| 上海海洋大学硕士学位论文 答辩委员会成员名单 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 引言 | 第12-16页 |
| 1.牙鲆 | 第12页 |
| 2.IGFs 系统 | 第12-15页 |
| 3.研究目的和意义 | 第15-16页 |
| 第一章 牙鲆 IGFBPs 家族基因的克隆与序列分析 | 第16-39页 |
| 1. 实验材料 | 第16-18页 |
| ·实验用鱼 | 第16页 |
| ·实验试剂 | 第16页 |
| ·常用试剂 | 第16-17页 |
| ·实验仪器 | 第17-18页 |
| 2. 实验方法 | 第18-32页 |
| ·总 RNA 提取与鉴定 | 第18-19页 |
| ·牙鲆 IGFBP-2a，-2b，-3，-4，-5 以及-6 cDNA 片段克隆 | 第19-25页 |
| ·RACE (Rapid Amplification cDNA Ends) | 第25-32页 |
| ·IGFBPs 小片段、5'RACE 和 3'RACE 序列拼接 | 第32页 |
| ·序列分析 | 第32页 |
| 3. 结果 | 第32-37页 |
| ·RNA 质量检测 | 第32页 |
| ·牙鲆 IGFBPs cDNA 克隆 | 第32-37页 |
| ·牙鲆 IGFBPs 进化树构建 | 第37页 |
| 4. 讨论 | 第37-39页 |
| ·牙鲆 IGFBP-2a 和-2b | 第37-38页 |
| ·牙鲆 IGFBP-3、-4、-5 以及-6 | 第38-39页 |
| 第二章 IGFBPs 家族基因在牙鲆发育过程中的表达分析 | 第39-53页 |
| 1. 实验材料 | 第39-40页 |
| ·实验用鱼 | 第39-40页 |
| ·实验试剂 | 第40页 |
| ·实验仪器 | 第40页 |
| 2. 实验方法 | 第40-42页 |
| ·总 RNA 提取与鉴定 | 第40页 |
| ·实时荧光定量 RT-qPCR | 第40-42页 |
| ·数据分析 | 第42页 |
| 3. 结果 | 第42-48页 |
| ·牙鲆各 IGFBPs 基因在成鱼各组织中的表达 | 第42-44页 |
| ·牙鲆各 IGFBPs 基因在胚胎、仔鱼不同发育阶段的表达 | 第44-46页 |
| ·TH 和 TU 对牙鲆仔鱼变态发育过程中各 IGFBPs 基因表达的影响 | 第46-48页 |
| 4. 讨论 | 第48-53页 |
| ·牙鲆各 IGFBPs 在雌雄成鱼不同组织中的表达 | 第48-49页 |
| ·牙鲆各 IGFBPs 在胚胎、仔鱼不同发育阶段的表达 | 第49-51页 |
| ·TH 和 TU 对牙鲆仔鱼变态发育过程中各 IGFBPs 基因表达的影响 | 第51-53页 |
| 第三章 T3 和 T4 对牙鲆胚胎细胞中 IGFBPs 家族基因表达水平的影响 | 第53-62页 |
| 1. 实验材料 | 第53页 |
| ·牙鲆胚胎细胞 | 第53页 |
| ·实验试剂 | 第53页 |
| ·实验仪器 | 第53页 |
| 2. 实验方法 | 第53-56页 |
| ·试剂配制 | 第54页 |
| ·传代培养 | 第54页 |
| ·细胞形态观察与激素处理 | 第54页 |
| ·总 RNA 提取与鉴定 | 第54页 |
| ·实时荧光定量 RT-qPCR | 第54-56页 |
| ·DNaseI 处理 | 第54-55页 |
| ·引物设计 | 第55页 |
| ·cDNA 合成 | 第55页 |
| ·荧光定量 PCR | 第55-56页 |
| ·数据分析 | 第56页 |
| 3. 结果 | 第56-61页 |
| ·IGFBP-1 | 第56-57页 |
| ·IGFBP-2 | 第57-58页 |
| ·IGFBP-3 | 第58-59页 |
| ·IGFBP-4 | 第59页 |
| ·IGFBP-5 | 第59-60页 |
| ·IGFBP-6 | 第60-61页 |
| 4. 讨论 | 第61-62页 |
| 结语 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 附录 | 第71-74页 |
| 发表文章 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
