原核表达 | 第60-61页 |
·重组mCcIL-8蛋白佐剂效应评价 | 第61-64页 |
第四章 斑点叉尾鮰IL-8真核表达载体的构建及其对海豚链球菌DNA疫苗免疫斑点叉尾鮰佐剂效应研究 | 第64-80页 |
1 试验材料 | 第64-65页 |
·试验动物 | 第64页 |
·菌种、质粒和毒株 | 第64-65页 |
·主要试剂和仪器 | 第65页 |
2 试验方法 | 第65-71页 |
·斑点叉尾鮰IL-8真核表达质粒的构建 | 第65-68页 |
·基因佐剂和海豚链球菌DNA疫苗的大量制备 | 第68-69页 |
·免疫 | 第69页 |
·采血 | 第69-70页 |
·MCcIL-8蛋白在斑点叉尾鮰肌肉中的表达 | 第70-71页 |
·免疫指标检测 | 第71页 |
·攻毒 | 第71页 |
·数据分析 | 第71页 |
3 结果和分析 | 第71-78页 |
·斑点叉尾鮰IL-8真核表达质粒的构建 | 第71-72页 |
·MCcIL-8蛋白在斑点叉尾鮰肌肉中的表达 | 第72-73页 |
·pc-MCcIL-8佐剂效应的评价 | 第73-78页 |
4 讨论 | 第78-80页 |
·pc-MCcIL-8基因佐剂配合DNA疫苗使用的免疫保护力分析 | 第78页 |
·关于斑点叉尾鮰IL-8的免疫佐剂机制的探究 | 第78-80页 |
第五章 结论 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
附录 | 第89-92页 |
攻读硕士期间发表的学术论文目录 | 第92页 |