附表 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
目录 | 第9-12页 |
图目录 | 第12-14页 |
表目录 | 第14-15页 |
英文縮略表 | 第15-16页 |
第一章 引言 | 第16-22页 |
·影响绿僵菌产孢的环境因子 | 第16-18页 |
·温度、湿度、通气、营养元素 | 第16-17页 |
·光照 | 第17-18页 |
·真菌产孢相关基因研究进展 | 第18-20页 |
·中央调控途径 | 第18-19页 |
·上游生长调控因子 | 第19页 |
·蓝光体受及其诱导产孢基因表达作用机制 | 第19-20页 |
·绿僵菌产孢相关基因研究进展 | 第20页 |
·本研究的目的与内容 | 第20-22页 |
第二章 蓝光对绿僵菌产孢的影响 | 第22-27页 |
·材料 | 第22-23页 |
·供试菌株和孢子培养 | 第22页 |
·光源 | 第22页 |
·主要仪器 | 第22-23页 |
·方法 | 第23-24页 |
·分生孢子悬浮液的配制 | 第23页 |
·绿僵菌发育进程的时段观察 | 第23页 |
·蓝光照射绿僵菌处理及产孢量测定 | 第23页 |
·数据分析 | 第23-24页 |
·结果分析 | 第24-26页 |
·绿僵菌IPPM010202菌株发育进展的对应培养时段 | 第24-25页 |
·蓝光对绿僵菌产孢的影响 | 第25-26页 |
·讨论 | 第26-27页 |
第三章 蓝光对绿僵菌fluG基因表达的影响 | 第27-49页 |
·材料 | 第27-29页 |
·供试菌株与质粒 | 第27页 |
·主要试剂及配制方法 | 第27-28页 |
·主要仪器 | 第28页 |
·引物 | 第28-29页 |
·方法 | 第29-36页 |
·基因同源片段的克隆 | 第29-30页 |
·基因全长序列的克隆 | 第30-31页 |
·基因cDNA序列的克隆 | 第31页 |
·Southern杂交验证fluG基因的拷贝数 | 第31-34页 |
·基因及编码氨基酸序列的生物信息学分析 | 第34页 |
·Real-Time PCR的特异性引物的设计及反应体系的确定 | 第34-35页 |
·标准曲线的建立 | 第35页 |
·不同蓝光处理cDNA样品的获得及fluG基因表达量分析 | 第35-36页 |
·结果与分析 | 第36-47页 |
·绿僵菌IPPM010202菌株基因片段的获得 | 第36页 |
·基因全长和cDNA序列的获得 | 第36-38页 |
·基因拷贝数分析 | 第38-40页 |
·基因及编码氨基酸序列的生物信息学分析 | 第40-43页 |
·fluG基因荧光定量PCR反应体系的确立及优化 | 第43-45页 |
·Real-Time PCR标准曲线的建立 | 第45-46页 |
·基因表达量分析 | 第46-47页 |
·讨论 | 第47-49页 |
第四章 绿僵菌fluG基因的产孢调节功能分析 | 第49-61页 |
·试验材料 | 第49-50页 |
·供试菌株与质粒 | 第49页 |
·主要试剂 | 第49-50页 |
·试验所用引物 | 第50页 |
·试验方法 | 第50-55页 |
·双元打靶载体pDHt/sk-fluG-Ben的构建策略 | 第50-51页 |
·双元打靶载体pDHt/sk-fluG-Ben的构建方法 | 第51-54页 |
·打靶载体转化绿僵菌 | 第54页 |
·fluG基因敲除突变株的验证 | 第54-55页 |
·基因敲除突变株的表型分析 | 第55页 |
·试验结果 | 第55-60页 |
·打靶载体的pDHt/sk-fluG-Ben构建 | 第55-56页 |
·PEG介导的原生质体的转化 | 第56-58页 |
·基因突变株的获得及验证 | 第58-59页 |
·基因突变株的表型分析 | 第59-60页 |
·讨论 | 第60-61页 |
第五章 全文结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-69页 |
附录 | 第69-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
作者简历 | 第74页 |