| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-27页 |
| ·RNA干扰技术 | 第13-16页 |
| ·RNA干扰技术起源及其基因沉默机制 | 第13-15页 |
| ·基于RNA干扰技术的RNA种类及其异同 | 第15-16页 |
| ·微小RNA(microRNA) | 第16-18页 |
| ·miRNA起源、功能和机制 | 第16-17页 |
| ·应用 | 第17-18页 |
| ·miRNA和siRNA纳米载体的研究进展 | 第18-23页 |
| ·脂质和脂质体投递系统 | 第20页 |
| ·阳离子聚合物投递系统 | 第20-21页 |
| ·细胞穿透肽投递系统 | 第21页 |
| ·无机纳米粒子投递系统 | 第21-23页 |
| ·金纳米粒子 | 第21-22页 |
| ·介孔硅纳米粒子 | 第22-23页 |
| ·单臂碳纳米管 | 第23页 |
| ·肿瘤治疗的多靶点联合用药 | 第23-24页 |
| ·本课题的研究目的与选题意义 | 第24-27页 |
| 第二章 微小RNA纳米胶囊的设计、制备及体内抑制肿瘤研究 | 第27-61页 |
| ·前言 | 第27-28页 |
| ·实验部分 | 第28-40页 |
| ·主要原料与试剂 | 第28-29页 |
| ·miRNA及其序列 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29-30页 |
| ·细胞培养 | 第30页 |
| ·实验动物 | 第30页 |
| ·miRNA纳米胶囊制备 | 第30-31页 |
| ·Lipofectamine/miRNA复合物制备 | 第31页 |
| ·纳米胶囊的琼脂糖凝胶电泳表征 | 第31-32页 |
| ·纳米胶囊的透射电镜表征 | 第32页 |
| ·纳米胶囊的粒径和电位表征 | 第32页 |
| ·miRNA纳米胶囊的体外稳定性测试 | 第32页 |
| ·纳米胶囊降解动力学检测 | 第32-33页 |
| ·凝胶电泳检测miRNA从纳米胶囊中的释放 | 第33页 |
| ·X射线光电子能谱测试 | 第33页 |
| ·傅里叶变换红外光谱测试 | 第33页 |
| ·纳米胶囊细胞毒性测试 | 第33-34页 |
| ·荧光共聚焦检测纳米胶囊的细胞内吞 | 第34页 |
| ·流式细胞仪检测细胞内吞效率 | 第34-35页 |
| ·荧光定量PCR测试 | 第35页 |
| ·蛋白印迹(Western blot)检测蛋白表达 | 第35-37页 |
| ·酶联免疫测定技术(ELISA)检测VEGF表达 | 第37页 |
| ·荷载U87皮下肿瘤的裸鼠动物模型制作 | 第37页 |
| ·原位注射治疗裸鼠U87皮下肿瘤及组织学评价 | 第37-39页 |
| ·统计分析方法 | 第39-40页 |
| ·实验结果与讨论 | 第40-60页 |
| ·实验原理及实现过程 | 第40-41页 |
| ·AS-miR-21纳米胶囊的制备 | 第41-45页 |
| ·体外稳定性 | 第45-47页 |
| ·降解及miRNA释放 | 第47-49页 |
| ·纳米胶囊的细胞毒性 | 第49-50页 |
| ·细胞内吞 | 第50-52页 |
| ·纳米胶囊投递miRNA后的细胞内活性 | 第52-56页 |
| ·纳米胶囊投递miRNA后的体内活性 | 第56-60页 |
| ·本章小结 | 第60-61页 |
| 第三章 微小RNA纳米胶囊的设计、制备及体内治疗急性脑缺血研究 | 第61-111页 |
| ·前言 | 第61-62页 |
| ·实验部分 | 第62-78页 |
| ·miRNA及其序列 | 第62-63页 |
| ·主要原料与试剂 | 第63-64页 |
| ·主要实验仪器 | 第64-65页 |
| ·细胞系和细胞培养 | 第65页 |
| ·实验动物 | 第65页 |
| ·PEG化miRNA纳米胶囊和不含PEG的纳米胶囊的制备 | 第65-67页 |
| ·Cy5.5标记的miRNA纳米胶囊的制备 | 第67页 |
| ·Lipofectamine/miRNA复合物制备 | 第67页 |
| ·微小RNA纳米胶囊琼脂糖凝胶电泳表征 | 第67-68页 |
| ·微小RNA纳米胶囊的透射电镜表征 | 第68页 |
| ·微小RNA纳米胶囊的粒径和电位表征 | 第68页 |
| ·miRNA纳米胶囊的稳定性评价 | 第68-69页 |
| ·miRNA纳米胶囊在PBS缓冲液中的稳定性 | 第68页 |
| ·miRNA纳米胶囊的肝素稳定性表征 | 第68页 |
| ·miRNA纳米胶囊的RNA酶稳定性表征 | 第68-69页 |
| ·miRNA纳米胶囊的血清稳定性表征 | 第69页 |
| ·纳米胶囊降解动力学以及miRNA的释放 | 第69页 |
| ·miRNA纳米胶囊蛋白吸附测试 | 第69页 |
| ·miRNA纳米胶囊的降解动力学表征 | 第69页 |
| ·miRNA纳米胶囊的毒性测试 | 第69-70页 |
| ·miRNA纳米胶囊体外释放表征 | 第70页 |
| ·miRNA纳米胶囊的细胞内吞 | 第70-71页 |
| ·流式细胞仪检测细胞内吞效率 | 第71页 |
| ·荧光定量PCR测试 | 第71页 |
| ·蛋白印迹检测蛋白表达 | 第71-72页 |
| ·大鼠缺血模型的建立 | 第72-73页 |
| ·缺血大鼠模型评价标准 | 第73-74页 |
| ·小动物活体成像检测miRNA纳米胶囊在缺血大鼠模型的体内分布 | 第74页 |
| ·小动物活体成像检测不同给药方式和剂量对miRNA纳米胶囊在缺血大鼠模型的脑内分布影响 | 第74-75页 |
| ·荧光定量PCR检测模型鼠脑内成熟miRNA的表达 | 第75页 |
| ·大鼠脑缺血治疗评价 | 第75-76页 |
| ·实验分组及治疗过程 | 第75页 |
| ·神经功能评分 | 第75页 |
| ·梗死体积评价 | 第75-76页 |
| ·组织学检测 | 第76-78页 |
| ·HE染色 | 第76-77页 |
| ·原位杂交检测 | 第77页 |
| ·免疫组化检测 | 第77页 |
| ·原位末端转移酶标记(TUNEL) | 第77-78页 |
| ·统计分析方法 | 第78页 |
| ·实验结果与讨论 | 第78-110页 |
| ·实验原理及实现过程 | 第78-79页 |
| ·PEG化miR-21纳米胶囊的制备 | 第79-83页 |
| ·PEG密度对纳米胶囊的性质影响 | 第83-84页 |
| ·体外稳定性表征 | 第84-87页 |
| ·降解及miRNA释放表征 | 第87-89页 |
| ·纳米胶囊的细胞毒性表征 | 第89-90页 |
| ·表面PEG密度对纳米胶囊的细胞内吞影响 | 第90-91页 |
| ·纳米胶囊的细胞内吞表征 | 第91-93页 |
| ·纳米胶囊投递miRNA后的细胞内活性测定 | 第93-96页 |
| ·大鼠脑缺血模型制作评价 | 第96-97页 |
| ·小动物活体成像检测纳米胶囊的体内分布 | 第97-100页 |
| ·纳米胶囊系统投递miRNA的效率 | 第100-103页 |
| ·纳米胶囊投递miR-21治疗大鼠脑缺血评价 | 第103-110页 |
| ·本章小结 | 第110-111页 |
| 第四章 微小RNA、化疗药和功能蛋白联合投递抑制肿瘤的体外研究 | 第111-141页 |
| ·前言 | 第111-112页 |
| ·实验部分 | 第112-121页 |
| ·主要原料与试剂 | 第112-113页 |
| ·主要仪器 | 第113页 |
| ·细胞培养 | 第113页 |
| ·RNA及其序列 | 第113-114页 |
| ·RNA载药能力测试 | 第114页 |
| ·RNA活性检测 | 第114页 |
| ·RNA纳米胶囊和载药RNA纳米胶囊的制备 | 第114-115页 |
| ·RNA纳米胶囊的琼脂糖凝胶电泳表征 | 第115-116页 |
| ·RNA纳米胶囊的肝素稳定性测试 | 第116页 |
| ·重组VHL氨基酸序列 | 第116页 |
| ·荧光标记BSA蛋白制备 | 第116页 |
| ·蛋白纳米胶囊制备 | 第116-117页 |
| ·BSA蛋白纳米胶囊制备 | 第116-117页 |
| ·VHL蛋白纳米胶囊制备 | 第117页 |
| ·BSA蛋白纳米胶囊的琼脂糖凝胶电泳表征 | 第117-118页 |
| ·纳米胶囊的透射电镜表征 | 第118页 |
| ·纳米胶囊的粒径和电位表征 | 第118页 |
| ·BSA蛋白纳米胶囊体外释放表征 | 第118页 |
| ·载药RNA纳米胶囊的细胞内吞效率 | 第118-119页 |
| ·MTT法检测载药RNA纳米胶囊对细胞增殖的抑制 | 第119页 |
| ·BSA蛋白纳米胶囊的细胞内吞效率 | 第119页 |
| ·蛋白印迹检测VHL蛋白纳米胶囊的活性 | 第119-120页 |
| ·联合投递后下游蛋白的影响 | 第120页 |
| ·蛋白印迹检测联合投递后下游蛋白的影响 | 第120页 |
| ·流式细胞术(FACS)检测细胞凋亡 | 第120页 |
| ·酶联免疫测定技术(ELISA)检测联合投递后VEGF表达 | 第120-121页 |
| ·实验结果与讨论 | 第121-140页 |
| ·RNA载药能力及活性测试 | 第121-124页 |
| ·载药RNA纳米胶囊的制备原理及实现过程 | 第124-125页 |
| ·载药RNA纳米胶囊的制备 | 第125-127页 |
| ·RNA纳米胶囊的体外稳定性表征 | 第127页 |
| ·载药RNA纳米胶囊的细胞内吞 | 第127-129页 |
| ·RNA纳米胶囊的细胞内活性测定 | 第129-130页 |
| ·蛋白纳米胶囊的制备原理及实现过程 | 第130-131页 |
| ·蛋白纳米胶囊制备 | 第131-133页 |
| ·蛋白纳米胶囊的体外释放 | 第133-134页 |
| ·蛋白纳米胶囊的细胞内吞 | 第134-135页 |
| ·蛋白纳米胶囊的细胞内活性测定 | 第135-137页 |
| ·RNA、DOX和VHL联合投递抑制肿瘤细胞生长 | 第137-140页 |
| ·本章小结 | 第140-141页 |
| 第五章 结论与展望 | 第141-143页 |
| ·结论 | 第141-142页 |
| ·展望 | 第142-143页 |
| 参考文献 | 第143-154页 |
| 缩略语/符号说明(Abbreviation) | 第154-155页 |
| 发表论文和科研情况说明 | 第155-158页 |
| 致谢 | 第158-159页 |
