| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 本文常用缩略词 | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-15页 |
| 材料和方法 | 第15-29页 |
| 一、材料 | 第15-19页 |
| 1.实验动物及质粒载体 | 第15页 |
| 2.主要仪器 | 第15-16页 |
| 3.主要试剂 | 第16-17页 |
| 4.主要试剂的配制 | 第17-19页 |
| 二、方法 | 第19-29页 |
| 第一部分 表达载体的构建 | 第19-23页 |
| 1. PCR扩増目的基因 | 第19-21页 |
| 2 酶切 | 第21-23页 |
| 第二部分 大鼠胚胎NSCs的分离培养及其鉴定 | 第23-24页 |
| 1.大鼠胚胎中脑组织的解剤分离 | 第23页 |
| 2.大鼠胚胎NSCs的分离 | 第23页 |
| 3.细胞计数与接种 | 第23页 |
| 4.大鼠化胎NSCs的培养 | 第23-24页 |
| 5.大鼠庙胎NSCs的鉴定 | 第24页 |
| 6.大鼠胚胎NSCs的体外诱导分化 | 第24页 |
| 第三部分 转染及结果检测 | 第24-29页 |
| 1.重组质粒转染NSCs | 第24-25页 |
| 2. Real-time PCR鉴定 | 第25-26页 |
| 3. Western blot | 第26-27页 |
| 4.免疫荧光细胞化学 | 第27-29页 |
| 结果 | 第29-41页 |
| 一、大鼠重组质粒表达载体pCDH-NuiTl的构建 | 第29-33页 |
| 1.重组质粒载体pCDH-Nun’l的鉴定 | 第29-33页 |
| 二、NSCs的培养及鉴定 | 第33-35页 |
| 1.原代培养及传代 | 第33-34页 |
| 2.分化培养 | 第34-35页 |
| 3.免疫细胞化学染色鉴定 | 第35页 |
| 三、重组质粒转染NSCs的效率检测 | 第35-36页 |
| 四、Western blot | 第36-37页 |
| 五、实时荧光定量PCR结果 | 第37-39页 |
| 六、细胞免疫荧光技术检测TH、DAT阳性细胞在各组中的表达情况 | 第39-41页 |
| 讨论 | 第41-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 综述 | 第49-58页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |