| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 目录 | 第10-13页 |
| 1 引言 | 第13-24页 |
| ·高等植物中开花调控途径 | 第13-14页 |
| ·大豆开花与光周期调控相关研究 | 第14-19页 |
| ·大豆基因E3和E4编码光敏色素蛋白A | 第15-17页 |
| ·大豆E2基因与拟南芥GIGANTEA基因有同源性 | 第17页 |
| ·大豆中的FT同源基因 | 第17-19页 |
| ·生物信息学分析方法 | 第19-22页 |
| ·序列比对 | 第19-20页 |
| ·电子克隆 | 第20页 |
| ·进化分析 | 第20-21页 |
| ·结构和功能预测 | 第21-22页 |
| ·研究的意义和目的 | 第22-23页 |
| ·技术路线 | 第23-24页 |
| 2. 材料与方法 | 第24-45页 |
| ·实验材料 | 第24-27页 |
| ·种子材料 | 第24页 |
| ·菌种和质粒 | 第24页 |
| ·酶和生化试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24-25页 |
| ·引物序列 | 第25-26页 |
| ·培养基配方 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-45页 |
| ·种子的培养和处理 | 第27页 |
| ·TRIZOL法提取总RNA | 第27页 |
| ·RNA质量检测 | 第27-28页 |
| ·cDNA-AFLP方法分离差异基因片段 | 第28-31页 |
| ·差异片段的回收和克隆测序 | 第31-34页 |
| ·半定量RT-PCR法验证差异片段的表达 | 第34-35页 |
| ·候选基因的烟草VIGS分析 | 第35-37页 |
| ·全长cDNA的分离 | 第37-38页 |
| ·GmMS基因的RT-PCR表达分析 | 第38-39页 |
| ·甲硫氨酸合成酶基因的生物信息学分析 | 第39-40页 |
| ·GmMS基因过表达载体转化烟草及其分析 | 第40-43页 |
| ·转基因烟草T1代植株生理生化指标的测定 | 第43-44页 |
| ·GmMS基因过表达载体转化大豆 | 第44-45页 |
| 3. 结果分析 | 第45-70页 |
| ·RNA提取结果 | 第45页 |
| ·大豆不同光周期处理下差异片段的筛选 | 第45-46页 |
| ·差异片段测序结果及半定量RT-PCR验证 | 第46-49页 |
| ·候选差异基因在烟草中的VIGS分析 | 第49-51页 |
| ·VIGS载体的构建 | 第49页 |
| ·烟草VIGS后的表型观察 | 第49-50页 |
| ·VIGS烟草内源基因的表达检测 | 第50-51页 |
| ·全长基因cDNA序列的分离 | 第51页 |
| ·甲硫氨酸合成酶基因在大豆不同组织中的表达 | 第51-52页 |
| ·大豆甲硫氨酸合成酶基因的生物信息学分析 | 第52-57页 |
| ·大豆甲硫氨酸合成酶的聚类分析 | 第52-53页 |
| ·大豆甲硫氨酸合成酶的信号肽分析 | 第53-54页 |
| ·大豆甲硫氨酸合成酶的疏水性分析及跨膜区域预测 | 第54-55页 |
| ·大豆甲硫氨酸合成酶磷酸化位点分析 | 第55页 |
| ·大豆甲硫氨酸合成酶二硫键分析及亚细胞定位 | 第55-56页 |
| ·大豆甲硫氨酸合成酶结构域分析 | 第56-57页 |
| ·大豆甲硫氨酸合成酶的三级结构预测 | 第57页 |
| ·过表达转基因烟草的获得 | 第57-58页 |
| ·T0代转基因烟草鉴定 | 第58-59页 |
| ·T0代转基因烟草植株的表型观察 | 第59页 |
| ·T1代转基因烟草鉴定 | 第59-62页 |
| ·T1代转基因烟草种子抗性筛选 | 第59-60页 |
| ·T1代转基因烟草PCR检测 | 第60-61页 |
| ·T1代转基因烟草转基因阳性植株的RT-PCR验证 | 第61-62页 |
| ·转基因烟草生理生化指标的测定 | 第62-67页 |
| ·转基因烟草甲硫氨酸合成酶活性的测定 | 第62-63页 |
| ·转基因烟草氨基酸含量的变化 | 第63-65页 |
| ·转基因烟草蛋白含量的变化 | 第65页 |
| ·转基因烟草叶绿素含量的变化 | 第65-66页 |
| ·转基因烟草花青素含量的变化 | 第66-67页 |
| ·转基因烟草开花时间统计 | 第67页 |
| ·GmMS过表达转基因大豆的获得 | 第67-70页 |
| ·大豆再生植株的PCR检测 | 第68-69页 |
| ·大豆转基因植株的RT-PCR验证 | 第69-70页 |
| 4 讨论 | 第70-73页 |
| 5 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-79页 |
| 附录 | 第79-85页 |
| 致谢 | 第85页 |