摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
第一章 前言 | 第9-19页 |
·动脉粥样硬化 | 第9页 |
·氧化固醇 | 第9-11页 |
·氧化固醇结合蛋白家族 | 第11-12页 |
·ORP4L的结构和功能 | 第12页 |
·Bcl-XL抗凋亡蛋白 | 第12-15页 |
·ORP4L与Ca~(2+)释放 | 第15-17页 |
·研究目的、意义与创新点 | 第17-19页 |
·研究目的 | 第17页 |
·研究意义和创新点 | 第17-19页 |
第二章 实验材料、实验仪器与试剂 | 第19-24页 |
·实验材料 | 第19-20页 |
·细胞和实验动物 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19-20页 |
·引物合成 | 第20页 |
·实验仪器 | 第20-21页 |
·主要试剂配制 | 第21-24页 |
·细胞培养相关试剂 | 第21页 |
·小鼠腹腔巨噬细胞分离相关试剂 | 第21页 |
·蛋白样品制备相关试剂 | 第21-22页 |
·SDS电泳相关试剂 | 第22页 |
·Western blotting所需试剂配制 | 第22-23页 |
·Ca~(2+)测定相关试剂 | 第23-24页 |
第三章 实验方法 | 第24-34页 |
·巨噬细胞Ca~(2+)信号检测相关实验 | 第24-28页 |
·从ORP4L-/-小鼠及野生型小鼠分离腹腔巨噬细胞 | 第24页 |
·小鼠腹腔巨噬细胞PLC活性的测定 | 第24-25页 |
·统计学处理方法 | 第25页 |
·小鼠腹腔巨噬细胞IP3活性的测定 | 第25-26页 |
·小鼠腹腔巨噬细胞Ca~(2+)浓度的检测 | 第26页 |
·Raw264.7 细胞的复苏 | 第26-27页 |
·Raw264.7 细胞的传代和冻存 | 第27页 |
·Raw264.7 细胞的转染 | 第27页 |
·RAW264.7 巨噬细胞PLC活性的测定 | 第27页 |
·RAW264.7 巨噬细胞IP3活性的测定 | 第27页 |
·RAW264.7 巨噬细胞Ca~(2+)活性的测定 | 第27-28页 |
·ORP4L调控Bcl-XL相关实验 | 第28-34页 |
·小鼠腹腔巨噬细胞的蛋白样品制备 | 第28页 |
·Western blotting分析 | 第28-29页 |
·提取RNA和逆转录 | 第29-31页 |
·实时定量PCR(real-time quantitative PCR) | 第31-32页 |
·流式细胞仪检测小鼠腹腔巨噬细胞的凋亡 | 第32页 |
·流式细胞仪检测Raw264.7 细胞的凋亡 | 第32-34页 |
第四章 实验结果及分析 | 第34-50页 |
·ORP4L在巨噬细胞中介导Ca~(2+)释放 | 第34-38页 |
·ORP4L沉默抑制PLC活性 | 第34页 |
·ORP4L 沉默对 IP3 产生的影响 | 第34-35页 |
·ORP4L 沉默影响 ER Ca~(2+)的释放 | 第35-36页 |
·过表达 ORP4L 对 PLC 活性的影响 | 第36-37页 |
·过表达ORP4L对IP3产生的影响 | 第37页 |
·过表达ORP4L对ER Ca~(2+)释放的影响 | 第37-38页 |
·ORP4L调控Bcl-XL蛋白表达 | 第38-41页 |
·ORP4L沉默对Bcl-XL蛋白的影响 | 第38-39页 |
·过表达ORP4L对Bcl-XL蛋白的影响 | 第39-40页 |
·RAW264.7 细胞中ORP4L对Bcl-XL蛋白的影响 | 第40-41页 |
·ORP4L调控Bcl-XL表达依赖钙离子信号通路 | 第41-44页 |
·离子霉素刺激条件的摸索 | 第41-42页 |
·离子霉素逆转ORP4L沉默对Bcl-XL的表达的下调 | 第42-44页 |
·ORP4L调控Bcl-XL表达依赖CREB | 第44-46页 |
·CREB抑制剂作用条件的摸索 | 第44-45页 |
·ORP4L通过Ca~(2+)依赖的CREB信号通路调控Bcl-XL | 第45-46页 |
·ORP4L通过介导Ca~(2+)释放调控Bcl-XL蛋白表达 | 第46-50页 |
·钙离子刺激剂对Bcl-XL表达的影响 | 第46-48页 |
·ORP4L调控巨噬细胞凋亡 | 第48-50页 |
第五章 讨论 | 第50-53页 |
参考文献 | 第53-60页 |
附录 | 第60-62页 |
致谢 | 第62页 |