| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 1 绪论 | 第12-21页 |
| ·前言 | 第12页 |
| ·Crc 在碳代谢途径中的作用方式及其研究现状 | 第12-15页 |
| ·Hfq的发现，特征及研究现状 | 第15-16页 |
| ·Crc与Hfq协同作用的研究现状 | 第16-17页 |
| ·立题依据及主要研究内容 | 第17-20页 |
| ·技术路线 | 第20-21页 |
| 2 施氏假单胞菌A1501中crc和hfq基因双突变株的构建及与野生型的生理生化表型对比鉴定 | 第21-41页 |
| ·材料和方法 | 第21-23页 |
| ·菌株和质粒 | 第21-22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·化学试剂 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-31页 |
| ·引物设计 | 第23-25页 |
| ·三亲本结合试验 | 第25-26页 |
| ·生长曲线的测定 | 第26页 |
| ·固氮酶活的测定 | 第26-27页 |
| ·ADP/ATP比值测定 | 第27页 |
| ·过氧化氢冲击 | 第27-28页 |
| ·趋化实验 | 第28页 |
| ·Biolog 分析野生型与突变株对碳源的利用情况 | 第28-29页 |
| ·RNA的提取 | 第29页 |
| ·cDNA链的合成 | 第29-30页 |
| ·荧光实时定量RT-PCR反应 | 第30-31页 |
| ·结果分析 | 第31-39页 |
| ·crc和hfq双突变株的构建 | 第31-32页 |
| ·crc和hfq同时突变对菌株生长能力的影响 | 第32页 |
| ·固氮酶活的测定 | 第32-33页 |
| ·hfq 和 crc 同时突变对固氮相关基因转录水平的影响 | 第33-34页 |
| ·ADP/ATP 比值测定 | 第34页 |
| ·Biolog 分析野生型以及突变株对不同碳源的利用情况 | 第34-36页 |
| ·逆境胁迫试验 | 第36-37页 |
| ·hfq和crc同时突变对氧化胁迫相关基因转录水平的影响 | 第37-38页 |
| ·趋化实验 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 3 Crc与Hfq在碳代谢途径中的相互作用功能研究 | 第41-54页 |
| ·材料 | 第41-43页 |
| ·菌株和质粒 | 第41页 |
| ·培养基 | 第41页 |
| ·化学试剂 | 第41-42页 |
| ·主要仪器 | 第42页 |
| ·常用溶液 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-46页 |
| ·生长曲线的测定 | 第43页 |
| ·RNA 的提取 | 第43-44页 |
| ·cDNA链的合成 | 第44页 |
| ·荧光实时定量PCR反应 | 第44-45页 |
| ·Hfq蛋白的表达纯化 | 第45-46页 |
| ·微量热泳动实验（MST） | 第46页 |
| ·结果与分析 | 第46-53页 |
| ·crc 和 hfq 双突变株在优势碳源条件下的生长曲线 | 第46-48页 |
| ·crc 和 hfq 双突变株与单突变株在非优势碳源及混合碳源条件下生长能力比较 | 第48-51页 |
| ·hfq 和 crc 同时突变对苯甲酸代谢相关基因转录水平的影响 | 第51-52页 |
| ·Hfq 蛋白纯化 | 第52页 |
| ·微量热泳动实验（MST）检测Hfq蛋白与体外靶标互作 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-68页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文和研究成果 | 第68-69页 |
| 附录 | 第69-70页 |
