摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-33页 |
1. 生发中心反应 | 第12-23页 |
·生发中心反应的起始 | 第12-15页 |
·生发中心反应的动力学 | 第15-19页 |
·生发中心反应的分子调控机制 | 第19-22页 |
·生发中心反应与B细胞淋巴癌 | 第22-23页 |
2. UHRF2蛋白的研究进展 | 第23-33页 |
·UHRF2的分子特征 | 第23-27页 |
·UHRF2在细胞调控中有重要作用 | 第27-29页 |
·UHRF2与疾病 | 第29-30页 |
·CRISPR-Cas9系统基因敲除技术构建UHRF2敲除小鼠 | 第30-31页 |
·小结 | 第31-33页 |
第二章 实验材料与方法 | 第33-51页 |
1. 实验材料 | 第33-39页 |
·临床样本及实验小鼠 | 第33页 |
·主要试剂 | 第33-34页 |
·主要仪器设备和耗材 | 第34-35页 |
·常用试剂及配制方法 | 第35-38页 |
·RT-qPCR引物及小鼠鉴定引物序列 | 第38-39页 |
2. 实验方法 | 第39-51页 |
·扁桃体中B细胞亚群的分选 | 第39-40页 |
·提取RNA | 第40-42页 |
·细胞裂解 | 第42-43页 |
·蛋白定量 | 第43-44页 |
·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第44-45页 |
·Western Blot | 第45-46页 |
·小鼠基因型的鉴定 | 第46-47页 |
·初次免疫小鼠 | 第47页 |
·免疫后取材 | 第47-48页 |
·脾脏中生发中心B细胞的检测 | 第48页 |
·脾脏中生发中心B细胞的流式分析 | 第48页 |
·ELISA | 第48-49页 |
·再次免疫小鼠 | 第49-51页 |
第三章 实验结果与分析 | 第51-61页 |
1. UHRF2在人扁桃体中各B细胞亚群的表达情况 | 第51-52页 |
2. 小鼠基因型鉴定和UHRF2蛋白水平表达检测结果 | 第52-53页 |
3. 骨髓中B细胞各亚群的检测结果 | 第53-54页 |
4. 小鼠脾重/体重和脾脏中单个核细胞数量的检测 | 第54-55页 |
5. 脾脏中B细胞亚群的检测 | 第55页 |
6. 派氏结中B细胞亚群的检测 | 第55-56页 |
7. 初次免疫后UHRF2基因敲除型小鼠脾脏生发中心B细胞比例上升 | 第56-57页 |
8. 初次免疫不影响UHRF2敲除型小鼠脾脏生发中心Tfh细胞比例 | 第57-58页 |
9. UHRF2敲除对初次免疫后小鼠抗体分泌的影响 | 第58页 |
10. UHRF2敲除对再次免疫后小鼠抗体分泌的影响 | 第58-60页 |
小结 | 第60-61页 |
第四章 总结与讨论 | 第61-64页 |
参考文献 | 第64-70页 |
致谢 | 第70页 |