| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-18页 |
| 1 miRNA的成熟及生物学作用 | 第8-13页 |
| ·miRNA的发现 | 第8页 |
| ·miRNA的成熟机制 | 第8-9页 |
| ·miRNA的作用机制 | 第9-11页 |
| ·miRNA的功能研究进展 | 第11-13页 |
| 2 肌肉发育及遗传控制 | 第13-15页 |
| ·肌肉形成及发育 | 第13-14页 |
| ·肌肉生成的调控因子 | 第14-15页 |
| 3 肌肉相关miRNAs的研究进展 | 第15-17页 |
| ·肌肉中特异表达的miRNAs | 第15页 |
| ·miRNAs在肌肉中的功能 | 第15-17页 |
| 4 研究目的及意义 | 第17-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-37页 |
| 1 实验材料 | 第18-22页 |
| ·实验样品 | 第18页 |
| ·载体菌株和细胞系 | 第18页 |
| ·主要实验药品及试剂 | 第18-19页 |
| ·实验试剂制备 | 第19-20页 |
| ·实验仪器和设备 | 第20-21页 |
| ·生物学分析软件及网站 | 第21-22页 |
| ·实验总设计方案 | 第22页 |
| 2 实验方法 | 第22-37页 |
| ·总RNA的提取 | 第22-23页 |
| ·RNA的质量检测 | 第23页 |
| ·RNA的反转录 | 第23-24页 |
| ·miRNA-21的靶基因预测 | 第24页 |
| ·PCR引物的设计 | 第24-26页 |
| ·双荧光素酶靶标验证载体构建 | 第26-31页 |
| ·双荧光素酶靶标突变载体构建 | 第31-33页 |
| ·细胞培养 | 第33-35页 |
| ·细胞转染 | 第35-36页 |
| ·荧光素酶活性检测 | 第36-37页 |
| 第三章 结果与分析 | 第37-55页 |
| 1 RNA质量检测结果 | 第37页 |
| 2 靶标预测分析结果 | 第37-47页 |
| ·猪与人的成熟miRNA-21序列比对 | 第37页 |
| ·miRNA调控部分靶基因预测结果 | 第37-38页 |
| ·miRNA-21靶基因功能注释结果 | 第38-40页 |
| ·候选靶基因Gene ontology分析和Pathway分析结果 | 第40-45页 |
| ·靶基因位点保守性分析 | 第45-46页 |
| ·猪与候选靶基因TSC1和SMAD7结合位点推断图 | 第46-47页 |
| 3 TSC1 3'UTR和SMAD7 3'UTR双荧光素酶载体的构建 | 第47-48页 |
| ·PCR扩增TSC1和SMAD7基因3'UTR结果 | 第47-48页 |
| ·TSC1和SMAD7双荧光素酶靶标验证载体酶切鉴定结果 | 第48页 |
| 4 TSC1 3'UTR和SMAD7 3'UTR双荧光素酶突变载体的构建 | 第48-51页 |
| ·PCR扩增TSC1和SMAD7基因3'UTR结果 | 第49-50页 |
| ·TSC1和SMAD7双荧光素酶靶标突变载体酶切鉴定结果 | 第50-51页 |
| 5 细胞转染 | 第51-52页 |
| 6 荧光素酶活性检测 | 第52-55页 |
| ·TSC1基因双荧光素酶检测结果 | 第52-53页 |
| ·SMAD7基因双荧光素酶检测结果 | 第53-55页 |
| 第四章 讨论 | 第55-59页 |
| 1 关于靶基因预测 | 第55页 |
| 2 关于靶基因介导的miRNA-21调控机制 | 第55-59页 |
| 第五章 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-69页 |
| 附录 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 作者简介 | 第71页 |
